Терапия №5 / 2019
Полиморфные маркеры генов врожденного иммунитета у пациентов с аллергическим и неаллергическим фенотипом бронхиальной астмы
Кафедра иммунологии с курсом дополнительного профессионального образования, кафедра госпитальной терапии ФГБОУ ВО «Ставропольский государственный медицинский университет» Минздрава России
Цель исследования – определить полиморфные маркеры генов рецепторов врожденного иммунитета при аллергическом и неаллергическом фенотипах бронхиальной астмы.
Материал и методы. Иммуногенетические исследования выполнены у 65 человек с аллергической бронхиальной астмой, у 35 – с неаллергическим фенотипом заболевания.
Результаты. Установлено, что полиморфными маркерами повышенного риска аллергической бронхиальной астмы служат аллели TLR2 2258A, TLR6 745С и генотип TLR6 С745Т, неаллергической бронхиальной астмы – аллели TLR2 2258A и CD14(-159)C и генотип CD14С(-159)C.
Заключение. Выявлена зависимость течения бронхиальной астмы, показателей функции внешнего дыхания, уровня IgE в сыворотке, а также показателей эозинофилов и нейтрофилов индуцированной мокроты от вариантов аллелей и генотипов рецепторов врожденного иммунитета.
Бронхиальная астма (БА) – типичное мультифакторное заболевание, которое развивается при сложном взаимодействии множества генов, факторов внешней среды и ген-средовых взаимодействий [1, 2, 3]. В основе оптимального лечения БА лежит концепция, объединяющая генетическую предрасположенность с механизмом заболевания и терапевтическим эффектом, поэтому особый интерес представляет молекулярно-генетическое исследование фенотипов астмы [4]. В последние годы увеличивается число публикаций, посвященных полиморфизму генов рецепторов врожденного иммунитета (TLR), реализующих свое действие на начальных этапах взаимодействия с антигеном и определяющих интенсивность иммунного ответа на микробные и немикробные аллергены [5, 6, 7].
Установлено, что TLR участвуют в распознавании аллергенов в дыхательных путях, регулируют активность и поляризацию адаптивного Th1, Th2, Th17 иммунного ответа, играя важную роль в развитии БА [6]. Ключевое значение среди полиморфизмов, влияющих на функции TLR, имеют однонуклеотидные единичные замены (SNP) в генах, ответственных за внутренний и внешний домены рецепторов TLR. Изменение их структуры и функции формирует дефекты проведения сигнала внутрь клетки, что сопровождается нарушением экспрессии цитокинов и других эффекторных молекул клетками иммунной системы и эпителием дыхательных путей и способствует развитию гиперреактивности и ремоделированию дыхательных путей [1, 5, 8, 9].
Цель исследования – определить полиморфные маркеры генов рецепторов врожденного иммунитета при аллергическом и неаллергическом фенотипах БА.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Клинические и иммуногенетические исследования выполнены у 100 больных русской национальности Ставропольского края с БА, находившихся на амбулаторном лечении в ГБУЗ СК «Городская поликлиника № 1» г. Ставрополя. Аллергическая астма (АБА) была диагностирована у 65 пациентов, неаллергическая (НБА) – у 35. Возраст больных находился в диапазоне 20–70 лет; медиана этого показателя в группе АБА составила 34 [23,5; 45] года, в группе НБА – 61 [47; 66] год (p
В контрольную группу вошли 50 практически здоровых людей в возрасте от 18 до 60 лет.
Клинико-инструментальные и лабораторные методы исследования включали сбор аллерго-анамнеза, клинический осмотр пациентов, оценку тяжести течения БА, исследование функции внешнего дыхания с применением компьютерной спирографии, пикфлоуметрии, Rh-графию легких и придаточных пазух носа, определение антител – IgM, IgG к Chl. pneumoniae и Mycoplasma pneumoniae – методом иммуноферментного анализа (ИФА), цитологическое исследование индуцированной мокроты.
Содержание общего и специфических IgE в сыворотке крови определяли методом твердофазного хемилюминесцентного анализа с помощью наборов реагентов Total IgE (Siemens, США) и панелей аллергенов: пыльцевых, бытовых, эпителиальных и плесневых аллергенов (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, США).
Для оценки клеточного состава индуцированной мокроты 50 мкл биоматериала наносили на предметное стекло, высушивали в течение 10 мин в термостате при температуре 37 0С, фиксировали в парах 40% формалина и окрашивали по Романовскому–Гимзе. С помощью световой микроскопии подсчитывали не менее 400 клеток в 50–100 полях зрения.
Для выявления полиморфных маркеров генов TLR2 G2258A (Arg753Gln), TLR6 C745T (Ser249Pro), CD14 C(-159)T методом полимеразной цепной реакции в работе использовали диа...
