Особенности экспрессии HLA-G при неразвивающейся беременности с нормальным кариотипом плода

Ген HLA-G обладает центральными функциями при процессинге и представлении антигена, ингибирует рецептор NK-клеток (KIR2DL4, killer cell immunoglobulin-like receptor-2 DL4), что приводит к снижению иммунного ответа на границе мать-плод и обеспечивает иммунную толерантность к плоду со стороны материнского организма. Исходя из этого, было проведено немало экспериментальных исследований, изучающих экспрессию гена HLA-G, и продемонстрировано его влияние на развитие осложнений беременности, таких, как привычная потеря плода на ранних сроках, где иммунологические факторы, как считается, играют решающую роль. Цель: Изучить экспрессию HLA-G и KIR2DL4 рецептора в абортивном материале при неразвивающейся беременности (при нормальном кариотипе плода и при полиплоидии) и при нормальной прогрессирующей беременности (при медицинском аборте). Материалы и методы: Дизайн исследования: было получено 115 образцов абортивного материала: две основные группы с неразвивающейся беременностью (группа 1 – 36 образцов с нормальным кариотипом плода, группа 2 – 35 образцов с кариотипом плодов по типу полиплоидии) и контрольная группа при медицинском аборте (группа 3 – 44 образца с нормальным кариотипом плода). В данной работе применялись: цитогенетический метод и морфологическое исследование (гистологический, и иммуногистохимический, морфометрический метод). Результаты: В иммуногистохимическом исследовании верифицирована экспрессия HLA-G в клетках вневорсинчатого трофобласта и экспрессия KIR2DL4 в ворсинах хориона (в цитотрофобласте и синцитиотрофобласте), в железах, строме и поверхностном эпителии гравидарного эндометрия, как в группах с неразвивающейся беременностью, так и при физиологической беременности. При неразвивающейся беременности экспрессия HLA-G была статистически значимо ниже, по сравнению с группой контроля (в группе 1 – 37,7(9,9), в группе 2 – 36,4(8,4), в группе контроля – 67,1 (5,6) p<0,001). Заключение: При неразвивающейся беременности в структурах ворсин хориона отмечается значимое снижение экспрессии HLA-G в сравнении с группой контроля. Результаты свидетельствует о роли HLA-G для прогрессирования беременности.

Этиология самопроизвольного прерывания беременности разнообразна и зависит от многих факторов. Одни из них непосредственно приводят к закладке аномального эмбриона (генетические факторы), другие создают неблагоприятные условия для его нормального развития (иммунологические эндокринные нарушения, инфекционно-воспалительные заболевания, тромбофилии и многие другие). В настоящее время известно более 80 иммунологических биомаркеров, которые могут приводить к прерыванию беременности на всех сроках гестации [1–3].

Исследование аллоиммунитета беременной, первые работы по изучению которого относятся к началу 1980-х гг. [4–8], подтверждает связь привычного выкидыша с индивидуальными особенностями системы HLA I и II класса (Human leukocyte antigen, главный комплекс гистосовместимости), что может приводить к нарушению выработки антител, блокирующих реакцию смешанной культуры лимфоцитов супругов (mixed lymphocyte reaction blocking antibodies, MLR-Bf), антиотцовских цитотоксических антител (anti-paternalcyto-toxicantibodies, APCA) и антиидиотипических антител (антиидиотипы, anti-idiotypic antibodies, Ab2), необходимых для успешной имплантации и развития беременности [9, 10].

Доказано, что у беременных тканевая экспрессия белковых продуктов гена HLA-G – неклассической молекулы HLA I класса – в основном, осуществляется клетками трофобласта. Этим белковым продуктам экспрессии отводится иммуномодулирующий эффект, влияющий на взаимодействия различных клеток иммунной системы (децидуальные натуральные киллеры (dNK), Т-клетки, макрофаги) и регулирующий миграцию клеток во время развития плаценты, что, в конечном счете, определяет исход беременности.

Продукция HLA-G представляется критическим фактором дифференцировки трофобласта и полноценной инвазии. Известно, что напрямую экспрессия HLA-G не связана с защитой эмбриона/плода от атаки материнскими клетками иммунной системы, однако существует влияние на ремоделирование тканей и сосудов. Секретируемые молекулы растворимой формы HLA-G клетками вневорсинчатого трофобласта (EVT) регулируют децидуальную и эндоваскулярную инвазию [11–13]. Их клетки постепенно замещают эндотелий в спиральных артериях матки, увеличивая их диаметр, что обеспечивает надлежащий приток крови к межворсинчатому пространству для питания плода. Этот процесс требует присутствия dNK-клеток – самой многочисленной клеточной популяции на границе раздела матери и плода.

Кроме того, мРНК HLA-G обнаружена во всех клеточных популяциях EVT, включая культуру клеток трофобласта: интерстициальный и эндоваскулярный трофобласт, а также клетки плацентарного ложа. Транскрипты HLA-G были обнаружены в цитотрофобласте и мезенхимальных клетках ворсин хориона. Показано, что синцитиотрофобласт (ST) не экспрессирует HLA-G. Кроме EVT, белковые продукты экспрессии HLA-G были обнаружены в клетках амниона и клетках печени плода. При инвазии трофобласта и на клетках базальной пластинки плаценты тяжелые цепи HLA-G и HLA-C представлены в связи с 2β-микроглобулином. Эти же цепи могут быть обнаружены и в виде отдельных молекул, но не на каждой клетке. Напротив, клетки гладкого хориона экспрессируют исключительно HLA-G антиген, но не HLA-A, B или HLA-C антигены. Это различие в экспрессии классических и неклассических антигенов I класса указывает на наличие тканеспецифической регуляции.

Передача сигналов от эндосом dNK стимулирует толерогенную активность NK-клеток, поддерживая при этом способность к противовирусному иммунитету на границе раздела матери и плода [14]. «Универсальный» рецептор HLA-G, экспрессируемый во всех исследованных NK-клетках, был описан в конце 1990-х: KIR2DL4 [15]. Так, HLA-G может взаимодействовать своими внеклеточными доменами с рецепторами лейкоцитов, включая CD8, LILRB1 и LILRB2, и с иммуноглобулиноподобным рецептором киллерных клеток KIR2DL4 [16]. Было показано, что клетки EVT проявляют значительно большую активность в синтезе и сборке молекул HLA-G, чем все остальные окружающие клетки матери и плода. Однако экспрессия HLA-G молекул на поверхности клеток не коррелирует с этой повышенной активностью. Постоянное смывание молекул HLA-G c поверхности трофобласта играет центральную роль в защите плода от иммунной атаки матери. HLA-G обеспечивает выживание трофобласта в тканях матери, являясь протективной молекулой против цитотоксичности NK-клеток. Защиту клеток-мишеней от цитолиза проявляет только HLA-G антиген, но не классические HLA антигены I класса. Система распознавания беременности включает в себя пептиды, которые специфически активируют ингибиторные рецепторы NK-клеток (KIR) или специфически активируют активаторные рецепторы NK-клеток (KAR), включая цитотоксическую реакцию. На больших гранулярных лимфоцитах матки имеются оба типа рецепторов. Эти рецепторы относятся к суперсемейству иммуноглобулинов. HLA-G антигены распознаются KIR-рецепторами, и таким образом цитотоксическая реакция выключается. Активация KAR может приводить к отторжению трофобласта. Хоть HLA-G и подавляет пролиферацию и цитотоксическую акт...

Баклейчева М.О., Беспалова О.Н., Иващенко Т.Э., Траль Т.Г., Толибова Г.Х., Тихонов А.В., Петрова Л.И., Дудкина В.С.