Папиллярная гиперплазия маточной трубы: сочетание с серозными пограничными опухолями яичника и молекулярно-биологическая характеристика

Цель исследования. Изучить изменения эндосальпинкса при серозных пограничных опухолях яичника (СПОЯ) и серозных карциномах яичника высокой степени злокачественности (СКЯВСЗ) и определить молекулярно-биологические особенности папиллярной гиперплазии маточной трубы (ПГМТ).
Материал и методы. В исследование включен материал от 81 пациентки: 34 пациентки с СПОЯ, 33 пациентки с СКЯВСЗ и 14 пациенток с экстраовариальной патологией. Применялся гистологический и иммуногистохимический методы исследования с маркерами p53 и Ki-67. Статистический анализ проводился с использованием критерия Манна-Уитни
Результаты. ПГМТ выявлена в 73% маточных труб при СПОЯ, в 21% при СКЯВСЗ, в 5% при экстраовариальной патологии. Серозные трубные интраэпителиальные карциномы (СТИК) выявлены только при СКЯВСЗ (в 30,2% маточных труб). При ПГМТ слабое окрашивание ядер клеток эпителия маточной трубы р53 было выявлено в 70% в участках локализации ПГМТ, в 90% случаев экспрессия Ki-67 была низкой, в 10% отмечалась высокая экспрессия Ki-67. При СТИК во всех случаях в участках высокой экспрессии р53 отмечалась высокая экспрессия Ki-67. При экстраовариальной патологии слабое окрашивание ядер клеток эпителия маточной трубы р53 выявлено в 40%, экспрессия Ki-67 в 100% низкая.
Заключение. Развитие ПГМТ статистически значимо связано с СПОЯ; выявлено характерное для ПГМТ накопление дикого типа р53 и низкий пролиферативный индекс, в отличие от СТИК, для которой свойственно накопление мутантного р53 и высокая экспрессия Ki-67. Таким образом, можно выделить два различных пути патогенеза серозных карцином яичника – формирование СТИК приводит к развитию СКЯВСЗ, формирование ПГМТ – к развитию СПОЯ и далее – серозной карциномы яичника низкой степени злокачественности.

В последнее десятилетие произошли значительные изменения в представлении о патогенезе серозных опухолей яичника. Прежде всего это коснулось серозных карцином яичника высокой степени злокачественности (СКЯВСЗ), в качестве основного предшественника которых в настоящее время рассматривается серозная интраэпителиальная карцинома маточной трубы (СТИК) [1]. В то же время появилось предположение, высказанное R. Kurman и соавт. о том, что папиллярная гиперплазия маточной трубы (ПГМТ) может быть патогенетически связана с серозными пограничными опухолями яичника (СПОЯ). По мнению данных авторов, три механизма могут объяснить связь между ПГМТ и СПОЯ: во-первых, поражения маточной трубы и яичников могут возникать самостоятельно в результате существования так называемого «опухолевого поля» по W. Willis. Во-вторых, поражение яичников при СПОЯ может быть первичным и скопления «отшнурованных» мелких папиллярных структур в просвете маточных труб, таким образом, носят вторичный характер. В-третьих, поражение маточной трубы может быть первичным, а яичников – вторичным в результате отделения патологического участка эндосальпинкса фимбриального отдела маточной трубы и прикрепления его на поверхность яичника [2]. Однако не во всех работах, посвященных гиперплазии эпителия маточной трубы, выявлена четкая взаимосвязь между патологией эпителия маточных труб и развитием СПОЯ [3]. Поэтому вопрос о значении ПГМТ в патогенезе СПОЯ остается открытым. Кроме того, в настоящее время не изучена экспрессия супрессора опухолевого роста р53 при ПГМТ, в то время как появление мутаций гена ТР 53 и изменение синтеза его белкового продукта являются наиболее важными в патогенезе серозных карцином яичника.

В связи с этим целью нашей работы стал анализ изменений эндосальпинкса маточных труб при СПОЯ и СКЯВСЗ и определение молекулярно-биологических особенностей ПГМТ.

Материал и методы исследования

В исследование включили материал от 81 пациентки (105 маточных труб и 33 яичника): 34 пациентки (52 маточные трубы) с гистологически верифицированными СПОЯ, средний возраст 42,7±5,6; 33 пациентки (33 маточных трубы) с СКЯВСЗ (средний возраст 47,6±3,4 года) и 14 пациенток (20 маточных труб) с экстраовариальной патологией (миомой матки и аденомиозом) (средний возраст 49,71±3,53 года). Исследование маточных труб пациенток, включенных в исследование, проводилось в соответствии с протоколом для исследования маточных труб при СПОЯ и серозных раках яичника (SEE-FIM протокол) [4]. Данный протокол регламентирует исследование всей маточной трубы, причем фимбриального отдела – наиболее тщательно. Таким образом, увеличилось число исследуемых фрагментов маточной трубы и доступность фимбриального отдела. Для верификации ПГМТ использовали критерии, предложенные R. Kurman: наличие мелких округлых кластеров из эпителиальных клеток эндосальпинкса и мелких папиллярных структур в просвете маточной трубы (не менее 3 в срезе), которые могут быть ассоциированы с псаммомными тельцами. В работе использовали гистологический и иммуногистохимический (ИГХ) методы исследования. После фиксации в 10% растворе нейтрального формалина в течение 24 часов и стандартного протокола проводки, материал заливали в парафин. Далее проводили окрашивание гематоксилином и эозином. Для ИГХ исследования готовили срезы толщиной 4 мкм, которые наносили на высоко адгезивные стекла и сушили при температуре 37°С в течение 18 часов. После снятия парафина со срезов, их регидратировали в батарее спиртов 95, 80 70, инкубируя в каждом растворе по 2 минуты. Восстановление антигенной активности проводили в PT Link («Dako») при температуре 97°С в течение 20 мин. в 10 мМ цитратном буфере рН 6,0. Остывшие стекла помещали во влажные камеры (для предотвращения высыхания срезов) и инкубировали 15 минут в 3% растворе перекиси водорода для блокирования эндогенной пероксидазы. Реакцию с первичными антителами проводили в течение 30 минут при комнатной температуре. В исследовании использовались моноклональные антитела к p53 (clone D07, Dako Denmark) и к Ki-67 (clone MIB-1, Dako, Denmark). Для визуализации мест связывания антител с антигенами использовали реакцию окисления субстрата 3,3-диаминобензидина (ДАБ) пероксидазой хрена в присутствии перекиси водорода с образованием водонерастворимого конечного продукта коричневого цвета системы «EnVision» («Dako Cytomation»). Для правильной постановки ИГХ реакций ставили положительные и отрицательные контроли. В качестве отрицательных контролей брали образцы исследуемых срезов, которые подвергались стандартной процедуре ИГХ реакции, но без добавления первичных антител. Положительные кон...

Асатурова А.В., Коган Е.А., Ежова Л.С., Жарков Н.В., Файзуллина Н.М., Хабас Г.Н.