Полное удаление zona pellucida бластоцисты перед переносом в крио-цикле не влияет на результативность программ ЭКО

Цель исследования. Произвести оценку эффективности программ ЭКО при переносе в криоцикле бластоцист, у которых была удалена блестящая оболочка.
Материал и методы. В экспериментальную группу вошли 209 пациенток, эмбрионы которых перед переносом подвергались полному механическому удалению zona pellucida (zp); в контрольной группе, состоявшей из 222 пациенток, для переноса использовали бластоцисты с интактной zp. Оценивали: частоту имплантации эмбрионов, частоту клинической и прогрессирующей клинической беременности.
Результаты. Все клинические исходы программ не имели статистически значимых различий в группе эмбрионов с удаленной zp и с эмбрионами контрольной группы, включая подгруппы пациенток до 36 лет включительно и пациенток старше 36 лет.
Заключение. Полное удаление zp у бластоцист перед их переносом в крио-цикле не влияет на результативность программ ЭКО.

Выход бластоцисты из блестящей оболочки (т.е. хетчинг) является необходимым условием для адгезии и нидации эмбриона в эндометрий и наступления беременности. Устойчивость zona pellucida (zp) к действию литических ферментов является одним из неблагоприятных явлений, возникающих в процессе криоконсервации/оттаивания ооцитов и эмбрионов. Такое «упрочнение» zp приводит к повышению ее устойчивости к действию лизинов, секретируемых трофэктодермой эмбриона, что, в свою очередь, приводит к нарушению вылупления бластоцисты [1]. Тем не менее, данный феномен может быть сведен к минимуму использованием процедуры вспомогательного хетчинга.

Процедура витрификации бластоцисты человека может приводить к упрочнению zp эмбриона. Сообщалось, что после витрификации бластоцист человека значительно увеличивается устойчивость к ферментативному удалению проназой zp, по сравнению с эмбрионами не подвергавшимися процедуре криоконсервации/оттаивания [2]. Также сообщалось, что вспомогательный хетчинг улучшает клинические исходы в циклах переноса криоконсервированных/оттаянных эмбрионов [3]. Существует вероятность того, что бластоцисты со сниженной жизнеспособностью не в состоянии самостоятельно вылупиться даже после частичного удаления или истончения zp. Кроме того, вылупление эмбриона через отверстие в zp, полученное в результате применения вспомогательного хетчинга, также требует от бластоцисты значительных энергетических затрат и может вызывать заметное изменение их формы [4]. Поэтому Vajta G. и соавт. [4] предположили, что полное удаление zp у бластоцисты может иметь бóльшее положительное влияние на ее имплантацию, нежели частичное удаление или нарушение целостности zp. В предварительных исследованиях Hiraoka K. было показано, что при переносе витрифицированных/оттаянных бластоцист полное удаление zp приводило к более высоким долям беременности, имплантации и родов, чем частичное удаление zp [5].

Целью настоящего исследования является оценка эффективности программ ЭКО при переносе в криоцикле витрифицированных/оттаянных бластоцист, у которых, механическим способом была полностью удалена блестящая оболочка по сравнению с переносом zp-интактных эмбрионов.

Материалы и методы

Работа проводилась на базе клиники «АльтраВита», Москва. В настоящем исследовании приняли участие 431 пациентка, проходящая лечение методами ЭКО с переносом витрифицированных/оттаянных бластоцист в криоцикле (общее число бластоцист — 476), которые были разделена на 2 группы: экспериментальную (209 пациенток, 230 бластоцист) с переносом витрифицированных/оттаянных бластоцист, подвергшихся полному удалению zp, и контрольную (222 пациентки, 246 бластоцист) с переносом витрифицированных/оттаянных zp-интактных бластоцист.

Все бластоцисты хорошего качества были криоконсервированы на 5-6-й день развития и разморожены непосредственно в день переноса эмбриона. Эмбрионы пациенток были случайным образом отнесены к экспериментальной или контрольной группе. После переноса эмбрионов оценивали следующие показатели: доля имплантации эмбрионов, частота наступления клинической, прогрессирующей клинической и многоплодной беременностей.

Возраст женщин составил от 23 до 49 лет (медиана (Ме) и квартили Q1, Q3 возраста женщин составили 33,5 (29,8; 36,6) и 33,0 (30,0; 38,0) года в опытной и контрольной группах (p=0,32) соответственно.

Овариальная стимуляция. Индукцию суперовуляции проводили по протоколу с применением антагонистов гонадотропин-рилизинг гормона со 2–3 дня менструального цикла с использованием рекомбинантных и/или мочевых гонадотропинов в суточной дозе 150—300 МЕ. Овуляцию инициировали введением хорионического гонадотропина человека в дозе 10 000 МЕ за 34—36 ч до пункции фолликулов.

Получение ооцитов. Аспирацию фолликулов выполняли под внутривенным наркозом. Ооциты, окруженные слоем клеток кумулюса, получали в результате трансвагинальной пункции фолликулов под ультразвуковым контролем спустя 34—36 ч после введения овуляторной дозы хоринического гонадотропина.

Оплодотворение. Для оплодотворения полученных ооцитов применяли процедуру ICSI или IMSI Hoffman modulation [6, 7], в зависимости от параметров спермы.

Культивирование эмбрионов. Культивирование осуществляли в СО2–инкубаторе при 36,7 °C в увлажненной атмосфере с 7,3% СО2 ...

Кириенко К.В., Апрышко В.П., Миронова А.Г., Харитонова М.А., Ермилова И.Ю., Наумова А.А., Клепуков А.А., Болт А.И., Бозина Я.В., Лебедева Е.Б., Симоненко Е.Ю., Яковенко С.А.