Особенности микробиоты цервикального канала при дородовом излитии околоплодных вод и доношенной беременности

Цель исследования. Изучить состав микрофлоры при доношенной беременности и преждевременном разрыве плодных оболочек (ПРПО) в сравнении со своевременным отхождением околоплодных вод.
Материалы и методы. На базе ГБУЗ ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова у 143 беременных в сроке 37–41 неделя, из которых 85 – с ПРПО и 58 – группы контроля со своевременным излитием околоплодных вод в родах, проводились анализ микроскопического исследования мазков из влагалища, бактериологических посевов из цервикального канала на флору и чувствительность к антибиотикам, а также полимеразная цепная реакция (ПЦР) мазка из цервикального канала в режиме реального времени.
Результаты. При ПРПО в соскобе из цервикального канала в 5 случаях (22,7%) выявлено выраженное преобладание анаэробной микрофлоры, у одной пациентки (4,5%) – преобладание Lactobacillus spp. и аэробов и только в 7 случаях (31,8%) – абсолютное преобладание Lactobacillus spp. (р=0,002). В группе с ПРПО отмечено значительное снижение Lactobacillus spp. и более частое выявление Raoultella spp. – 14% против 1,3% в основной группе.
Заключение. Для цервикального канала при ПРПО характерно преобладание анаэробной микрофлоры, диагностированное с помощью ПЦР-диагностики в режиме реального времени.

Проблема преждевременного разрыва плодных оболочек (ПРПО) при доношенной беременности не теряет своей актуальности, несмотря на большое количество исследований в этой области и изобретение различных средств для подготовки шейки матки и индукции родов.

Преждевременное излитие околоплодных вод как минимум за час до начала родов встречается, по данным различных авторов, от 2,7 до 17% случаев [1, 2]. ПРПО при доношенной беременности ассоциирован с высоким процентом аномалий родовой деятельности, дистресса плода, родового травматизма, септических осложнений как для матери, так и для новорожденного. Развитие вышеперечисленных осложнений при ПРПО, а также отказ пациенток от подготовки шейки матки либо ее неэффективность, увеличение продолжительности родов и неготовность рожениц к такой продолжительности родов приводят к увеличению процента кесаревых сечений у данного контингента пациенток. Причем, как правило, это первородящие пациентки. Соответственно, решение проблемы ведения рожениц в ПРПО при доношенной беременности позволит сократить процент кесаревых сечений, а также снизить материнскую и перинатальную заболеваемость.

Связь инфекционного фактора ПРПО при недоношенной беременности доказана большим количеством работ [3–6]. Современные исследования демонстрируют как одну из ведущих причин преждевременного излития околоплодных вод воспалительные изменения плодных оболочек за счет восходящей инфекции [7]. Лейкоцитарная инфильтрация при разрыве плодных оболочек над внутренним зевом выявляется в 1/3 случаев дородового излития околоплодных вод [8]. Анализ микрофлоры влагалища и цервикального канала у пациенток с дородовым излитием позволит объяснить роль микробного фактора в реализации ПРПО при доношенной беременности.

Целью данного исследования было изучение микробиоты влагалища и цервикального канала у пациентов с ПРПО в сроке беременности более 37 недель и сравнение с микробиотой у пациенток со своевременным излитием околоплодных вод в родах.

Материалы и методы

На базе родильных отделений ГБУЗ ГКБ №1 им. Н.И. Пирогова г. Самары нами были включены в исследование и проспективное наблюдение 143 пациентки со сроком беременности 37–42 недели. Из них основную группу с ПРПО составили 85 пациенток, 58 пациенток вошли в группу контроля со своевременным излитием околоплодных вод (воды у них отошли в родах после начала родовой деятельности). Мазки и посевы брали у пациенток с момента диагностики излития околоплодных вод в основной группе либо с началом активной фазы первого периода родов при наличии интактного плодного пузыря. В анализ были включены результаты бактериологического анализа влагалищного и цервикального содержимого путем культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов на специальных питательных средах, микроскопическое исследование мазков из влагалища и цервикального канала, окрашенных по Граму, а также исследование содержимого цервикального канала методом ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени (Фемофлор 16) и применением детектирующего амплификатора ДТ-96 производства ООО «НПО ДНК-Технология» (РУ ФСР 2009/04663, патент №2362808 от 13.02.08). Исходно методика Фемофлор 16 была разработана для оценки состояния влагалища, а нами была использована с целью оценки и сопоставления бактериологических посевов и метода ПЦР с детекцией результатов в режиме реального времени микробного пейзажа цервикального канала. Данная технология предусматривает анализ биоты различных биотопов, в том числе и цервикального канала [9, 10], включающий определение микроорганизмов: Lactobacillus spp., Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp./Clostridium spp., Mobiluncus spp./Corynebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae, Mycoplasma hominis, Ureaplasma (urealyticum + parvum), Candida spp.

На базе кафедры акушерства и гинекологии ИПО СамГМУ совместно с частной медицинской компанией ООО «Независимая лаборатория ИНВИТРО» ранее был выполнен большой объем иммунологических и микробиологических исследований, особое внимание уделялось изучению биоценоза влагалища при различных акушерских и гинекологических патологиях [11, 12], а также в различные возрастные периоды с применением скрининга микрофлоры «Фемофлор 8», «Фемофлор 16», «Фемофлор 17» [13, 14]. Данная методика себя хорошо зарекомендовала в плане высокой чувствительности и специфичности выявления определенных групп микроорганизмов.

Для получения адекватных результатов использовали только образцы с достаточным количеством клеток цервикального канала, попавших в пробирку с анализируемой пробой и достаточной общей бактериальной массой. Учитывались пробы, в которых количество ДНК клеток человека было больше 104 геном-эквивалентов (ГЭ) в образце, это показатель качества взятия мазка (КВМ). Величина общей бактериальной масс...

Каганова М.А., Спиридонова Н.В., Казакова А.В., Девятова О.О., Галкина Д.А., Головина О.Н.