Персистенция ВПЧ высокого онкогенного риска и другие молекулярно-генетические предикторы развития цервикальных интраэпителиальных неоплазий

Цель исследования. Проанализировать значимость персистенции вируса папилломы человека высокого онкогенного риска (ВПЧ ВР), вирусной нагрузки и экспрессии мРНК генов MKI67, CDKN2A, PGR и BCL2 в прогнозе развития плоскоклеточного интраэпителиального поражения (SIL).
Материал и методы. В исследование включено 85 женщин (средний возраст 34±11 лет) с цитологическим заключением NILM и наличием ВПЧ ВР. Проведено комплексное клинико-лабораторное обследование: типирование на ВПЧ с оценкой вирусной нагрузки, оценка экспрессии мРНК генов человека методом ПЦР в режиме реального времени, жидкостная цитология, расширенная кольпоскопия 1 раз в 12 мес. в течение 2-х лет наблюдения, биопсия шейки матки (по показаниям).
Результаты. Сформированы 2 группы: Iа – с транзиторной ПВИ со стойким отрицательным ответом – 52(61%), Iб – с транзиторным течением инфекции с нестойким отрицательным ответом – 12(14%); II группа 21(25%) с персистенцией ВПЧ ВР. Ухудшение кольпоскопической картины выявлено в группе с персистенцией ВПЧ ВР у 12(57%). Наблюдалась персистенция ВПЧ 16, 31, 39, 52, 18, 68 типов. Гистологически SIL верифицированы в течение 2-х лет только во II группе: LSIL – 10(47%), HSIL – 1(5%); из них у 6(55%) – наблюдалось изменение уровня экспрессии мРНК генов MKI67, CDKN2A, PGR и BCL2.
Заключение. Персистенция ВПЧ ВР у женщин с изменениями уровня экспрессии мРНК генов MKI67, CDKN2A, PGR и BCL2 и кольпоскопической картины рассматриваются как маркеры прогрессии SIL.

Вирус папилломы человека (ВПЧ) является наиболее распространенной инфекцией, передающейся половым путем. Инфицирование ВПЧ характерно, преимущественно, молодым женщинам и наибольшая распространенность ВПЧ наблюдается в возрасте до 25 лет. Длительная персистенция одного и того же типа ВПЧ высокого онкогенного риска (ВПЧ ВР) является этиологическим фактором развития цервикальных эпителиальных неоплазий (CIN). Американское общество по кольпоскопии и цервикальной патологии (ASCCP) предложило использовать термин «малые» формы поражения эпителия шейки матки для обозначения пациенток с наличием ВПЧ 16 или 18 типов и персистенцией ВПЧ ВР при наличии нормальных результатов цитологического заключения [1].

В настоящее время известно о 201 типах ВПЧ, 25 из которых обладают онкогенным потенциалом [2]. ВПЧ вызывают широкий спектр заболеваний от доброкачественных до инвазивных опухолей. Международное агентство по изучению рака (IARC) выделило 12 ВПЧ ВР (ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59) (группа 1), ассоциированных с раком шейки матки (РШМ). Эти 12 типов ВПЧ относятся к одной эволюционной ветви, которая включает Alphapapillomavirus групп: А5, А6, А7, А9. Тринадцать дополнительных типов ВПЧ были классифицированы как вирусы возможно канцерогенного риска – группа 2B (ВПЧ 26, 69, 82, 30, 53, 66, 70, 85, 97, 67) на основе их филогенетического родства с группой 1, а также ВПЧ 34, 73 (А11), за исключением ВПЧ 68 типа, который был внесен в группу вероятно канцерогенного риска – 2А. Вирусы группы 1 и 2А обуславливают 96 % РШМ, группы 2B – 2,6% РШМ [3].

Этиологическим фактором возникновения РШМ является инфицирование ВПЧ ВР базальных клеток эпителия шейки матки. Различают две стадии течения папилломавирусной инфекции: 1) транзиторная (стадия репродуктивной или эписомальной инфекции), когда вирус находится в «свободном состоянии»; 2) интегративная стадия, при которой геном ДНК вируса встраивается в геном инфицированных клеток. Элиминация вируса происходит в 70% случаев в течение первого года инфицирования и в 91% случаев – в течение 24 мес. [4]. По данным исследований, транзиторное течение инфекции подразделяют на: вариант со стойким отрицательным ответом – это отрицательный ВПЧ-тест с промежутком в 12 мес.; вариант с нестойким отрицательным ответом – обнаружение ВПЧ через 12 мес. и его элиминация через 24 мес. [5]. По данным ряда исследований, после инфицирования ВПЧ не определяется через 6 мес. у 50% женщин и у 75% – к концу первого года заражения.

Онкогенный потенциал ВПЧ реализуется при высокой вирусной нагрузке, а также интеграции ВПЧ в геном клетки хозяина и вызван гиперэкспрессией онкобелков Е6/Е7, которые изменяют клеточный цикл. Взаимодействие Е6/Е7 с опухоль-супрессорным белком p53 и белком ретинобластомы (pRb) приводит к снижению клеточного апоптоза, активации па­то­­логической пролиферации, неоангиогенеза и опухолевой трансформации. Показано, что при всех типах ВПЧ групп 1, 2А и 2В маркеры ВПЧ-ассо­циированного канцерогенеза, такие как мРНК E6/Е7, CDKN2А/p16 (повышение экспрессии), ССND1, p53 и Rb (понижение экспрессии) претерпевают аналогичные изменения [6]. Нахождение в организме женщины одного и того же типа ВПЧ в течение 2-х лет и более называется персистенцией. В период инфекционного процесса происходит накопление соматических мутаций и формирование CIN. Средняя продолжительность инфекционного периода у пациенток с CIN I составила 586 дней, у пациенток с койлоцитоатипией (по данным цитологического мазка) – 392,3 дня [7]. По данным Национального института по изучению рака (NCI), в течение 24 месяцев у 10% женщин с CIN I происходит прогрессирование заболевания до CIN III.

Цель исследования: В ходе динамического наблюдения в течение 2-х лет у женщин с папилломавирусной инфекцией проанализировать значимость персистенции ВПЧ ВР, вирусной нагрузки и экспрессии мРНК генов MKI67, CDKN2A, PGR и BCL2 в прогнозе развития плоскоклеточного интраэпителиального поражения (SIL)

Материал и методы исследования

Сычева Е.Г., Назарова Н.М., Бурменская О.В., Прилепская В.Н., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т.