Особенности профиля стероидных гормонов крови пациентов репродуктивного возраста с распространенным эндометриозом

Актуальность. Для изучения патологического изменения эндогенного стероидогенеза, ассоциированного с распространенным наружным генитальным эндометриозом (РНГЭ), необходимо применение высокоточных чувствительных методов. Цель. Проанализировать наличие изменений стероидома крови при РНГЭ. Материалы и методы. Для одномоментного количественного определения гормонов сыворотки крови пациентов с РНГЭ и группы контроля был использован метод высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС). Результаты. При РНГЭ обнаружено значимое изменение концентраций 9 стероидов. Получены следующие концентрации гормонов крови при РНГЭ и в группе контроля соответственно: эстрадиол – 0,18 против 0,12 нг/мл (р=0,05), 17-ОН-прогестерон – 0,55 против 0,44 нг/мл (р=0,05), тестостерон – 0,81 против 0,43 нг/мл (р<0,01), дигидротестостерон – 0,16 против 0,37 нг/мл (р<0,1), дегидро­эпиандростерон – 3,56 против 5,98 нг/мл (р<0,01), ДГЭА-сульфат – 2533,00 против 4425,00 нг/мл (р<0,01), андростендион – 1,35 против 1,31 нг/мл (р=0,29), кортизол – 164,00 против 90,50 нг/мл (р<0,01), кортикостерон – 4,87 против 1,20 нг/мл (р<0,01), 11-дезоксикортикостерон –0,87 против 0,37 нг/мл (р<0,01); концентрации прогестерона ниже границы измерения в обеих группах. Четыре модели логистической регрессии позволяют дифференцировать стероидом крови пациентов с РНГЭ от группы контроля. Заключение. Наличие эндометриоидных кист при РНГЭ III–IV стадии не оказывает значимого влияния на изменение стероидома. ВЭЖХ-МС-различия стероидома крови позволяют дифференцировать пациентов с РНГЭ от группы контроля.

Эндометриоз – это системное иммуно- и гормонозависимое мультифакториальное заболевание [1]. Эндометриоз поражает каждую десятую женщину в возрасте от 12 до 52 лет, что составляет ориентировочно 176 млн человек по всему миру. Существенное количество пациентов (до 7%) может быть не учтено в связи с малосимптомным течением процесса в течение десятилетий [2]. Особенная значимость данного заболевания заключается в существенном влиянии на фертильность у пациентов репродуктивного возраста, а также на качество жизни в связи с доминирующей симптоматикой в виде выраженных тазовых болей с присоединением нейропатического компонента, снижающих работоспособность и социальную активность женщин, что представляет значимую нагрузку на систему здравоохранения и экономику [1, 3].

Эндометриоз является самым распространенным интраоперационно установленным диагнозом у пациентов, подвергшихся хирургическому вмешательству для установления причин хронической тазовой боли и лечения бесплодия [4]. Заболевание является гетерогенным и подразделяется на несколько фенотипов: эндометриоидная киста яичника, поверхностный перитонеальный и глубокий инфильтративный эндометриоз [1, 5].

Изменение стероидогенеза является одним из ключевых звеньев патобиологического каскада при развитии эндометриоза. Оценка гормонального профиля пациентов с эндометриозом рутинно выполняется с диагностической целью, а также для подбора послеоперационной гормономодулирующей терапии. В зависимости от особенностей строения гормонов их способность к ионизации значительно отличается, но вследствие наличия нейтрального заряда интенсивность сигнала обычно слабо выражена. Стероиды, имеющие конъюгированную двойную связь с карбонильной группой (дельта-4-стероиды, например, тестостерон), обычно легче ионизируются, благодаря чему их возможно измерить даже в минимальных концентрациях. Противоположная тенденция присуща эстрадиолу: содержание фенольной группы и предельно низкие концентрации данного гормона в образцах приводят к истинным сложностям при измерении уровня данного стероида [6].

Кроме того, в системном кровотоке и тканях стероидные гормоны представлены в низких концентрациях, в связи с чем требуются высокочувствительные методы для их идентификации. Измерение концентраций осуществляется посредством метода масс-спектрометрии, совмещенной с хроматографией, или иммунологическими методами. Для иммунологических методов характерна высокая пропускная способность, однако специфичность метода ограничена в связи с выраженным структурным сходством различных стероидов, а также «перекрытием» прочими эндогенными и экзогенными компонентами. Хроматографические методы более специфичны в анализе стероидома [7–11].

Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС), особенно в модификации, изложенной в исследовании M.R. Häkkinen et al., характеризуется высокой чувствительностью для количественного определения уровней низкомолекулярных метаболитов, в том числе стероидных гормонов [7].

В данном исследовании методом ВЭЖХ-МС проведен анализ изменений стероидных гормонов сыворотки крови при распространенном наружном генитальном эндометриозе (РНГЭ) III–IV стадии с целью изучить диагностическую ценность одномоментного анализа, а также влияние эндометриоидных кист на изменение стероидома.

Материалы и методы

Дизайн исследования

С марта 2018 по апрель 2020 гг. на базе ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России проведено обсервационное исследование «случай-контроль», включившее 65 женщин репродуктивного возраста. Пациентки были распределены на 3 группы. В 1-ю группу вошли 16 пациенток с глубоким инфильтративным эндометриозом III–IV стадии по классификации R-AFS [6] и эндометриоидной кистой яичника (возраст исследуемых 23–37 лет; средний диаметр кисты 4,4±1,1 см), во 2-ю группу – 23 пациентки с глубоким инфильтративным эндометриозом (возраст исследуемых 27–39 лет). Пациенткам было выполнено оперативное вмешательство лапароскопическим доступом. Диагноз РНГЭ был подтвержден хирургически и верифицирован при гистологическом исследовании удаленной ткани.

Третью группу (группа контроля) составили 26 здоровых добровольцев (женщины 23–34 лет с благополучно реализованной репродуктивной функцией), у которых на основании клинико-лабораторных (сбор анамнеза, осмотр, клинический и биохимический анализы крови) и инструментальных (ультразвуковое исследование экспертного уровня) методов диагностики были исключены объемные образования яичников, отсутствовали жалобы; концентрации стероидных гормонов крови, исследованные иммунологическими методами диагностики, находились в пределах референсных значений. Уровни гормонов данной группы, установленные посредством ВЭЖХ-МС, соответствовали показателям в диапазоне нормальных значений, рекомендованных для оборудования лаборатории.

Гормональное исследование крови у всех пациенток проводилось в I (пролиферативную) фазу менструального цикла. На момент забора крови пациенты ...

Павлович С.В., Юрова М.В., Чаговец В.В., Франкевич В.Е., Стародубцева Н.Л., Чупрынин В.Д., Сухих Г.Т.