Проблемы подготовки вакцинных штаммов живой гриппозной вакцины на основе потенциально пандемических вирусов гриппа

Цель исследования. Представлены достигнутые на настоящий момент результаты поисков безопасного пути получения in ovo вакцинных штаммов для живой гриппозной вакцины на основе вирусов с пандемическим потенциалом H5N1.
Материалы и методы. В качестве источника антигенных детерминант использовали штаммы-кандидаты для получения инактивированной гриппозной вакцины H5N1, содержащие 6 внутренних генов от вируса A/Puerto Rico/8/34 (H1N1) (PR8). Гены вируса PR8 путем реассортации заменяли на соответствующие сегменты генома донора аттенуации отечественной живой гриппозной вакцины
A/Ленинград/134/17/57 (H2N2).
Результаты. При использовании метода классической реассортации in ovo была обнаружена прочная связь между сегментами генома, кодирующими белки NA и PB2, наследуемыми реассортантами строго совместно от одного из родительских вирусов. Были получены температурочувствительные и холодоустойчивые реассортантные штаммы с формулой генома 7:1, которые унаследовали от вирусов гриппа птиц только ген НА, а все остальные гены – от донора аттенуации.
Заключение. Несмотря на то что нам не удалось получить реассортантные штаммы с классической вакцинной формулой генома 6:2, мы полагаем, что реассортантные штаммы с формулой генома 7:1, подготовленные нами на основе высокопатогенных вирусов гриппа птиц, в случае наступления пандемической ситуации могут служить основой для производства живой гриппозной вакцины против пандемически опасного птичьего гриппа A (H5N1).

Вирус гриппа ежегодно поражает до 20% населения земного шара и вызывает до 1 млн случаев с летальным исходом. Особенно велика смертность в группах риска – среди детей, пожилых людей, беременных женщин и людей с ослабленной иммунной системой. Серьезной угрозой для человечества являются пандемии гриппа, которые происходят в среднем 3–4 раза в столетие и характеризуются очень быстрым распространением и захватом целых континентов или всего земного шара, с процентом заболеваемости, значительно превышающим обычный, и высокой летальностью во всех группах населения. Так, в 2009 г. в циркуляции появился новый вирус гриппа сероподтипа H1N1 (A/California/07/2009), который быстро распространился по всему миру и вызвал первую пандемию ХХI века. Штамм, безусловно относящийся к сероподтипу H1N1, тем не менее значительно отличался по молекулярной структуре от циркулировавших ранее сезонных вирусов. В связи с этим возникла необходимость срочной вакцинации всех слоев населения.

Сегодня, наряду с уже повсеместно циркулирующим калифорнийским штаммом А (H1N1), потенциальную угрозу пандемии несут высокопатогенные вирусы гриппа птиц, которые преодолели видовой барьер и могут передаваться от птиц к человеку. В дальнейшем могут произойти новые генетические изменения, которые позволят вирусам данного сероподтипа передаваться непосредственно от человека к человеку. Поэтому возникла насущная необходимость подготовки резервных вакцинных штаммов против птичьего гриппа, которые необходимо иметь на случай неожиданного появления в циркуляции вирусов гриппа, подобных птичьим.

Вакцинопрофилактика как живыми (ЖГВ), так и инактивированными (ИГВ) вакцинами остается основным средством борьбы с гриппом. В последние годы интерес к живой гриппозной холодоадаптированной (ХА) реассортантной вакцине значительно возрос. Отчасти это связано с тем, что Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) признала преимущества применения ЖГВ по сравнению с ИГВ в случае наступления пандемической ситуации [1]. Основной задачей, поставленной ВОЗ в глобальном плане подготовки к борьбе с гриппом и защиты от пандемий, является создание коллекции вакцинных штаммов против пандемически потенциально опасных вирусов, которые, в случае наступления пандемической ситуации, могут быть немедленно востребованы для производства [2]. Поэтому обеспечение населения России собственной ЖГВ против потенциально опасных вирусов гриппа имеет важное стратегическое значение.

Современные ЖГВ представляют собой аттенуированные штаммы вирусов гриппа, полученные методом генетической реассортации актуального циркулирующего вируса гриппа с безвредным для человека ХА штаммом устаревшей антигенной структуры – донором аттенуации. Вакцинные штаммы являются так называемыми 6:2 реассортантами, содержащими 2 поверхностных антигена – гемагглютинин (HA) и нейраминидазу (NA) от актуальных вирусов гриппа A (H1N1), A (H3N2) и В. 6 генов, кодирующих внутренние белки, наследуются от доноров аттенуации. В мире лицензированы 2 реассортантные ЖГВ – отечественная вакцина и «FluMist» (США). Отдел вирусологии НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН (Санкт–Петербург) является единственным в России структурным...

Баженова Е.А., Ларионова Н.В., Федорова Е.А., Дубровина И.А., Киселева И.В., Руденко Л.Г.