Основные компоненты сигнального пути контрольной точки иммунитета PD-1/PD-L1 в плазме крови больных раком и доброкачественными опухолями яичников: клинико-морфологические корреляции

Цель. Анализ содержания растворимых форм ключевого рецептора программируемой гибели клетки sPD-1 и его лиганда sPD-L1 в плазме крови больных раком яичников с учетом основных клинических и морфологических характеристик заболевания. Материалы и методы. В исследование включили 94 больных раком, 22 пациента – c доброкачественными и 9 – c пограничными опухолями яичников. Возраст пациенток 18–78 лет. Группу контроля составили 34 практически здоровых женщины 18–68 лет. Анализ уровней sPD-1 и sPD-L1 проводили в плазме крови у всех больных до лечения иммуноферментным анализом (ИФА) с помощью наборов реактивов (Affimetrix, eBioscience) в соответствии с инструкциями производителя. Измерения проводили на полуавтоматическом иммуноферментном анализаторе BEP 2000 Advance (Siemens, Германия). Результаты. Уровень sPD-L1 в плазме крови больных раком яичников не отличается от контроля, а у пациенток с доброкачественными опухолями – статистически значимо ниже, чем в контроле и у больных раком. Уровень sPD-1 у больных раком яичников повышен по сравнению с контролем (p=0,03). Взаимосвязи уровней маркеров с гистологическим строением и степенью дифференцировки рака яичников не обнаружено. Уровень sPD-L1 возрастает с увеличением стадии заболевания (p<0,001), значимо выше у пациенток с асцитом, чем у больных без асцита, и при двустороннем поражении яичников по сравнению с односторонним. Уровень sPD-1 не зависит от показателей распространенности рака яичников. Заключение. Уровень sPD-L1 при раке яичников коррелирует с распространенностью процесса и может рассматриваться в качестве маркера для мониторинга анти-PD-1/PD-L1-терапии. Вопрос о клиническом значении sPD-1 требует дальнейшего изучения.

Рак яичников – одно из наиболее распространенных онкологических заболеваний женских половых органов, которое, несмотря на наличие достаточно специфичных и чувствительных серологических маркеров, у большинства пациенток по-прежнему диагностируется на поздних стадиях, когда опухоль уже распространена по брюшине. Современные стандарты лечения рака яичников, наряду с активным хирургическим вмешательством, включают различные схемы адъювантной и неоадъювантной химиотерапии, в первую очередь на основе препаратов платины, которые во многих случаях оказываются весьма эффективными. Однако процент рецидивов и смертность все еще остаются высокими. В настоящее время многие исследователи и клиницисты связывают возможность дальнейшего прогресса в повышении эффективности лечения этого заболевания не только с рациональным использованием существующих методов комбинированного и комплексного лечения, но и с разработкой принципиально новых патогенетических подходов, основанных на современных достижениях биохимии, молекулярной биологии и иммунологии опухолей.

Следует отметить, что многолетние попытки использовать в лечении рака яичников различные виды гормонотерапии так и не привели к значительному успеху; не нашли пока своего места в лечении данного заболевания и современные молекулярно-направленные («таргетные») препараты. В последние годы значительный интерес и надежды вызывает возможность иммунотерапевтического воздействия на рак яичников, направленного на подавление активности одного из сигнальных путей так называемых «контрольных точек иммунитета» – PD-1/PD-L, который в физиологических условиях контролирует выраженность и длительность аутоиммунного ответа, предотвращая повреждение собственных тканей [1–3].

Основными компонентами этого сигнального пути являются: белок программируемой клеточной гибели PD-1 (programmed cell death protein 1) и два его лиганда: PD-L1 и PD-L2. PD-1 представляет собой мембранный рецептор 1-го типа, принадлежащий к семейству CD28/CTLA-4 регуляторов Т-клеток и экспрессирующийся на их поверхности. Из лигандов наиболее значим PD-L1, известный также, как кластер дифференцировки 274 (CD274) или гомолог B7 1-го типа (B7-H1). В норме PD-L1 экспрессируется на антигенпрезентирующих дендритных и макрофагоподобных клетках периферических органов, а также на клетках плаценты, островков поджелудочной железы и сетчатки. В то же время мРНК PD-L1 обнаружена в значительно более широком спектре тканей, а индуцированная экспрессия PD-L1 может наблюдаться и на Т- и В-лимфоцитах, естественных киллерах, макрофагах, мезенхимальных стволовых и эпителиальных клетках. Активация PD-1/PD-L1-пути стимулирует апоптоз антигенспецифичных Т-клеток в лимфоузлах и одновременно подавляет апоптоз регуляторных супрессорных Т-клеток, что позволяет опухоли уйти от иммунного ответа организма. В связи с этим моноклональные антитела к PD-1 и PD-L1, предотвращающие их взаимодействие друг с другом и ингибирующие иммуносупрессивные эффекты опухолей, находят сейчас активное применение в терапии многих онкологических заболеваний, в первую очередь меланомы [4] и почечно-клеточной карциномы [5, 6]. В последние годы предпринимаются достаточно серьезные попытки применения этого вида иммунотерапии при раке яичников, в том числе резистентном к препаратам платины [3, 7].

Экспрессию PD-1 и/или PD-L1 в опухолях и инфильтрирующих опухоли лимфоцитах активно изучают иммуногистохимическими (ИГХ) методами в качестве предиктора эффективности анти-PD-1/PD-L-иммунотерапии [8]. Эти белки рассматривают и как молекулярные маркеры общего прогноза течения онкологических заболеваний и выживаемости пациентов, и в некоторых предварительных исследованиях уже продемонстрировано неблагоприятное влияние высокой активности PD-1/PD-L-пути на клиническое течение целого ряда опухолей [9–12]. В немногочисленных исследованиях последних лет показана положительная взаимосвязь экспрессии PD-1 и/или PD-L1 при раке яичников с распространенностью и степенью злокачественности опухоли [13, 14], ее ассоциация с наличием мутаций генов BRCA1/2 и TP53 [15, 16] и микросателлитной нестабильностью, являющейся одним из показателей чувствительности к анти-PD-1/PD-L-терапии [17]. Продемонстрирована также экспрессия этих белков на инфильтрирующих опухоль макрофагах и лимфоцитах, неоднозначно влияющая на выживаемость пациенток.

В то же время, по данным ряда крупных рандомизированных исследований, связь результатов ИГХ-определения экспрессии PD-1 и PD-L1 в опухолях с эффективностью анти-PD-1-терапии оказалась неоднозначной и, по-видимому, зависит от вида злокачественного новообразования [8, 18]. Скорее всего, наличие этих противоречий связано с трудностями стандартизации ИГХ-метода, результаты которого зависят от техники подготовки образцов, применяемых антител, различающихся по специфичности и сродству к различным эпитопам исследуемых белков, а также от критериев, используемых при интерпретации полученных данных. Одной из важнейших проблем ИГХ-тестирования PD-1 и PD-L1 является и т...

Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С., Уткин Д.О., Петрикова Н.А., Кушлинский Д.Н., Шабанов М.А., Хуламханова М.М., Ашрафян Л.А., Стилиди И.С.