Особенности иммуно­глобулиноподобных рецепторов естественных киллеров и их лигандов у супругов и исходы беременности при иммуно­цитотерапии привычного выкидыша

Актуальность: Нарушение фето-плацентарного кровотока признается основной причиной потери беременности на ранних сроках. Формирование сосудистого русла при децидуализации эндометрия и контроль инвазии трофобластов происходят при участии естественных клеток-киллеров (NK-клеток), иммуноглобулиноподобные рецепторы (KIR) которых через взаимодействие с молекулами HLA I класса (HLA I) определяют характер действия NK-клеток на клетки-мишени. Особенности молекул KIR и HLA I, являющихся лигандами KIR (KIR-L), у матери и отца через обусловленные NK-клетками реакции аллосовместимости могут влиять на эффективность иммуно­цитотерапии (ИЦТ) при беременности.
Цель: Провести типирование по генам классических HLA I и генам KIR пациенток и их супругов в парах с идиопатическим привычным выкидышем (ПВ) для выявления особенностей генотипов KIR и представленности KIR-L у супругов при разных исходах беременности.
Материалы и методы: В исследование включили 39 супружеских пар с ПВ. ИЦТ проводили дважды вне беременности и дважды во время беременности. Для типирования генов KIR и генов HLA I использовали периферическую кровь матери и отца. Типирование проводили методом высокопроизводительного секвенирования NGS.
Результаты: Проведенное типирование по генам KIR и генам классических HLA I пациентов в супружеских парах с идиопатическим ПВ и лечением с использованием ИЦТ не выявило каких-либо особенностей KIR и KIR-L у супругов. Также не выявлено связи особенностей KIR и KIR-L у супругов с исходами беременности, наступившей после ИЦТ. Полученные результаты не позволяют рассматривать особенности генотипов KIR и классических HLA I у супругов как предпосылку возникновения аллонесовместимости мать–плод при ПВ и не выявляют у супругов сочетаний KIR и KIR-L, влияющих на эффективность лечения с включением ИЦТ.
Заключение: Отсутствие связи исходов лечения ПВ при включении ИЦТ с особенностями генотипов KIR и классических HLA I супругов свидетельствует о необходимости новых направлений исследований иммунологических механизмов аллогенного взаимодействия мать–плод при беременности и мать–отец при ИЦТ. Перспективным направлением является исследование особенностей экспрессии генов KIR в NK-клетках у женщин в норме и при патологии беременности.

Вклад авторов: Тетруашвили Н.К., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т. – концепция и дизайн исследования; 
Хорошкеева О.В. – подбор клинических образцов; Тетруашвили Н.К., Хорошкеева О.В. – клиническое обследование пациентов, получение биообразцов; Янкевич Т.Э. – KIR- и HLA-типирование биологических образцов; Кречетов С.П., Хорошкеева О.В., Кречетова Л.В. – анализ клинических и лабораторных данных, написание статьи; Инвияева Е.В. – редактирование. 
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: Исследование не имело спонсорской поддержки.
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено комиссией по этике ФГБУ «НМИЦ АГП 
им. В.И. Кулакова» Минздрава России (протокол №35 от 09.04.2009).
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Кречетова Л.В., Хорошкеева О.В., Тетруашвили Н.К., Кречетов С.П., Янкевич Т.Э., Инвияева Е.В., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т. Особенности иммуноглобулин-подобных рецепторов естественных киллеров и их лигандов у супругов и исходы беременности при иммуноцитотерапии привычного выкидыша.
Акушерство и гинекология. 2024; 11: 98-108
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.261

