Полное удаление zona pellucida бластоцисты перед переносом в крио-цикле не влияет на результативность программ ЭКО

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.6.88-93

01.07.2019
16

1) Клиника репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР», Москва, Россия; 2) ФГБОУВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», биологический факультет, Москва, Россия; 3) Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, Россия; 4) ФГБОУВО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова», физический факультет, Москва, Россия

Цель исследования. Произвести оценку эффективности программ ЭКО при переносе в криоцикле бластоцист, у которых была удалена блестящая оболочка.
Материал и методы. В экспериментальную группу вошли 209 пациенток, эмбрионы которых перед переносом подвергались полному механическому удалению zona pellucida (zp); в контрольной группе, состоявшей из 222 пациенток, для переноса использовали бластоцисты с интактной zp. Оценивали: частоту имплантации эмбрионов, частоту клинической и прогрессирующей клинической беременности.
Результаты. Все клинические исходы программ не имели статистически значимых различий в группе эмбрионов с удаленной zp и с эмбрионами контрольной группы, включая подгруппы пациенток до 36 лет включительно и пациенток старше 36 лет.
Заключение. Полное удаление zp у бластоцист перед их переносом в крио-цикле не влияет на результативность программ ЭКО.

Выход бластоцисты из блестящей оболочки (т.е. хетчинг) является необходимым условием для адгезии и нидации эмбриона в эндометрий и наступления беременности. Устойчивость zona pellucida (zp) к действию литических ферментов является одним из неблагоприятных явлений, возникающих в процессе криоконсервации/оттаивания ооцитов и эмбрионов. Такое «упрочнение» zp приводит к повышению ее устойчивости к действию лизинов, секретируемых трофэктодермой эмбриона, что, в свою очередь, приводит к нарушению вылупления бластоцисты [1]. Тем не менее, данный феномен может быть сведен к минимуму использованием процедуры вспомогательного хетчинга.

Процедура витрификации бластоцисты человека может приводить к упрочнению zp эмбриона. Сообщалось, что после витрификации бластоцист человека значительно увеличивается устойчивость к ферментативному удалению проназой zp, по сравнению с эмбрионами не подвергавшимися процедуре криоконсервации/оттаивания [2]. Также сообщалось, что вспомогательный хетчинг улучшает клинические исходы в циклах переноса криоконсервированных/оттаянных эмбрионов [3]. Существует вероятность того, что бластоцисты со сниженной жизнеспособностью не в состоянии самостоятельно вылупиться даже после частичного удаления или истончения zp. Кроме того, вылупление эмбриона через отверстие в zp, полученное в результате применения вспомогательного хетчинга, также требует от бластоцисты значительных энергетических затрат и может вызывать заметное изменение их формы [4]. Поэтому Vajta G. и соавт. [4] предположили, что полное удаление zp у бластоцисты может иметь бóльшее положительное влияние на ее имплантацию, нежели частичное удаление или нарушение целостности zp. В предварительных исследованиях Hiraoka K. было показано, что при переносе витрифицированных/оттаянных бластоцист полное удаление zp приводило к более высоким долям беременности, имплантации и родов, чем частичное удаление zp [5].

Целью настоящего исследования является оценка эффективности программ ЭКО при переносе в криоцикле витрифицированных/оттаянных бластоцист, у которых, механическим способом была полностью удалена блестящая оболочка по сравнению с переносом zp-интактных эмбрионов.

Материалы и методы

Работа проводилась на базе клиники «АльтраВита», Москва. В настоящем исследовании приняли участие 431 пациентка, проходящая лечение методами ЭКО с переносом витрифицированных/оттаянных бластоцист в криоцикле (общее число бластоцист — 476), которые были разделена на 2 группы: экспериментальную (209 пациенток, 230 бластоцист) с переносом витрифицированных/оттаянных бластоцист, подвергшихся полному удалению zp, и контрольную (222 пациентки, 246 бластоцист) с переносом витрифицированных/оттаянных zp-интактных бластоцист.

Все бластоцисты хорошего качества были криоконсервированы на 5-6-й день развития и разморожены непосредственно в день переноса эмбриона. Эмбрионы пациенток были случайным образом отнесены к экспериментальной или контрольной группе. После переноса эмбрионов оценивали следующие показатели: доля имплантации эмбрионов, частота наступления клинической, прогрессирующей клинической и многоплодной беременностей.

Возраст женщин составил от 23 до 49 лет (медиана (Ме) и квартили Q1, Q3 возраста женщин составили 33,5 (29,8; 36,6) и 33,0 (30,0; 38,0) года в опытной и контрольной группах (p=0,32) соответственно.

