Особенности биоценоза влагалища у женщин с нормальным и промежуточным типом мазка по результатам полимеразной цепной реакции в режиме реального времени

Цель исследования. Оценка вагинального биоценоза у женщин репродуктивного возраста методом ПЦР‑РВ при выявлении нормального и промежуточного типов мазка.
Материал и методы. Проведено количественное исследование состава биоценоза влагалища у 684 женщин репродуктивного возраста вне беременности.
Результаты исследования. Установлено, что промежуточный тип мазка независимо от наличия клинических проявлений, а также нормальный тип мазка при наличии клинических проявлений патологии влагалища требуют углубленного исследования биоценоза влагалища, включающего количественную оценку состава микробиоты с помощью ПЦР‑РВ.

Определенный количественный и качественный состав микрофлоры влагалища — основа репродуктивного здоровья женщины. Его изменения могут приводить к дисбиотическим нарушениям различной степени тяжести.

По данным разных авторов [2-4, 6-8], в зависимости от группы обследованных женщин частота встречаемости бактериального вагиноза может составлять от 5 до 80%, частота вульвовагинального кандидоза — от 7 до 25% [1, 5].

До недавнего времени исследования биоценоза влагалища основывались прежде всего на результатах микроскопического исследования влагалищных мазков [3]. Данный метод прост, не требует больших материальных затрат и обеспечивает быстрое получение результата, что обусловило его широкое распространение.

У пациенток с дисбиозом или вагинитом и клинические симптомы, и результаты микроскопического исследования позволяют врачу-клиницисту безошибочно поставить диагноз, но такая ситуация встречается все реже. Гораздо чаще врачи встречаются с вагинальными мазками промежуточного или нормального типа. Пациентки при этом могут предъявлять или не предъявлять жалобы, а врач-клиницист не всегда наблюдает специфическую клиническую картину. Основная проблема диагностики дисбиозов влагалища неясного генеза связана с отсутствием чувствительного метода для исследования количественного и качественного состава микрофлоры.

На сегодняшний день большое практическое значение имеет оценка клинической значимости выявления так называемого промежуточного типа мазка и разработка алгоритма дополнительного обследования таких пациенток. Одним из методов дополнительного исследования может быть полимеразная цепная реакция с детекцией результатов в режиме реального времени (ПЦР-РВ), позволяющая получить количественную характеристику состава биоценоза влагалища.

Целью настоящего исследования явилась характеристика вагинального биоценоза, полученная с помощью метода ПЦР-РВ у женщин репродуктивного возраста, при выявлении нормального и промежуточного типов мазков.

Материал и методы исследования

Обследованы 684 женщины репродуктивного возраста вне беременности, у которых при микроскопическом исследовании вагинального отделяемого выявляли нормальный или промежуточный вариант мазка согласно классификации Е.Ф. Киры [3].

Критериями исключения являлись наличие ВИЧ-инфекции, сифилиса, гепатитов В и С, обнаружение генитальных инфекций, вызванных облигатными патогенами (C.trachomatis, N.gonorhaeae, M.genitalium, T.vaginalis).

Материал для исследования брали с заднебоковой стенки влагалища в пробирку Эппендорф, содержащую 1 мл физиологического раствора. ДНК выделяли с использованием комплекта реагентов «Проба-ГС» (ООО «НПО ДНК-Технология»). Исследование биоценоза влагалища проводили методом ПЦР-РВ с использованием реагентов «Фемофлор» (ООО «НПО ДНК-Технология») в детектирующем ампли-фикаторе ДТ-96 согласно инструкции производителя (ООО «НПО ДНК-Технология»). В соответствии с данными клинической апробации теста «Фемофлор» была предложена следующая классификация видов биоценоза:

1. Нормоценоз (абсолютный нормоценоз) — вариант биоценоза, при котором доля нормофлоры в его составе была более 80%, количество Ureaplasma spp., Mycoplasma spp., Candida spp. — менее 10⁴ геном-эквивалентов/мл (гэ/мл).

2. Относительный нормоценоз — вариант биоценоза, при котором доля нормофлоры в его составе была более 80%, количество Ureaplasma spp., Mycoplasma spp., Candida spp. — более 10⁴ гэ/мл.

3. Умеренный (аэробный или анаэробный) дисбиоз — вариант биоценоза, при котором доля лактобактерий в его составе определяется в пределах 20–80% и увеличена доля аэробов и/или анаэробов.

4. Выраженный (аэробный, анаэробный или смешанный) дисбиоз — вариант биоценоза, в составе которого доля аэробов и/или анаэробов достигает 80%, а доля лактобактерий составляет менее 20%.

5. Статистическую обработку данных проводили с помощью программного пакета SPSS Statistics версии 17.0. В качестве меры центральной тенденции количественных признаков была выбрана медиана, а в качестве интервальной оценки — верхний и нижний квартили, так как исследуемые выборки не подчинялись закону нормального распределения.

Результаты исследования и обсуждение

Тумбинская Л.В., Ворошилина Е.С., Донников А.Е., Плотко Е.Э., Байрамова Г.Р.