Акушерство и Гинекология №8-2 / 2012
Применение методов криоконсервации эмбрионов в программах вспомогательных репродуктивных технологий
В статье представлены современные данные применения метода криоконсервации эмбрионов в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Проведен сравнительный анализ эффективности использования метода медленного замораживания и витрификации. Рассматриваются возможности неинвазивных способов оценки качества эмбрионов.
На сегодняшний день криоконсервация эмбрионов широко применяется в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Возможность переноса замороженных/размороженных эмбрионов приводит к увеличению кумулятивной частоты наступления беременности, позволяет избежать повторных циклов стимуляции суперовуляции, снизить риск развития синдрома гиперстимуляции яичников, тем самым повышая эффективность и безопасность ВРТ [7, 31]. Криоконсервированные эмбрионы могут быть использованы после неудачного переноса нативных эмбрионов или, в случае успешного завершения беременности, при желании семейной пары иметь еще детей данные программы могут быть реализованы позже. Таким образом, криоконсервация эмбрионов является альтернативным вариантом использования оставшихся эмбрионов [20, 25].
В настоящий момент существуют два основных метода криоконсервации: метод медленного замораживания и активно развивающийся в последние несколько лет метод витрификации.
Первая беременность в результате переноса эмбрионов после криоконсервации методом медленного замораживания была получена австралийскими врачами А. Trounson и L. Mohr в 1983 г. Следуя технологии метода медленного замораживания, эмбрионы постепенно подвергают воздействию относительно низких концентраций криопротекторов. Режим медленного замораживания обеспечивают аппаратные устройства, так называемые «программируемые замораживатели». После достижения необходимой температуры соломинки помещают в жидкий азот и хранят при температуре -196 оС. Размораживание эмбрионов проводят при комнатной температуре в откалиброванных средах. Сидинг и очень медленная скорость замораживания, использующиеся в технологии медленного замораживания, обеспечивают внеклеточное образование кристаллов льда, тем самым способствуя снижению вероятности криоповреждения клеток эмбрионов.
Метод витрификации впервые был применен на мышиных эмбрионах в 1985 г. В начале 90-х гг. прошлого века появились первые сообщения об успешном переносе пациенткам эмбрионов, витрифицированных на стадии пронуклеусов и 2–3 дней развития. Описание первой беременности, закончившейся родами после переноса пациентке бластоцист, криоконсервированных методом витрификации, принадлежит японскому врачу Y. Yokota.
В основе метода витрификации лежит ультрабыстрая технология охлаждения, исключающая кристаллообразование. В процессе витрификации эмбрионы сначала подвергают воздействию относительно высоких концентраций криопротекторов, а затем их погружают непосредственно в жидкий азот.
Основным сдерживающим фактором в развитии метода витрификации являлась необходимость использования высоких концентраций криопротекторов, оказывающих токсический эффект и вызывающих осмотическое повреждение клеток. Прорыв в области витрификации был связан с внедрением различных технологий (Cryotop, Cryoloop, Cryo-E, Rapid-i и т.д.), приводящих к уменьшению объема охлаждаемого образца, что позволило снизить концентрацию криопротекторов и значительно повысить эффективность метода [17, 23, 24, 35]. На сегодняшний день лидирующая роль по совершенствованию метода витрификации и исследованию в области криоконсервации принадлежит японскому врачу...
