Полиморфизм гена FMR1 при синдроме поликистозных яичников

Цель исследования. Изучение встречаемости различных аллелей высокополиморфного CGG повтора в гене FMR1 у пациенток с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) и их взаимосвязи с функциональным состоянием репродуктивной системы. Материал и методы. 115 пациенткам с СПКЯ проводили определение аллелей CGG повтора в гене FMR1 методом метилспецифической ПЦР (МС-ПЦР) с последующим фрагментным анализом продуктов, конъюгированных с флуоресцентным красителем FAM. Результаты исследования. За условную норму по отношению к овариальному резерву в российской популяции принят диапазон (по результатам предыдущих исследований) 28-36 CGG тринуклеотидных повторов гена FMR1. С учетом этого выделены 3 группы больных: имеющие «короткий» (<28) аллель а, «нормальный» (28–36) аллель b и «длинный» (>36) аллель c. Определены 5 cубгенотипов – aa у 7% больных, ab – у 22,8%, bb – у 50,9%, bc – у 14,9%, ac – у 4,4%. Длина CGG повторов в гене FMR1 у 50,9% больных с СПКЯ укладывается в нормативные параметры (bb), соответственно 49,1% имеет «аномальные» аллели (а и с). В соответствии с субгенотипами выделены 3 основные группы: I группа – 58 (50,9%) больных (bb), II – 43 (37,7%) больных с одним «аномальным» («коротким» или «длинным») аллелем (bc, ab) и III – 13 (11,4%) с двумя «аномальными» аллелями (ac, aa). Выявлено двукратное увеличение частоты встречаемости аменореи у пациенток III группы по сравнению с I и II (29 против 13 и 15%, соответственно, р<0,05). Средний уровень АМГ возрастает при наличии «аномальных» аллелей, в III группе он был достоверно выше, чем в I и II (17,8±5,4 пг/мл против 12,1±2,6 и 14,3±9,8, р<0,05). У пациенток с бесплодием I определяются более длинные повторы CGG по сравнению с пациентками с сохраненной фертильностью (32±4,08 против 20,5±1,71 (1-CGG) и 33±5,04 против 24±3,57 (2-CGG) (р<0,001). Заключение. У каждой второй пациентки с СПКЯ, независимо от фенотипа синдрома, определяется «аномальное» количество CGG повторов гена FMR1, ассоциированное с более тяжелой овуляторной дисфункцией. Высокая частота представленности «аномальных» аллелей гена FMR1, сопоставимая с таковой при преждевременной недостаточности яичников позволяет предположить схожесть молекулярно-генетических изменений в генезе нарушений фолликулогенеза при этих состояниях.

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) рассматривают в качестве основной причины гиперандрогении и ановуляторного бесплодия. Его частота среди женщин репродуктивного возраста по разным диагностическим критериям варьирует от 6 до 20% [1].

Несмотря на почти 80-летний период изучения СПКЯ, вопросы этиологии и патогенеза продолжают оставаться предметом научных исследований и дискуссий. Современный этап фундаментального изучения СПКЯ условно можно назвать этапом молекулярной биологии и генетики. Предположения о наличии генетической компоненты в происхождении СПКЯ были высказаны еще в 60-х годах прошлого столетия. В настоящее время активно ведется поиск генов-кандидатов, ассоциированных с различными проявлениями СПКЯ, опубликованы результаты нескольких исследований геномных ассоциаций (GWAS) [2]. Однако взаимосвязь выявленных генетических полиморфизмов с клиническими проявлениями СПКЯ четко не доказана и не всегда прослеживается. Это обосновывает дальнейший поиск возможных предикторов СПКЯ и его модификации в возрастном аспекте.

