Акушерство и Гинекология №7 / 2017
Особенности фенотипа лимфоцитов периферической крови женщин с идиопатическим привычным выкидышем в зависимости от исхода беременности на фоне иммуноцитотерапии
ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Ретроспективный анализ субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови пациенток с идиопатическим привычным выкидышем (ПВ) с разными исходами первого триместра беременности, наступившей после предгестационной аллоиммунизации.
Материал и методы. Фенотип лимфоцитов определяли у 36 пациенток с ПВ вне беременности и во время беременности на фоне аллоиммунизации. У 30 пациенток беременность завершилась рождением ребенка, 6 пациенток потеряли беременность.
Результаты исследования. Вне беременности у пациенток с состоявшимся выкидышем было более низким содержание НК-клеток. Снижение в 5–6 недель гестации содержания субпопуляций CD3-CD16+, CD56+, CD45+CD56,16+-лимфоцитов ниже порогового уровня со 100% специфичностью позволяет прогнозировать выкидыш.
Заключение. Полученный результат подтверждает необходимость провоспалительного состояния иммунной системы женщины в ранние сроки гестации для пролонгирования беременности и позволяет формировать подходы к выбору иммуномодулирующей терапии для пациенток с идиопатическим ПВ.
Идиопатический привычный выкидыш – акушерское осложнение, занимающее в структуре невынашивания от 5 до 20% случаев. Этиологию его на настоящий момент связывают с нарушениями функционирования материнской иммунной системы, развивающей неадекватный ответ на отцовские антигены плода, то есть с аллоиммунными причинами [1]. Такой диагноз ставится при исключении генетических, анатомических, гормональных, инфекционных, аутоиммунных факторов привычных потерь беременности. По данным зарубежных авторов, шанс доносить беременность без терапии после трех выкидышей, обусловленных аллоиммунными механизмами, составляет 30%, после четырех – 25%, после пяти – 5% [2, 3], и вероятность иммунологических нарушений в генезе привычного выкидыша растет с увеличением числа потерь беременностей [4].
Поэтому в настоящее время при постановке диагноза идиопатического привычного выкидыша требуется последующее иммунологическое обследование, оптимизация подготовки к беременности и комплексная терапия в ранние сроки беременности для ее пролонгирования с помощью иммунокорригирующей терапии [5]. Одним из вариантов такой терапии является иммуноцитотерапия (ИЦТ) – иммунизация женщин аллогенными лимфоцитами партнеров (аллоиммунизация). Считается, что использование ИЦТ способствует коррекции ответа иммунной системы женщины на аллоантигены полового партнера и формированию толерантности, сопровождающей нормальное течение беременности.
В формировании толерантности при беременности участвуют практически все типы иммунокомпетентых клеток. Существуют доказательства того, что субпопуляционный состав и активационное состояние клеток периферической крови беременных отражает состав и активационное состояние клеток маточно-плацентарного «интерфейса» [6]. Поэтому исследование особенностей субпопуляционного состава крови женщин во время беременности является актуальным в поиске показателей, значимых для диагностики акушерских осложнений. Исследование соотношений между основными субпопуляциями лимфоцитов (NК-клетками, В- и Т-лимфоцитами) у пациенток с идиопатическим привычным выкидышем в период предгестационной подготовки и в первом триместре беременности очень важны для поиска клинико-лабораторных критериев назначения иммунокорригирующей терапии, а также для понимания механизмов ее иммуномодулирующего действия.
Целью настоящей работы стал ретроспективный анализ особенностей субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови пациенток с идиопатическим привычным выкидышем с разными исходами беременности, наступившей на фоне аллоиммунизации лимфоцитами партнера.
Материал и методы исследования
Основную группу исследования составили 36 беременных с идиопатическим привычным выкидышем (две и более потери беременности от одного партнера, произошедшими в первом триместре беременности, с подтвержденным нормальным кариотипом плода), из которых у 30 пациенток беременность была пролонгирована до доношенного срока и завершилась рождением ребенка, а у 6 пациенток произошло самопроизвольное прерывание беременности в первом триместре.
Критериями включения женщин в исследование были: подписание формы информированного согласия на участие в исследовании, возраст женщин от 20 до 40 лет, самопроизвольное наступление беременностей, нормальный кариотип обоих партнеров, нормозооспермия у партнера, отсутствие анатомических, генетически обусловленных, аутоиммунных, гормональных нарушений, препятствующих наступлению и вынашиванию беременности, отсутствие тяжелых экстрагенитальных заболеваний. Все пациентки с привычным выкидышем прошли предгестационную подготовку, включающую аллоиммунизацию лимфоцитами полового партнера дважды с интервалом в один месяц на 5–9-й день менструального цикла. При этом пациенткам внутрикожно вводили 50 млн клеток в ладонную поверхность предплечья в 10–12 точек. В первом триместре беременности аллоиммунизацию проводили в сроке 5–6 недель и 8–9 недель беременности.
Кровь для анализа вне беременности забирали натощак из локтевой вены до иммунизации и после каждого введения клеток на 18–22-й день менструального цикла, у беременных – до иммунизации в 5–6 недель, в 8–9 недель и 12 недель гестации после введения клеток.
Поверхностный фенотип клеток периферической крови определяли с помощью стандартного набора моноклональных антител (мАт), меченных флуоресцеин-изотиоцианатом (ФИТЦ) или фикоэритрином (ФЭ), против антигенов C...