Овариальная стимуляция. Индукцию суперовуляции проводили по протоколу с применением антагонистов гонадотропин-рилизинг гормона со 2–3 дня менструального цикла с использованием рекомбинантных и/или мочевых гонадотропинов в суточной дозе 150—300 МЕ. Овуляцию инициировали введением хорионического гонадотропина человека в дозе 10 000 МЕ за 34—36 ч до пункции фолликулов.

Получение ооцитов. Аспирацию фолликулов выполняли под внутривенным наркозом. Ооциты, окруженные слоем клеток кумулюса, получали в результате трансвагинальной пункции фолликулов под ультразвуковым контролем спустя 34—36 ч после введения овуляторной дозы хоринического гонадотропина.

Оплодотворение. Для оплодотворения полученных ооцитов применяли процедуру ICSI или IMSI Hoffman modulation [6, 7], в зависимости от параметров спермы.

Культивирование эмбрионов. Культивирование осуществляли в СО2–инкубаторе при 36,7 °C в увлажненной атмосфере с 7,3% СО2 ...

Список литературы

  1. Fujiwara K., Sano D., Seita Y., Inomata T., Ito J., Kashiwazaki N. Ethylene glycol-supplemented calcium-free media improve zona penetration of vitrified rat oocytes by sperm cells. J. Reprod. Dev. 2010; 56(1): 169-75. https://doi.org/10.1262/jrd.09-107H.
  2. Hiraoka K., Fuchiwaki M., Hiraoka K., Horiuchi T., Murakami T., Kinutani M. et al. Re-cryopreservation by vitrification of human blastocysts developed from frozencleaved embryos: a report of 15 cycles. J. Mammalian Ova Res. 2007; 24(1): 23-8. https://doi.org/10.1274/jmor.24.23.
  3. Martins W.P., Rocha I.A., Ferriani R.A., Nastri C.O. Assisted hatching of human embryos: a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Hum. Reprod. Update. 2011; 17(4): 438-53. https://doi.org/10.1093/humupd/dmr012.
  4. Vajta G., Rienzi L., Bavister B.D. Zona-free embryo culture: is it a viable option to improve pregnancy rates? Reprod. Biomed. Online. 2010; 21: 17-25. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2010.03.014.
  5. Hiraoka K., Fuchiwaki M., Horiuchi T., Murakami T., Kinutani M., Kinutani K. Zona pellucida removal and vitrified blastocyst transfer outcome: a preliminary study. Reprod. Biomed. Online. 2007; 15(1): 68-75. https://doi.org/10.1016/S1472-6483(10)60694-3.
  6. Yakovenko S., Apryshko V., Yutkin E., Troshina M., Simonenko E. Technique and effectiveness of intracytoplasmic morphologically selected sperm injection (IMSI) based on HMC (Hoffman modulation contrast). Fertil. Steril. 2009; 92( 3, Suppl.): S162. (Scientific Abstracts from the 2009 Annual Meeting of the American Society for Reproductive Medicine.)
  7. Yakovenko S. IMSI Hoffman modulation. In: International Workshop on Male Infertility - IMSI: new advances. June 24-27, 2010 Rome, Italy.
  8. Jelinkova L., Pavelkova J., Strehler E., Paulus W, Zivny J., Sterzik K. Improved implantation rate after chemical removal of the zona pellucida. Fertil. Steril. 2003; 79(6): 1299-303. https://doi.org/10.1016/S0015-0282(03)00260-7.
  9. Kinget K., Nijs M., Cox A.M., Janssen M., Jacobs P., Bosmans E. et al. A novel approach for patients at risk for ovarian hyperstimulation syndrome, elective transfer of a single zona-free blastocyst on day 5. Reprod. Biomed. Online. 2002; 4: 51-5. https://doi.org/10.1016/S1472-6483(10)61915-3.
  10. Isik A.Z., Vicdan K., Kaba A., Dagli G. Comparison of zona manipulated and zona intact blastocyst transfers, a prospective randomized trial. J. Assist. Reprod. Genet. 2000; 17(3): 135-9. https://doi.org/10.1023/A:1009410020580.
  11. Urman B., Balaban B., Alatas C., Aksoy S., Mumcu A., Isiklar A. Zona-intact versus zona-free blastocyst transfer, a prospective, randomized study. Fertil. Steril. 2002; 78(2): 392-6. https://doi.org/10.1016/S0015-0282(02)03238-7.
  12. Mansour R.T., Rhodes C.A., Aboulghar M.A., Serour G.I., Kamal A. Transfer of zona-free embryos improves outcome in poor prognosis patients, a prospective randomized controlled study. Hum. Reprod. 2000; 15(5): 1061-4. https://doi.org/10.1093/humrep/15.5.1061.
  13. Lan K.C., Huang F.J., Lin Y.C., Kung F.T., Chang S.Y. Zona-free versus laser zona-assisted hatching blastocyst transfer, a comparison of outcomes. Fertil. Steril. 2009; 91(5): 1959-62. https://doi.org/10.1016/j.fertnstert.2008.01.068.
  14. Hiraoka K., Fuchiwaki M., Hiraoka K., Horiuchi T., Murakami T., Kinutani M. et al. Zona pellucida removal and vitrified blastocyst transfer outcome, a preliminary study. Reprod. Biomed. Online. 2007; 15(1): 68-75.
  15. Carney S.K., Das S., Blake D., Farquhar C., Seif M.M., Nelson L. Assisted hatching on assisted conception in vitro fertilization (IVF) and intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Cochrane Database Syst. Rev. 2012; (12): CD001894. https://doi.org/10.1002/14651858.CD001894.pub5.
  16. Li D., Yang D.L., An J., Jiao J., Zhou Y.M., Wu Q.J. et al. Effect of assisted hatching on pregnancy outcomes, a systematic review and meta-analysis of randomized controlled trials. Sci. Rep. 2016; 6: 31228. https://doi.org/10.1038/srep31228.
  17. Ueno S., Ezoe K., Yabuuchi A., Uchiyama K., Okimura T., Okuno T. et al. Complete zona pellucida removal from vitrified-warmed human blastocysts facilitates earlier in-vitro attachment and outgrowth. Reprod. Biomed. Online. 2016; 33(2): 140-8. https://doi.org/10.1016/j.rbmo.2016.05.007.

