Профиль экспрессии плацентарных микроРНК – регуляторов окислительного стресса при синдроме задержки роста плода

Цель исследования. Оценить профиль дифференциально экспрессирующихся микроРНК, ассоциированных с окислительным стрессом и дисфункцией сосудов плаценты, при синдроме задержки роста плода (ЗРП).
Материал и методы. В группах беременных с ранней и поздней ЗРП, контрольных группах соответствующего срока оценена экспрессия микроРНК: miR-16-5p, miR-26b-5p, miR-100-5p, miR-125b-5p, miR-146a-5p, miR-182-5p, miR-199a-5p, miR-221-3p, miR-451a и miR-574-3p в плацентарной ткани методом количественной ОТ-ПЦР в реальном времени.
Результаты. В ткани плаценты у беременных с ЗРП выявлены достоверные изменения уровней экспрессии микроРНК: при ранней ЗРП – miR-125b-5p, miR-221-3p, miR-451a и miR-574-3р, при поздней ЗРП – miR-451a и miR-574-3р, играющих важную роль в регуляции окислительного стресса. В соответствии с базой данных DAVID v.6.8 определены потенциальные мишени вышеуказанных микроРНК, которые детерминированы в качестве ключевых участников ряда биологических путей: TGFβ-, TNFα-, VEGF-, HIF1α-, FOXО-, MAPK- сигнальные пути.
Заключение. Оценка экспрессии тканевых микроРНК, регулирующих сбалансированную работу генов про- и антиоксидантной системы, позволяет в дальнейшем определить их диагностический потенциал в плазме пуповинной крови и крови беременных с ЗРП.

Внутриутробная задержка роста плода (ЗРП) – наиболее распространенное осложнение, затрагивающее до 5–10% беременностей. Одной из основных причин ее возникновения является плацентарная недостаточность, которая обусловлена метаболическими и гемодинамическими расстройствами в функциональной системе «мать-плацента-плод», вследствие чего снижается поступление питательных веществ и кислорода, приводящее к нарушению соматического роста плода [1, 2]. Данное нарушение можно оценивать количественно – вес плода меньше 10-го процентиля для соответствующего гестационного возраста в сочетании с ультразвуковыми признаками ЗРП и аномальными допплерометрическими показателями в пупочной и средне-мозговой артериях [1]. У маловесных плодов в четыре раза повышен риск: 1) перинатальной смертности; 2) развития респираторного дистресс-синдрома и некротизирующего энтероколита; 3) неблагоприятных неврологических исходов, связанных с нарушением объема и миелинизацией церебральных структур мозга [2, 3].

Механизмы, лежащие в основе ЗРП, изучены недостаточно, поскольку данная патология полиэтиологична. К основным факторам развития ЗРП относятся: 1) фетальный фактор (генетические и хромосомные аномалии); 2) плацентарный (нарушение процессов имплантации и плацентации); 3) материнский фактор (сосудистые заболевания, гипоксия, дефицит питания, воздействие токсинов и инфекционных агентов) [1]. Существенную роль в запуске патологических реакций, приводящих к гестационным осложнениям, в том числе к ЗРП, играет окислительный стресс (ОС), представляющий собой нарушение баланса в системах свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты [4]. ОС, возникающий вследствие плацентарной ишемии/реоксигенации, обусловленной материнско-плодовой сосудистой мальперфузией, оказывает высокотоксичные эффекты при образовании пероксидов и свободных радикалов, приводящие к структурным повреждениям клеток и тканей организма [4]. Активные формы кислорода оказывают влияние на экспрессию плацентарного (PLGF) и эндотелиального факторов роста (VEGF), а повышенная генерация супероксида и оксида азота с образованием пероксинитрита приводит к сосудистой дисфункции [5].

Возрастающий интерес к исследованию малых некодирующих РНК – микроРНК (мкРНК), выступающих в роли модуляторов значительного числа биологических процессов, открывает новые возможности понимания патогенеза нарушений, связанных с плацентарной недостаточностью. В частности, идентифицированы мкРНК (miR-518b, miR-1323, miR-516b, miR-515-5p, miR-520h, miR-519d и miR-526b), экспрессия которых снижена при ЗРП [6, 7]. Показано участие членов семейства miR-200, miR-21, miR-23a/b в сосудистой дисфункции, опосредованной ОС [7, 8], а miR-210 является индикатором гипоксии и ключевым участником в митохондриальном метаболизме, поскольку ее повышенная экспрессия способствует образованию активных форм кислорода [7, 9]. Следует отметить, что большинство проводимых исследований по экспрессии мкРНК при гестационных патологиях, патогенез которых обусловлен, в том числе, ОС, были сосредоточены, в основном, на преэклампсии. Так, в ряде работ представлены дифференциально экспрессирующиеся мкРНК, ассоциированные с ОС, а именно: miR-1, miR-16, miR-20a, miR-26b, miR-29b, miR-126-3р, miR-144-3р, miR-146b-5р, miR-155, miR-181, miR-182, miR-195, miR-204, miR-210, miR-335 и miR-451а [7, 10, 11]. В связи с чем, в настоящей работе была оценена экспрессия мкРНК, как регулирующих работу антиоксидантных ферментов, так и модулирующих производство активных форм кислорода при ранней и поздней ЗРП.

Материал и методы исследования

Формирование клинических групп пациентов

В исследование были включены беременные, находившиеся под наблюдением в Национальном медицинском исследовательском центре акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава РФ. Общая выборка из 32 пациенток репродуктивного возраста была разделена на 4 группы: 1) группу с ранней ЗРП составили беременные, родоразрешение которых было проведено до 34 недели гестации (n=7); 2) в группу с поздней ЗРП вошли беременные, родоразрешение которых было проведено после 34 недели гестации (n=6); 3) и 4) контрольные группы, соответствующие основным группам по срокам гестации (7 беременных с преждев...

Гусар В.А., Тимофеева А.В., Кан Н.Е., Чаговец В.В., Ганичкина М.Б., Франкевич В.Е.