Определение вариантов полиморфизма гена интерлейкина-28B у пациентов с сочетанной инфекцией ХГС/ВИЧ

01.06.2013
915

1Казанский государственный медицинский университет; 2Республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями Министерства здравоохранения Республики Татарстан, Казань; 3Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва

Цель исследования. Выявление полиморфизма единичных нуклеотидов (ПЕН) в локусах rs8099917 и rs12979860 гена интерлейкина 28В (ИЛ-28В) у пациентов с сочетанной инфекцией хронический гепатит С/ВИЧ (ХГС/ВИЧ) и его значение в частоте достижения вирусологического ответа при комбинированной противовирусной терапии ПегИФН-α-2а и рибавирином.
Материалы и методы. У 43 пациентов (из них 67% мужчин) с ХГС/ВИЧ в возрасте 32,91 ± 0,58 года со сроком инфицирования HCV до 10 лет, ВИЧ – 6,89 ± 0,53 года выявляли ПЕН в локусах rs8099917 и rs12979860 гена ИЛ-28В с помощью набора реагентов «АмплиСенс® Геноскрин-IL28В-FL».
Результаты. Выявлено достаточно частое распространение благоприятных генотипов СС и ТТ гена ИЛ-28B, а также их сочетания, особенно при HCV генотипа 3; у этих же пациентов был более выражен воспалительный процесс на фоне высокой вирусной нагрузки РНК HCV.
Заключение. Определение ПЕН rs12979860 и rs8099917 гена ИЛ-28В у ВИЧ-инфицированных имеет практическое значение для получения вирусологических ответов при противовирусной терапии ХГС. Стойкий вирусологический ответ был достигнут у 80,95% пациентов с благоприятными генотипами СС и ТТ.

Стойкий вирусологический ответ (CВО – отсутствие РНК HCV через 24 нед после окончания терапии) при назначении комбинированной терапии достигается у 27–44% больных с сочетанной инфекцией хронический гепатит С/ВИЧ (ХГС/ВИЧ) [1]. Надежными прогностическими факторами для получения СВО являются генотип 2 или 3 HCV, низкая (

Учитывая актуальность изучения генетически детерминированных факторов человека – предикторов ответа на ПВТ больных ХГС, целью изучения стало выявление ПЕН в локусах rs8099917 и rs12979860 гена ИЛ-28В у пациентов с ХГС/ВИЧ и его значение в частоте достижения вирусологического ответа при комбинированной ПВТ ПегИФН-α-2а и рибавирином.

Материалы и методы

В исследование были включены 43 пациента с ХГС/ВИЧ в возрасте 32,91 ± 0,58 года (среди них 67% мужчин и 33% женщин) со сроком инфицирования HCV до 10 лет, ВИЧ – 6,89 ± 0,53 года. Исходные показатели активности НСV-инфекции определялись высокой (> 400 000 МЕ/мл) вирусной нагрузкой РНК HCV у 81% больных; генотипом 1 у 16 (37%), генотипом 3 – у 27 (63%) исследуемых; уровнем АлАТ 85,46 ± 7,73 Ед/л (N = 23,19 ± 9,93 Ед/л), у мужчин – 81,29 ± 7,69 Ед/л (N = 22,6 ± 1,26 Ед/л), у женщин – 44,85 ± 6,23 Ед/л (N = 19,23 ± 1,2 Ед/л). 26 (60,5%) пациентов получали антиретровирусную терапию, из них 14 (53,8%) имели неопределяемый уровень РНК ВИЧ в крови. Медиана абсолютного числа CD4+-лимфоцитов – 0,400 ± 0,04 клеток/мкл, относительного – 25,41 ± 2,41%. У 17(39,5%) больных, не получавших лечения, вирусная нагрузка РНК ВИЧ в ПЦР была низкой (

Диагноз «ХГС и ВИЧ-инфекция» устанавливался на основании эпидемиологических и клинико-лабораторных данных и подтверждался выявлением специфических маркеров инфицирования HCV и ВИЧ методом ИФА и иммуноблота, а также детекцией РНК HCV (с генотипированием) и РНК ВИЧ методом ПЦР (качественный и количественный методы). Чувствительность качественного метода ПЦР для обнаружения РНК HCV составила 15 МЕ/ мл, количественного – 150 МЕ/мл; для определения РНК ВИЧ порог составил 150 копий/мл. Выявление ПЕН в локусах rs8099917 и rs12979860 гена ИЛ-28В проводили с помощью набора реагентов «АмплиСенсR Геноскрин-IL28В-FL» в лаборатории вирусных гепатитов отделения молекулярной диагностики Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Москва).

Статистическую обработку данных проводили с использованием MS Excel 2003 и подсчетом критерия Стьюдента (t).