Терапия привычного выкидыша (ПВ) – актуальная тема в течение десятилетий. Особое внимание к иммунологическому аспекту ПВ было привлечено опытом изучения иммунологических основ аллосовместимости в практике трансплантологии, в результате чего плод стали называть полуаллогенным трансплантатом [1], и отторжение эмбриона в ранние сроки беременности стали связывать с иммунологическими нарушениями [2]. ПВ, согласно определению Всемирной организации здравоохранения, устанавливается в случае произошедших подряд трех и более самопроизвольных прерываний беременности на сроке гестации до 22 недель (код N96 по МКБ-10), но считается допустимым начинать обследование после двух последовательных потерь, особенно у женщин в возрасте >35 лет [3]. По данным различных авторов, в 5–20% случаев причины прерываний не могут быть установлены современными диагностическими средствами [4], и ПВ признается идиопатическим, патогенез которого связывают с иммунологическими причинами [5]. Подтверждением верности такого предположения стало успешное применение иммуномодулирующих видов терапии, и в первую очередь клеточной иммуноцитотерапии (ИЦТ), заключающейся во введении женщине аллогенных лейкоцитарных клеток, опыт которой насчитывает более 40 лет [6]. Однако до настоящего времени нет однозначного мнения о необходимости ИЦТ для терапии ПВ [7], и имеются публикации, отрицающие ее преимущества по сравнению с плацебо [8]. Тем не менее следует признать, что использование ИЦТ в случаях с идиопатическим ПВ сопровождается значимым увеличением количества живорождений [9]. При этом есть сообщения о преимуществе иммунизации клетками партнера перед использованием клеток донора [10]. Причина отсутствия согласованного мнения об эффективности ИЦТ, по-видимому, кроется в разнообразии процедур выделения клеток, в количестве вводимых клеток, в кратности и способах введения, в формировании групп пациентов без учета особенностей невынашивания беременности в анамнезе [11].

Обусловленность аллогенности плода для матери преимущественно генами HLA (Human Leukocyte Antigen) определили долговременные попытки связать причины прерывания беременности на ранних сроках гестации с аллельными особенностями родителей по системе HLA [12]. Однако в настоящее время эта гипотеза требует уточнений [13]. Основное предназначение HLA – выявление клеток, несущих чужеродную генетическую информацию, через представление эпитопов синтезируемых в клетке белков в составе молекул HLA I класса (HLA I), экспрессируемых на поверхности практически всех ядросодержащих клеток и тромбоцитов. Представление молекулами HLA I эпитопов, отсутствующих в собственных белках организма, приводит к появлению клонов Т-киллеров адаптивной иммунной системы, уничтожающих клетки с синтезом чужеродных белков. Клетки организма, на поверхности которых снижается количество молекул HLA I (в случае заражения вирусами или вследствие проявлений мутаций), характеризуются как «потерявшие признаки своего» (missing self) и становятся объектом активности естественных киллеров (NK, NK-клетки) [14], принадлежащих к врожденной иммунной системе. Тот факт, что NK составляют до 70% лимфоидных клеток в плаценте в I триместре беременности [15], а на трофобластах наблюдается измененная экспрессия молекул HLA I [16], позволяет признать NK участниками аллоиммунных взаимодействий.

Иммуноглобулиноподобные рецепторы киллерных клеток (killer-cell immunoglobulin-like receptor, KIR) играют ключевую роль в управлении ответом NK-клеток на изменение эпитопов как классических молекул HLA I (A/B/C), так и неклассических (HLA-G/F), являющихся их лигандами (KIR-L). KIR регулируют функции NK-клеток независимо от происхождения представляемых пептидных эпитопов и бывают ингибирующими (iKIR) и активирующими (aKIR). Взаимодействие iKIR с их лигандами (iKIR-L) играет определяющую роль в «настройке» NK-клеток на ответ, связанный с «потерей своего» [17]. Генам KIR, как и генам HLA, присущ высокий аллельный полиморфизм, и при этом в гаплотипах KIR могут присутствовать не все известные гены [18]. Существующие гаплотипы A характеризуются большой долей iKIR, тогда как в гаплотипах B присутствует значительное количество aKIR. Гены KIR и HLA в геноме человека входят в состав разных хромосом, что порождает огромное количество сочетаний KIR и KIR-L на основе геномов плодов [19]. Проверка совместимости наборов KIR и KIR-L у плода возможна после того, как происходит не только появление ростка NK-клеток с 6-й по 15-ю неделю [20], но и приобретение ими функциональных свойств с 15-й по 22-ю неделю гестации [21]. Поэтому для ПВ бóльшую роль играет взаимодействие в плаценте NK-клеток матери (децидуальных, dNK) с двумя группами клеток-мишеней, несущих разные наборы KIR-L – материнские (децидуальные стромальные клетки, эндотелиоциты и другие) и плодные (трофобласты).

Учитывая вышесказанное, особенности KIR и KIR-L у матери, плода и отца могут обуславливать как различные исходы беременности, так и различный ответ иммунной системы матери на проведение ИЦТ чере...

Кречетова Л.В., Хорошкеева О.В., Тетруашвили Н.К., Кречетов С.П., Янкевич Т.Э., Инвияева Е.В., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т.