Применение преимплантационной диагностики в рамках программы вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с сочетанием мутаций в azf-локусе хромосомы Y и полиморфизма гена cftr у мужей

Цель исследования. Изучение распространенности и характера генных нарушений у пациентов с патозооспермией; изучение уровня и характера хромосомных нарушений в эмбрионах супружеских пар с одновременным наличием у мужей мутации AZF-локуса хромосомы Y и полиморфизма гена CFTR.
Материал и методы. Обследованы 380 супружеских пар с мужским фактором бесплодия, которые нуждались в проведении программы ЭКО/ИКСИ. Всем мужчинам произведен спермиологический анализ эякулята и молекулярно-генетический анализ для выявления генных нарушений. У двух супружеских пар с первичным бесплодием, нормальным кариотипом, с выявленной у мужей азооспермией и астенотератозооспермией и одновременным наличием мутации в локусе AZFc хромосомы Y и полиморфизма гена CFTR (аллель 5Т) была проведена преимплантационная диагностика (ПД) FISH методом с выбором пола эмбрионов. Для FISH исследования ядер бластомеров эмбрионов использовали зонды фирмы Abbott на хромосомы Х, Y, 13, 18, 21.
Результаты исследования. У мужчин с патозооспермией мутации и полиморфизм гена CFTR были выявлены в 12,6%, из них аллель 5Т составил 79% случаев; микроделеции в AZF-локусе хромосомы Y были выявлены в 14,2%, из них микроделеция субрегиона AZFc – del sY 1192 – составила 59,6% случаев. ПД эмбрионов супружеских пар с одновременным наличием у мужей мутации AZF-локуса хромосомы Y и полиморфизма гена CFTR показала, что 41,2% исследованных эмбрионов имеют анеуплоидии по половым хромосомам, 36,4% эмбрионов имеют анеуплоидии по аутосомам 13, 18, 21 (по одной или нескольким хромосомам).
Заключение. У мужчин с патозооспермией отмечается высокая частота генных нарушений; эти пациенты составляют группу риска по рождению больного ребенка. Мужчины с патозооспермией и одновременным наличием мутации AZF-локуса хромосомы Y и полиморфизма гена CFTR могут не только передать имеющиеся мутации потомству, но и входят в группу риска по рождению ребенка с анеуплоидией по различным хромосомам.

По данным статистики, примерно 15% супружеских пар в популяции бесплодны, причем на
долю мужского фактора бесплодия приходится 50% случаев [11].

Главными генетическими причинами мужского бесплодия, сопряженного с тяжелыми
формами патозооспермии, являются делеции AZF-локуса хромосомы Y (фактор азооспермии) и мутации гена трансмембранного регулятора муковисцидоза (CFTR – cystic fibrosis transmembrane conductase regulator) [1, 3, 7]. По различным данным общая распространенность мутации AZF-локуса хромосомы Y среди мужчин с выраженными отклонениями в показателях спермограммы составляет 3,2–12,2%, при этом микроделеции значительно чаще выявляются при необструктивной азооспермии [1, 2, 5, 6, 7].

AZF-локус расположен в длинном плече хромосомы Y – Yq11 и разделен на 4 неперекрывающиеся области – AZFa, AZFb, AZFc и AZFd субрегионы [11]. Наиболее часто микроделеции определяются в AZFc субрегионе, их доля составляет 65–70% от всех полных AZF делеций [2, 5, 6, 7]. Среди мужчин с обструктивной азооспермией вследствие врожденного одностороннего или двустороннего отсутствия семявыносящих протоков и при секреторной азооспермии мутации в гене CFTR встречаются значительно чаще, чем в общей популяции и могут достигать 70% [1, 13]. Самой распространенной мутацией в гене CFTR является F508del и полиморфизм – аллель 5Т [4, 7, 12].

R. Tomaiuolo и соав. выявили, что белок, экспрессируемый геном CFTR, принимает участие
как в процессе сперматогенеза, так и в функционировании маточных труб. Было сделано предположение, что полиморфизм этого же гена может приводить к развитию выраженной олигозооспермии у мужчин и трубному бесплодию у женщин [13].

В настоящее время благодаря разработке и широкому внедрению в клиническую практику таких микроманипуляционных методик, как TESA и ИКСИ, мужчины с тяжелой патозооспермией, ранее обреченные на бесплодие, могут иметь потомство. Однако мутации, имеющиеся в генотипе родителей, могут передаваться будущему потомству через гаметы при проведении программы ЭКО/ИКСИ, в результате чего могут образоваться генетически неполноценные эмбрионы [6].

Данные многочисленных исследований указывают на возможность передачи мутации AZF-локуса хромосомы Y от отца сыну, что впоследствии может привести к бесплодию у потомства. В литературе описаны случаи возникновения de novo микроделеции хромосомы Y у потомства
мужского пола, полученного в программе ЭКО/ИКСИ [6, 8]. Некоторые авторы связывают возникновение у потомства de novo делеций AZF-локуса хромосомы Y с мозаицизмом этой мутации
в сперматозоидах у отцов. Возможность передачи поврежденной хромосомы Y сыновьям зависит от
соотношения уровней сперматозоидов с мутацией и без [8].

Ряд исследователей при проведении FISH-анализа ядер сперматозоидов мужчин с ...

Беляева Н.А., Глинкина Ж.И., Сокур С.А., Губаева З.М., Долгушина Н.В., Калинина Е.А.