Результаты и обсуждение

В ходе проведенного генетического анализа выявлено, что частота встречаемости неблагоприятных генотипов СТ и ТТ полиморфизма rs12979860 и ТG и GG полиморфизма rs8099917 гена ИЛ-28B составила соответственно 49 и 33%, в то время как благоприятные варианты генотипов СС полиморфизма rs12979860 и ТТ полиморфизма rs12979860 регистрировались соответственно у 51 и 67% пациентов. Следует отметить, что генотип ТТ полиморфизма rs8099917 регистрировался достоверно чаще (67 и 33%, р 0,01) по сравнению с генотипами ТG и GG той же аллели, являясь предиктором достижения СВО. Сочетание благоприятных генотипов СС полиморфизма rs12979860 и ТТ полиморфизма rs8099917 гена ИЛ-28B встречалось у 23 (53%) больных ХГС/ВИЧ, что, согласно литературным данным, тесно связано с быстрой вирусной кинетикой в первые 12 нед лечения – наиболее важным положительным предиктором ответа на ПВТ – и получением СВО у пациентов с ХГС/ВИЧ [9, 10]. При ХГС при благоприятных генотипах ПЕН гена ИЛ-28В отмечается низкий базовый уровень индукции ИФН-индуцированных генов, однако при ПВТ отмечается выраженная индукция ИЛ-28В и соответственно ИФН-индуцированных генов, что проявляется высокой частотой СВО [11].

В настоящее время показано, что частота генотипа СС по ПЕН rs12979860 среди моноинфицированных лиц с HCV генотипов 2 и 3 составляет 46 и 55 % соответственно, в то время как при HCV генотипа 1 – 33,5% [12]. В исследовании V. Soriano и соавт. [9] среди ко-инфицированных доля пациентов, зараженных HCV генотипа 1, среди носителей генотипа СС была меньше, чем среди носителей генотипов СТ и ТТ rs12979860 (44 и 68%, соответственно), в то время как HCV генотипа 3 обнаруживали чаще у носителей генотипа СС, чем среди носителей генотипов СТ и ТТ (43 и 19%). В нашем исследовании (табл.1) мы также отмечали, что у пациентов с HCV генотипа 3 достоверно чаще, чем у пациентов с HCV генотипа 1, выявляли благоприятные варианты генотипов СС полиморфизма rs12979860 (74 и 26%; р 0,001) и ТТ полиморфизма rs8099917 (67 и 33%; р 0,01). У носителей всех генотипов преобладала высокая вирусная нагрузка РНК HCV в ПЦР. У 43% пациентов с благоприятными генотипами СС rs12979860 и ТТ rs8099917 по сравнению с носителями других генотипов была значительно повышена (> 5 N) активность АлАТ.

Таблица 1.

Все пациенты получали ПВТ: ПегИФН-α-2а (пегасис – в дозе 180 мкг/нед) и рибавирин (800–1200 мг/сут в зависимости от массы тела) в течение 48 нед. Анти-HCV-терапию отменяли при обнаружении РНК HCV методом ПЦР на 24-й неделе лечения. БВО был достигнут у 29 (70,7%) пациентов, ранний вирусологический ответ (РВО) – у 36 (83,7%). Вирусологический ответ на 24-й неделе лечения определялся у 36 (87,8%) больных, на 48-й неделе – у 35 (87,5%). СВО получен у 30 (78,9%) обследованных c благоприятными генотипами СС (73,9%) и ТТ (76,7%) (табл. 2), а при их сочетании – у 17 (80,95%) из 21 пациента. Из 8 (21,1%) «неответчиков» 4 имели благоприятные генотипы СС и ТТ, 3 – сочетание СС и ТТ; антиретровирусную терапию получали 5 пациентов с HCV генотипа 1.

Таблица 2.

Таким образом, результаты, полученные нами у пациентов с сочетанной инфекцией ХГС/ВИЧ, свидетельствуют о достаточно частом распространении благоприятных генотипов СС полиморфизма rs12979860 и ТТ полиморфизма rs8099917 гена ИЛ-28B, а также их сочетания, особенно при HCV генотипа 3. У таких пациентов был более выражен воспалительный процесс на фоне высокой вирусной нагрузки РНК HCV. Определение ПЕН rs12979860 и rs8099917 гена ИЛ-28В у ВИЧ-инфицированных имеет практическое значение для получения вирусологических ответов при ПВТ ХГС: СВО был достигнут у 80,95% пациентов с сочетанием благоприятных генотипов СС и ТТ.

