Особенности пролиферативной и антипролиферативной активности клеток эндометрия при его гиперплазии в сочетании с хроническим эндометритом

Цель. Определение особенностей пролиферативной и антипролиферативной активности клеток эндометрия при его гиперплазии в сочетании с хроническим эндометритом (ХЭ) путем анализа уровня экспрессии протеинов Ki-67 и p16INK4a в слизистой оболочке матки.
Материалы и методы. Обследованы 90 пациенток, которые были распределены по группам: 1-ю составили 29 женщин, у которых при гистологическом изучении биоптатов эндометрия выявлена гиперплазия эндометрия (ГЭ) без атипии в сочетании с ХЭ; 2-ю – 21 пациентка с ГЭ без атипии (I группа сравнения); 3-ю – 20 женщин с ХЭ (II группа сравнения); 4-ю (группа контроля) – 20 гинекологически здоровых женщин. Проводили комплексное морфологическое и иммуногистохимическое исследование образцов эндометрия, согласно общепринятым критериям.
Результаты. Оценка пролиферативной активности клеток эндометрия пациенток с ГЭ в сочетании с ХЭ свидетельствует о высоком пролиферативном потенциале клеток эпителия желез и стромы эндометрия. Повышенная экспрессия p16INK4a в 1-й группе пациенток свидетельствует о возможном участии вирусов в развитии гиперпластического процесса. Сопоставление уровней экспрессии Ki-67 и p16INK4a в слизистой оболочке матки у женщин 1-й и 2-й групп показало, что уровень экспрессии p16INK4a прямо пропорционален уровню экспрессии Ki-67.
Обсуждение. Клетки эндометрия при ГЭ в сочетании с ХЭ характеризуются как повышенной пролиферативной, так и антипролиферативной активностью. Наблюдаемая коэкспрессия Ki-67 и p16INK4a при ГЭ в сочетании с ХЭ может быть сигналом повреждения клеточного цикла и требует поиска факторов, определяющих одновременную экспрессию этих маркеров при данной патологии. Указание на наличие максимальных уровней экспрессии Ki-67 и p16INK4a в образцах эндометрия у пациенток с рецидивированием гиперпластического процесса может стать основой для разработки программы оценки риска рецидива ГЭ.

В последние годы число больных карциномой эндометрия неуклонно растет [1]. Большинство специалистов рассматривают карциному эндометрия в тесной взаимосвязи с гиперплазией эндометрия (ГЭ), которая относится к предопухолевым процессам [2]. Сегодня обсуждается ряд факторов, которые обусловливают развитие ГЭ: несбалансированная длительная стимуляция эстрогенами, нарушенная рецептивность эндометрия, неадекватная реакция клеток эндометрия на внешние воздействия, которая определяется экспрессией маркеров пролиферации, апоптоза, факторов роста и др. [3]. Реализация вышеперечисленных факторов наиболее вероятна в условиях хронического эндометрита (ХЭ), который создает предпосылки для формирования пролиферативных процессов и дальнейшей атипической трансформации клеток эндометрия [4, 5]. Вместе с тем в настоящее время частота выявления бактериальных возбудителей воспаления при ХЭ снижается, а вирусных агентов, в том числе вируса папилломы человека (ВПЧ), – увеличивается [5]. При ГЭ также часто обнаруживают ВПЧ [6], причем у каждой третьей пациентки при наличии ВПЧ в эндометрии выявляют ГЭ с атипией и высокодифференцированную аденокарциному эндометрия [7].

Известно, что повышение уровня экспрессии маркера пролиферации Ki-67 и маркера антипролиферативной активности ингибитора циклин-Д-зависимых киназ p16INK4a в клетках является предиктором онкологических заболеваний [8, 9]. В нормальных эпителиальных клетках, в частности экзоцервикса, белок p16INK4a экспрессируется в незначительном количестве, но при заболеваниях шейки матки, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией, наблюдается повышенная его экспрессия [10, 11]. Однако исследования, посвященные анализу экспрессии вышеперечисленных маркеров в слизистой оболочке матки при ГЭ в сочетании с ХЭ, малочисленны и противоречивы [12–14].

Цель исследования – определение особенностей пролиферативной и антипролиферативной активности клеток эндометрия при его гиперплазии в сочетании с ХЭ путем анализа уровня экспрессии протеинов Ki-67 и p16INK4a в слизистой оболочке матки.

Материалы и методы

Исследование проводили на кафедрах акушерства и гинекологии, патологической анатомии и судебной медицины ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Челябинск. Обследованы 90 пациенток. 1-ю группу составили 29 женщин, у которых при гистологическом изучении биоптатов эндометрия выявлена ГЭ без атипии в сочетании с ХЭ; 2-ю – 21 пациентка с ГЭ без атипии (группа сравнения 1); 3-ю группу – 20 женщин с ХЭ (группа сравнения 2); 4-ю группу (группу контроля) – 20 гинекологически здоровых женщин, обратившихся по вопросам планирования беременности, гистологическое исследование биоптатов эндометрия которых выявило нормальную слизистую оболочку матки.

Критерии включения: репродуктивный возраст, нормальный овуляторный менструальный цикл (для 1-й, 3-й, 4-й групп), информированное согласие на участие в исследовании.

Критерии исключения: овуляторная дисфункция (для 1-й, 3-й, 4-й групп), аденомиоз, миома матки, требующая хирургического лечения, атипическая ГЭ.

Дизайн исследования – одномоментное нерандомизированное ретроспективное с использованием гистологических, иммуногистохимических, статистических методов.

Эндометрий получали на 18–22-й дни менструального цикла путем мануальной вакуумной аспирации под контролем гистероскопии (в 1-й и 2-й группах) или с использованием пайпель-биопсии (в 3-й и 4-й группах).

Проводили комплексное морфологическое исследование образцов эндометрия, интерпретируя морфологические картины по общепринятым критериям [15, 16]. Гистологические препараты готовили по стандартным методикам.

Депарафинизированные срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизону. Для выявления плазматических клеток использовали мышиные моноклональные антитела (МКАТ) CD 138/syndecan-1 (clon B-A38, r.t.u., Cell Marque Sigma – Aldrickcompany, USA).

...

Казачков Е.Л., Затворницкая А.В., Воропаева Е.Е., Казачкова Э.А., Щеголев А.И.