Поступила 07.02.2109

Принята в печать 22.02.2019

Об авторах / Для корреспонденции

Кириенко Константин Владимирович; к.б.н.; ведущий эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89671677923. E-mail: kkiriyenko@rambler.ru
Апрышко Валентина Петровна; к.б.н.; заведующий отделом эмбриологии Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР», научный сотрудник ФГБОУВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Биологический факультет.
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89671677923. 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1/12. Тел.: 89104092813. E-mail: supermycolog@mail.ru
Миронова Анна Геннадьевна; ведущий эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР»; аспирант Института биохимической физики
им. Н.М. Эмануэля РАН. 117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89671677923.
119334, Россия, Москва, ул. Косыгина, д. 4. Тел.: 89161670088. E-mail: agm90@mail.ru
Харитонова Маргарита Александровна; к.б.н.; заместитель заведующего отделом эмбриологии Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89032004492. E-mail: ritasarc@mail.ru
Ермилова Ирина Юрьевна; к.б.н.; главный эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89169402272. E-mail: i_ermilova@altravita.ru
Наумова Анна Александровна; ведущий эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89163633037. E-mail: naumo.ann@yandex.ru
Клепуков Алексей Александрович; ведущий эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР»
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89032559575. E-mail: klepukov@altravita.ru
Болт Антон Игоревич; ведущий эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89032157350. E-mail: a_bolt@altravita.ru
Бозина Яна Вадимовна; старший эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89055932045. E-mail: yana.bozina@gmail.com
Лебедева Елена Борисовна; эмбриолог Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР».
117186, Россия, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А. Тел.: 89263827306.E-mail: lebedester@gmail.com
Симоненко Екатерина Юрьевна; к.ф.-м.н.; научный сотрудник ФГБОУВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Физический факультет
119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1/12. Тел.: 89168081888. E-mail: ksimonenko@inbox.ru
Яковенко Сергей Александрович; к.ф.-м.н.; генеральный директор Клиники репродукции человека «АльтраВита», ООО «ЭКО ЦЕНТР»
(117186, Россия, г. Москва, ул. Нагорная, д. 4А); научный сотрудник ФГБОУВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Физический факультет. 119234, Россия, Москва, Ленинские горы, д. 1/12. Тел.: 89037909018. E-mail: altravita@mail.ru

Для цитирования: Кириенко К.В., Апрышко В.П., Миронова А.Г., Харитонова М.А., Ермилова И.Ю., Наумова А.А., Клепуков А.А., Болт А.И. , Бозина Я.В., Симоненко Е.Ю., Яковенко С.А. Полное удаление zona pellucida бластоцисты перед переносом в криоцикле не влияет на результативность программ экстракорпорального оплодотворения
Акушерство и гинекология. 2019; (6):88-93.
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.6.88-93

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь

Статьи по теме

Все номера

Смотрите также