Прогностическая значимость определения внеклеточной фетальной ДНК в плазме крови при задержке роста плода

Цель. Изучить взаимосвязь изменения уровня внеклеточной фетальной ДНК (вфДНК) с морфологическими особенностями плаценты при задержке роста плода (ЗРП) с определением ее прогностической значимости. Материалы и методы. Обследованы 93 беременные. Основную группу (I) составили 48 беременных с ЗРП (23 – с ранней и 25 – поздней формой), а группу II (сравнения) – 45 пациенток, у которых беременность протекала без осложнений. Изучены клинико-анамнестические данные, особенности течения беременностей и родоразрешения, а также состояние плодов и новорожденных. Специальные методы исследования включали полимеразную цепную реакцию в режиме реального времени с целью определения вфДНК в плазме материнской крови, гистохимическое исследование c применением метода терминального дезоксиуридинового мечения концов (TUNEL) и иммунофлуоресцентный анализ для исследования плацент. Результаты. Уровень вфДНК при ранней форме ЗРП составил 89,03 (44,52;178,32) ГЕ/мл и был статистически значимо ниже показателей при поздней форме ЗРП – 244,14 (145,23;422,47) ГЕ/мл и группы сравнения – 211,05 (133,64;567,81) ГЕ/мл (p<0,001). При проведении ROC-анализа установлено, что измерение концентрации вфДНК в плазме материнской крови при ее пороговом значении 119,11 ГЕ/мл позволяет с высокой чувствительностью (73,1%) и специфичностью (79,3%) (AUC=0,81; 95% ДИ 0,63–0,98) диагностировать раннюю форму ЗРП и предсказывать вероятность развития осложнений у новорожденных. Обнаруженные особенности архитектоники плаценты в виде преобладания процессов фиброза и формирования обширных зон фибриноида, с одной стороны, объясняют снижение уровня вфДНК, с другой – обосновывают развитие плацентарной перфузии и, как следствие, – формирование ЗРП. Подтверждена взаимосвязь между низким уровнем вфДНК и риском рождения детей с задержкой роста. Также установлено наличие сильной прямой корреляционной связи между уровнем вфДНК, массой (r=0,72; p<0,001) и длиной (r=0,71; p<0,001) новорожденных в случаях ранней формы ЗРП. Заключение. Установлены диагностически значимые уровни вфДНК, позволяющие верифицировать формы ЗРП и свидетельствующие о различных механизмах их формирования. Определение вфДНК позволяет прогнозировать риск рождения детей с низкими массо-ростовыми показателями. Полученные данные о высокой диагностической значимости вфДНК в отношении ранней формы ЗРП обосновывают перспективность применения вфДНК в качестве прогностического маркера.

В настоящее время задержка роста плода (ЗРП) остается одной из актуальных проблем современного акушерства, а ее частота не имеет тенденции к снижению, составляя 5–18% [1–3]. Несмотря на вариацию частоты ЗРП среди различных популяций, согласно эпидемиологическим исследованиям, она ассоциирована с неизменно высокой перинатальной заболеваемостью и смертностью. Вместе с тем отсутствие единой системы прогностических и диагностических критериев ЗРП приводит к недостаточной эффективности ее антенатального выявления [4–6].

В последние годы перспективным неинвазивным маркером для прогнозирования и своевременной диагностики различных осложнений беременности является изучение внеклеточной фетальной ДНК (вфДНК), выделение которой в материнский кровоток происходит преимущественно за счет процессов дифференцировки трофобласта [7–9]. Особое значение отводится определению данного маркера при ЗРП, так как последняя относится к плацента-ассоциированным осложнениям беременности [10, 11]. Концепция о плацентарном происхождении вфДНК является общепринятой и находит подтверждение во многих исследованиях [12–15]. К основным механизмам ее происхождения в настоящее время относят, помимо апоптоза, сопровождающего нормальное развитие плаценты, высвобождение вфДНК в материнский кровоток за счет процессов некроза и апонекроза клеток, прямого переноса ДНК через плаценту или амниотические оболочки [16, 17]. Среди причин изменения ее содержания указывают как усиление процессов высвобождения нуклеиновых кислот в материнский кровоток, так и снижение их клиренса. Проведенные исследования по изучению вфДНК при ЗРП неоднозначны и часто противоречивы.

Так, D. Morano et al. [18] установили различия в содержании вфДНК при ранней и поздней формах ЗРП и получили взаимосвязь низких концентраций вфДНК с малой массой плаценты и плацентарной недостаточностью. Вместе с тем до настоящего времени открытым остается вопрос о причинах изменения содержания вфДНК при данном осложнении беременности.

Таким образом, интерес представляет определение прогностической и диагностической значимости вфДНК при ЗРП с изучением взаимосвязи с морфологическими особенностями плаценты, что позволит не только уточнить механизмы развития данного осложнения беременности, но и выделить новый неинвазивный маркер.

Цель исследования: изучить взаимосвязь изменения уровня вфДНК с морфологическими особенностями плаценты при ЗРП с определением ее прогностической значимости.

Материалы и методы

Согласно критериям включения и невключения, в исследование вошли 93 беременные. Из них основную группу (I) составили 48 беременных с ЗРП (23 – с ранней и 25 – с поздней формой), а группу II (сравнения) – 45 пациенток, у которых беременность протекала без осложнений.

Критериями включения в исследование для обеих групп являлись возраст пациенток от 18 до 45 лет, одноплодная беременность в сроке 22–40 недель, наличие добровольного информированного согласия, одобренного...

Кан Н.Е., Тютюнник В.Л., Хачатрян З.В., Садекова А.А., Красный А.М.