Особенности плацентарного апоптоза и клеточной пролиферации при преэклампсии

Цель исследования. Оценка активности процессов плацентарного апоптоза и клеточной пролиферации при преэклампсии.
Материал и методы. В исследовании «случай-контроль» участвовали 11 женщин без преэклампсии, 14 – с умеренной и 14 – с тяжелой преэклампсией. Проанализированы особенности течения беременности и родов, плацентарной экспрессии маркеров клеточной пролиферации (ki-67), антиапоптоза (bcl-2) и проапоптоза (Р53).
Результаты исследования. При преэклампсии, особенно тяжелой, в эндотелии капилляров и макрофагах стромы отмечена активация процессов клеточной пролиферации и антиапоптоза, в симпластотрофобласте – клеточной пролиферации и проапоптоза, степень активности антиапоптоза резко снижена. Корреляционные связи иммуногистохимических показателей клеточной пролиферации, про- и антиапоптоза плаценты с акушерскими осложнениями (суб- и декомпенсированная плацентарная недостаточность, тяжелая преэклампсия, гипотрофия и асфиксия новорожденного) свидетельствуют об однотипных механизмах их развития.
Заключение. Процессы плацентарного апоптоза и клеточной пролиферации играют определенную роль в патогенезе формирования преэклампсии, однако значение программ клеточного обновления в развитии этого синдрома требует дальнейшего изучения.

Преэклампсия (ПЭ) остается серьезной медико-социальной проблемой во всем мире, являясь одной из основных причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [1, 2].

В развитии ПЭ ведущую роль играют нарушение инвазии трофобласта, недостаточность маточно-плацентарного кровотока и ишемия плаценты [1–3]. Согласно современным представлениям о формировании и функционировании плаценты апоптоз и клеточная пролиферация имеют большое значение в поддержании морфофункционального состояния плаценты в норме и при ее патологии [4–9]. В настоящее время указанные феномены активно исследуются с целью выявления патоморфологических предпосылок к развитию ПЭ. Предполагается, что при ПЭ изменяется баланс между программами пролиферации и апоптоза в эндотелиальных клетках, цито- и синцитиотрофобласте, что приводит в итоге к развитию плацентарной ишемии и формированию ПЭ.

Процессы клеточного обновления в плаценте при ПЭ изучены недостаточно, сведения часто противоречивы. Часть авторов указывает на повышенную экспрессию маркеров клеточной пролиферации [10, 11] и антиапоптоза в плаценте при ПЭ на фоне снижения проапоптических показателей [12–14]. Другие исследователи зарегистрировали активацию программ апоптоза в трофобласте в сочетании с неизмененной или сниженной экспрессией показателей антиапоптоза [15–18] и клеточной пролиферации [17].

Целью настоящего исследования является оценка активности процессов плацентарного апоптоза и клеточной пролиферации при ПЭ.

Материал и методы исследования

Проведено исследование «случай-контроль» 39 беременных женщин, которые получали стационарное лечение в родильном доме клиники ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. Критерием включения явилось информированное согласие женщины на участие в исследовании. Критерии исключения: онкологические заболевания, ВИЧ-инфекция, туберкулез, тяжелая соматическая патология, психические заболевания, алкоголизм, наркомания. План исследования соответствует законодательству России, международным этическим нормам, нормативным документам исследовательских организаций, одобрен этическим комитетом ГБОУ ВПО ЮУГМУ. Изучены особенности течения беременности и исходы родов, проведено морфологическое исследование плацент.

В зависимости от наличия/отсутствия ПЭ и степени ее тяжести [1] выделены: 1-я группа (конт­рольная) – 11 женщин, течение беременности которых не осложнилось развитием ПЭ; 2-я группа – 14 беременных с умеренной ПЭ; 3-я группа – 14 пациенток с тяжелой ПЭ. Средний возраст женщин 1-й группы составил 27,00±1,67 года, 2-й – 27,63±1,05, 3-й – 30,36±1,64.

Ультразвуковое исследование и оценка допплерометрических параметров кровотока фетоплацентарного комплекса проводились на диагностических ультразвуковых системах М5 (Mindrai, КНР), Sonoace Pico и Sonoace 8800 (Medison, Южная Корея).

В зависимости от степени гемодинамических нарушений в системе мать–плацента–плод (НМПК) и синдрома задержки развития плода (СЗРП) выделены компенсированная (НМПК 1-й степени и/или СЗРП 1-й степени), субкомпенсированная (НМПК 2-й степени и/или СЗРП 2-й степени), декомпенсированная (НМПК 3-й степени и/или СЗРП 3-й степени) формы хронической плацентарной недостаточности (ХПН).

Оценка физического развития новорожденных проводилась с помощью оценочных таблиц Г.М. Дементьевой

Морфологические методы исследования. Исследовано 11 плацент женщин 1-й группы, 15 – 2-й группы (в том числе 2 плаценты из бихориальной биамниотической двойни), 17 – 3-й группы (в том числе 2 плаценты из бихориальной биамниотической двойни, 3 плаценты из трихориальной триамниотической тройни). Проводили гистологическое, иммуногистохимическое и морфометрическое исследование плацент.

Гистологическое исследование проводили на парафиновых срезах, окрашенных гематоксилином и эозином. Количественное исследование гистологических структур (незрелые ворсины, некротизированные ворсины, капилляры стромы терминальных ворсин, синцитиальные почки ворсин) проводили с помощью окулярной измерительной сетки и метода точкосчетной объемометрии [19] в 10 случайно отобранных полях зрения при увеличении 400.

Иммуногистохимическое исследование использовали для оценки в структурах ткани плаценты (симпластотрофобласт, эндотелий капилляров, макрофаги стромы ворсин) активности процессов клеточной пролиферации (ki-67), антиапоптоза (bcl-2) и проапоптоза (р53). В качестве первичных специфических антител использовали моноклональные антитела к p53 («Dako Denmark A/S», RTU-p53, Clon DO-7, Denmark), bcl-2 («Dako Denmark A/S», RTU-bcl-2, Clon 124, Denmark), ki-67 («Dako Denmark A/S», RTU-Ki-67, Clon MIB-1, Denmark). В качестве вторичных антител и визуализирующей системы применяли набор детекции («Dako Denmark A/S», EnVision+ System, HRP, Denmark). Количественное исследование для маркеров ki-67, bcl-2, Р53 проводили в 10 случайно выбранных полях зрения при увеличении 400, подсчитывая количество клеток, дающих интенсивное связывание пероксидазы в 1 мм2. С целью выяснения направленности изменений процессов клеточного обно...

Долгушина В.Ф., Сюндюкова Е.Г.