Список литературы

  1. Chung R.T., Andersen J., Volberding P., Robbins G.K., Liu T., Sherman K.E. et al. Peginterferon alfa-2a plus ribavirin versus interferon alfa-2a plus ribavirin for chronic hepatitis C in HIV-coinfected persons. N. Engl. J. Med. 2004; 351: 451–459.
  2. Muir A.J., Bornstein J.D., Killenberg P.G. Atlantic Coast Hepatitis Treatment Group. Peginterferon alfa-2b and ribavirin for thetreatment of chronic hepatitis C in blacks andnon-Hispanic whites. N. Engl. J. Med. 2004; 350: 2265–2271.
  3. Missiha S., Heathcote J., Arenovich T., Khan K. Impact of Asian race on response to combination therapy with peginterferon alfa-2a and ribavirin in chronic hepatitis C. Am. J. Gastroenterol. 2007; 102: 2181–2188.
  4. Conjeevaram H.S., Fried M.W., Jeffers L.J., Terrault N.A., Wiley-Lucas T.E., Afdhal N. et al. Peginterferon and ribavirin treatment in African American and Caucasian American patientswith hepatitis C genotype 1. Gastroenterology 2006; 131: 470–477.
  5. Ge D., Fellay J., Thompson A. J. et al. Genetic variation in IL28 B predicts hepatitis C treatment-induced viral clearance. Nature 2009; 461(7262): 399–401.
  6. Rallón N.I., Naggie S., Benito J.M., Medrano J., Restrepo C., Goldstein D. et al. Association of a single nucleotide polymorphism near the interleukin-28B gene with response to hepatitis C therapy in HIV/hepatitis C virus-coinfected patients. AIDS 2010; 24(8): F23–F29.
  7. Rauch A., Kutalik Z., Descombes P. et al. Genetic variation in IL28 B is associated with chronic hepatitis C and treatment failure: a genome-wide association study. Gastroenterology 2010; 138(4): 1338–1345.
  8. Aparicio E., Parera M., Franco S., Perez-Alvarez N., Tural C. et al. IL28B SNP rs8099917 is strongly associated with pegylated interferon-alpha and ribavirin therapy treatment failure in HCV/HIV-patients. PLoS ONE 2010; 5(10): e13771.
  9. Rallon N.I., Soriano V., Naggie S., Restrepo C., Goldstein D., Vispo Е. et al. IL28B gene polymorphisms and viral kinetics in HIV/hepatitis C virus-coinfected patients treated with pegylated interferon and ribavirin. AIDS 2011; 25: 1025–1033.
  10. Labarga P., Barreiro P., Mira J.A., Vispo E., Rallon N., Neukam K. et al. Impact of IL28B polymorphisms on response to peginterferon plus ribavirin in HIV-HCV coinfected patients with prior non-response or relapse. AIDS 2011; 25: 1131–1133.
  11. Younossi Z.M., Birerdinc A., Estep M., Stepanovа M., Afendy А., Baranova А. The impact of IL28B genotype on the gene expression profile of patients with chronic hepatitis C treated with pegylated interferon alpha and ribavirin. Journal of Translational Medicine 2012, 10:25doi:10.1186/1479–5876–10–25.
  12. McCarthy J., Li J., Thompson A., Suchindran S., Lao X.Q., Patel K. et al. Replicated association between an IL28B gene variant and a sustained response to pegylated interferon and ribavirin. Gastroenterology 2010; 138: 2307–2314.

Об авторах / Для корреспонденции

Фазылов Вильдан Хайруллаевич – д-р мед. наук, проф., зав. каф. инфекционных болезней Казанского государственного медицинского университета
Адрес: 420012, Россия, Татарстан, Казань, ул. Бутлерова, д. 49.
Телефон: +7(843)267–80–72
E-mail: vildan47@rambler.ru

Чуланов Владимир Петрович – канд. мед. наук, зав. научно-консультативным клинико-диагностическим центром Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, руководитель Референс-центра по мониторингу за вирусными гепатитами Роспотребнадзора; vladimir.chulanov@pcr.ru
Манапова Эльвира Равилевна – канд. мед. наук, ассистент каф. инфекционных болезней Казанского государственного медицинского университета; elveram@yandex.ru
Карандашова Инга Вадимовна – канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаб. вирусных гепатитов отд. молекулярной диагностики и эпидемиологии Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора; inga.karandashova@pcr.ru
Долгин Вадим Александрович – мл. науч. сотр. лаб. вирусных гепатитов отд. молекулярной диагностики и эпидемиологии Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора; vadim.dolgin@pcr.ru
Бешимов Айрат Талгатович – канд. мед. наук, зав. отд-нием медико-социальной реабилитации больных ВИЧ-инфекцией Республиканского центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями Министерства здравоохранения Республики Татарстан; beshimov@rambler.ru

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь

Статьи по теме

Наши издания