При изучении функции яичников значительное внимание уделяют гену FMR1, расположенному на длинном плече Х хромосомы в локусе Xq27.3. Он ответственен за синтез трансмембранного белка (fragile X mental retardation protein – FMRP), играющего важную роль в механизмах пролиферации половых клеток и отбора примордиальных фолликулов в растущий пул. Установлена взаимосвязь между изменениями числа CGG повторов в гене FMR1 и процессами фолликулогенеза. N. Gleicher показал, что число 26–34 CGG повторов в различных этнических группах представляет собой диапазон [3], который косвенно позволяет судить о нормальной функции яичников. Экспериментально показано, что аномальное число повторов в гене FMR1 (то есть число повторов вне «условной нормы») может приводить как к нарушению закладки овариального пула, так и к быстрому истощению нормального пула растущих фолликулов [4, 5]. Наиболее изучена взаимосвязь аномального числа CGG повторов гена FMR1 с развитием преждевременной недостаточности яичников (ПНЯ) [6]. СПКЯ, как и ПНЯ, можно рассматривать как состояние, ассоциированное с нарушением фолликулогенеза. Это дает основание для изучения роли полиморфных вариантов гена FMR1 при данной патологии. Следует отметить, что подобные вопросы освещены лишь в единичных научных публикациях. Одни из них касаются оценки роли гена FMR1 в эффективности проведения программ вспомогательных репродуктивных технологий, другие – взаимосвязи гетерозиготного носительства коротких аллелей (менее 24 CGG повторов) гена FMR1 с быстрым истощением овариального резерва у женщин с СПКЯ – подобным фенотипом [7, 8]. Ограниченное число проведенных исследований, выполненных на малых выборках больных, а также неоднозначность полученных результатов не дают четких представлений о взаимосвязи гена FMR1 с нарушениями фолликулогенеза при СПКЯ. Вместе с тем проведение исследований в данном направлении представляется небезынтересным как с научной, так и с практической точки зрения.

Цель исследования – изучение частот различных аллелей высокополиморфного CGG повтора в гене FMR1 у пациенток с СПКЯ и их взаимосвязи с функциональным состоянием репродуктивной системы.

Материал и методы исследования

В исследование были включены 115 пациенток с СПКЯ (средний возраст 27,1±4,6 года). Диагностика СПКЯ и репродуктивных фенотипов проводились в соответствии с Роттердамскими критериями [9]. Средний возраст менархе больных составил 13,5±1,5 года. Нарушения менструального цикла отмечены почти у всех больных: у 95 (82%) – олигоменорея (первичная – у 69%, вторичная – у 13%), у 18 (16%) – аменорея (первичная – у 4%, вторичная – у 12%), лишь у 2 пациенток (2%) менструальный цикл был регулярным. Задержки менструации до 1 месяца выявлены у 13,4% больных, от 1 до 3 месяцев – у 35,7%, от 3 до 6 месяцев – у 32,9%. Бесплодие отмечалось у 32 из 48 женщин, заинтересованных в беременности (66,7%). Индекс массы тела (ИМТ) обследованных больных составил – 22,9±4,7кг/м2. Нормальную массу тела имели 65,9% женщин, дефицит – 11,8%, избыток – 14,1%, ожирение I–III степени – 8,2%. Признаки гиперандрогении (ГА) отмечены у 66 (57,4%) пациенток. Распределение пациенток по фенотипам было следующим: фенотип А (олигоменорея+ПКЯ+ГА) был диагностирован у 69 (60%) больных, В (олигоменорея+ГА) – у 5 (4,3%), С (ПКЯ+ГА) – у 1 (0,9%), Д (олигоменорея+ПКЯ) – у 40 (34,8%). Малочисленность группы В, а также ее сходство (за исключением отсутствия эхографических признаков ПКЯ) с группой А стали основанием для объединения этих 2 фенотипов в один классический андрогенный тип. Фенотип Д обозначен как неандрогенный, фенотип С ввиду крайней малочисленности группы в расчеты исследования не включали. Статистическая обработка данных проводилась на 114 пациентках.

Протокол исследования включал оценку гормональных параметров – определение уровней антимюллерова гормо...

Табеева Г.И., Немова Ю.И., Найдукова А.А., Кузнецова Е.Б., Залетаев Д.Б., Чернуха Г.Е.