Эпидемиология и Инфекционные болезни. Актуальные вопросы №4 / 2019
Первые данные о распространенности в России хромосомно-интегрированного Human betaherpesvirus 6А/B, передаваемого по наследству
1) ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия;
2) ФГБУН «Научно-исследовательский институт медицины труда имени академика Н.Ф. Измерова», Москва, Россия
Цель исследования. Изучение распространенности в России наследуемого хромосомно-интегрированного вируса герпеса человека 6А/В (хиВГЧ-6А/В)
Методы. Обследовано 262 условно здоровых человека, проживающих в Москве и Московской области, а также 3 члена одной семьи для установления наследственной передачи вируса. Использованы диагностические и научно-поисковые методы: ПЦР в режиме реального времени, секвенирование по Сэнгеру, массовое параллельное секвенирование.
Результаты. В крови ДНК ВГЧ-6A/B обнаружена в 5,7% (15/262) случаев. Концентрация ДНК ВГЧ-6A/B составляла < 1,0 lg копий/105 клеток у 12 (4,6%) человек; 1,0–2,0 – у 2 (0,8%); > 5,0 – у 1 (0,4%). У 1 обследуемого хиВГЧ6-В-статус верифицирован ПЦР-анализом волосяных луковиц и ногтевых пластин. При расшифровке данного случая установлена наследственная передача в 3 поколениях: мать–дочь–внук. Проведенный филогеномный анализ показал, что выделенные российские клинические эндогенные изоляты сформировали уникальную монофилитическую ветвь в пределах клады, представленной преимущественно изолятами хиВГЧ-6В из Европы.
Заключение. Получены предварительные данные о частоте выявления в России хиВГЧ-6A/B, передаваемого по наследству. Распространенность наследуемого хиВГЧ-6B составила 0,4% (1/262; 95% ДИ 0–2,1). хиВГЧ-6B, передаваемый по наследству, обнаружен и лабораторно подтвержден в 3 поколениях. Эндогенный хиВГЧ-6А не выявлен. Для понимания генетического разнообразия и географической стратификации хиВГЧ-6A и -6B, передаваемых по наследству, в России необходимы дальнейшие широкомасштабные исследования.
Human betaherpesvirus 6A и 6B (ВГЧ-6A, ВГЧ-6B) распространены среди людей во всем мире [1].
Все больше данных свидетельствуют о том, что ВГЧ-6A и ВГЧ-6B могут интегрировать в субтеломерную/теломерную область хромосомы клетки хозяина и наследоваться через зародышевую линию. Такая форма существования вирусов становится возможной благодаря особенностям строения их геномов [2, 3], а именно строению 2 терминальных областей (Т1, Т2), фланкирующих уникальную область (U). Т1 и Т2 содержат совершенные и несовершенные повторы, комплементарные теломерным повторам хромосом человека. Это позволяет вирусам встраивать свой геном посредством гомологичной рекомбинации. При интеграции в половые клетки возможна дальнейшая передача хромосомно-интегрированного (хи) вируса по наследству от одного или обоих родителей с вероятностью 50% [2, 4, 5]. В таком случае наследуемый хиВГЧ-6А/В является эндогенным и выявляется во всех клетках человека-носителя, обладающего хиВГЧ-6А/В-статусом, в соотношении не менее 1:1 (ядросодержащая клетка человека : геном вируса).
На современном этапе основным критерием лабораторного подтверждения активной ВГЧ-6А/В-инфекции, требующей назначения противовирусной терапии, является обнаружение высокой концентрации ДНК вируса в крови пациентов с помощью методов амплификации нуклеиновых кислот. Однако при лабораторном обследовании лиц с хиВГЧ-6А/В-статусом такой подход может приводить к диагностическим ошибкам, необоснованному назначению и излишнему применению лекарственных препаратов в рамках проведения фармакотерапии [6, 7].
Согласно последним опубликованным зарубежным данным [8], от 0,6 до 2% населения, в зависимости от географического положения региона, в котором выполнялась выборка, являются носителями наследуемого хиВГЧ-6А/В. В Российской Федерации подобного рода исследования по изучению распространенности наследуемого хиВГЧ-6А/В ранее не проводились, что и явилось целью настоящей работы.
Материалы и методы
В период с мая 2017 по июнь 2018 г. проведено лабораторное обследование 262 клинически здоровых лиц, проживающих в Москве и Московской области. Среди них были 75 мужчин и 187 женщин в возрасте от 18 до 67 лет (медиана возраста составила 36 лет). Кроме того, для расшифровки случая наследственной передачи хиВГЧ-6В в исследование были дополнительно включены 3 члена одной семьи: двое мужчин и женщина в возрасте 21 года, 50 и 69 лет соответственно Лабораторное обследование проводили в соответствии с законодательством РФ, международными этическими нормами, нормативными документами ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора (далее – ЦНИИЭ) при наличии информированного добровольного письменного согласия пациентов.
Материалом для лабораторного исследования служили образцы биологического материала: кровь, мазки из ротоглотки, моча, волосяные фолликулы, ногтевые пластины. При проведении скрининга, направленного на изучение распространенности хиВГЧ-6А/В, тестировали образцы крови. При установлении факта наследственной передачи эндогенного вируса кроме цельной крови дополнительно исследовали и другие виды биологического материала, перечисленные ранее.
Экстракцию ДНК из анализируемых образцов биологического материала проводили при помощи комплекта реагентов «РИБО-преп» (РУ № ФСР 2008/03147, ЦНИИЭ, Россия). Количественное определение ДНК ВГЧ-6А/В выполняли методом ПЦР в режиме реального времени (ПЦР-РВ) с использованием набора реагентов «АмплиСенс®HHV6-скрин-титр-FL» (РУ № ФСР 2010/09506, ЦНИИЭ, Россия). Постановку и анализ результатов амплификации проводили на приборе с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времени Rotor-Gene Q (Qiagen, Германия) в соответствии с инструкцией производителя. Концентрацию ДНК ВГЧ-6А/В рассчитывали в логарифмах копий ДНК вируса на стандартное кол...
