Прогнозирование и диагностика тяжелых форм плацентарной недостаточности

Цель исследования. Оценить прогностические и диагностические возможности маркеров эндотелиальной дисфункции, децидуализации, апоптоза и клеточной пролиферации в отношении реализации тяжелых форм плацентарной недостаточности (ПН).
Материал и методы. В динамике II и III триместров беременности обследованы 154 женщины группы высокого риска развития тяжелых форм ПН, контрольная группа – 30 здоровых беременных. Применяли клинические, иммунологические, инструментальные методы исследования.
Результаты исследования. Во II триместре беременности прогностически значимыми критериями в отношении декомпенсированной ПН являются: повышение уровня индекса цитотоксичности антиэндотелиальных антител до 36,9±4,2%, общего иммуноглобулина E – до 351±18 нг/мл, плацентарного альфа-1-микроглобулина – до 74,7±6,5 нг/мл, лимфоцитов, экспрессирующих Fas/APO-1/CD 95-рецептор – до 48,3±3,2%, фактора некроза опухоли-α – до 202±18 пкг/мл, понижение сывороточной концентрации фактора роста плаценты – до 248±13 пкг/мл.
Заключение. Прогнозирование и ранняя диагностика тяжелых форм ПН может осуществляться с применением мониторинга содержания в крови маркеров эндотелиальной дисфункции, плацентарных белков материнской оболочки плаценты, апоптоза и клеточной пролиферации.

Исследования последних лет показали, что единственным реальным путем профилактики тяжелых осложнений гестации, перинатальной патологии и смертности является своевременное прогнозирование, ранняя диагностика и коррекция патологического течения беременности [5, 12].

Согласно современным представлениям, в формировании и функционировании фетоплацентарного комплекса важная роль отводится оптимальному влиянию взаимозависимых ангиогенных факторов, факторов роста и запрограммированной клеточной гибели в плаценте [3, 15]. Для разработки новых подходов к прогнозированию и диагностике плацентарной недостаточности (ПН) и степени ее тяжести, основанных на комплексной динамической оценке эндотелиальной дисфункции, децидуализации стромальных клеток, клеточной пролиферации и апоптоза, нами проведено проспективное обследование беременных женщин группы высокого риска по реализации тяжелых форм ПН в динамике гестации с последующим ретроспективным анализом полученных данных с учетом клинического течения беременности, перинатальных исходов и результатов морфологического исследования последа.

Целью исследования являлась оценка прогностических и диагностических возможностей маркеров эндотелиальной дисфункции, децидуализации, апоптоза и клеточной пролиферации в отношении реализации тяжелых форм ПН.

Материал и методы исследования

Для решения поставленной цели с применением ранее разработанной прогностической шкалы факторов риска развития тяжелых форм ПН [4] была сформирована группа наблюдения, состоящая из 154 беременных женщин, которым в сроки 18–24 нед и 28–38 нед гестации проведено определение в крови содержания следующих маркеров эндотелиальной дисфункции (МЭД):

· индекса цитотоксичности антиэндотелиальных антител (ИЦ АЭАТ) по технике перекрестной пробы с моноцитами [18];
· уровня общего иммуноглобулина Е (IgE) [7];
· маркера децидуализации стромальных клеток (МД) – плацентарного альфа-1-микроглобулина
(ПАМГ) [9];
· маркеров апоптоза (МА) – лимфоцитов с фенотипом CD95+ FasR (CD95) [13, 17];
· фактора некроза опухоли-α (ФНО-α) [15, 19];
· маркера клеточной пролиферации – фактора роста плаценты (ФРП )[1].

Уровень перекрестных антител к моноцитам и эндотелиальным клеткам (АЭАТ) в сыворотке крови беременных определялся по стандарту Национального института аллергии и инфекционных заболеваний (США) – технике перекрестной пробы. Цитотоксическое действие сыворотки (ИЦ АЭАТ) оценивали по следующей шкале: до 10% разрушенных клеток – результат отрицательный, 10–20% – слабоположительный, 20–50% – положительный, 50–100% – резко положительный [18]. Идентификацию лимфоцитов с фенотипом СД95+ осуществляли стандартным методом иммунофлуоресцентного анализа с использованием моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов человека, меченных FITS Fab- фрагментами антимышиных иммуноглобулинов. Относительное число СД95+ лимфоцитов определяли на проточном цитометре Becton Dickinson FACS Calibur. Уровни общего IgE, ПАМГ, ФНО-α и ФРП в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа с применением наборов реагентов [14]. Гистологические срезы плацент изучали светооптически и телеметрически с помощью видеокамеры ССД КОСОМ КСС-310РД и светового микроскопа Nicon ALPHAPHOT-2 YS2-H (Япония). Всем беременным в динамике гестации проводили ультразвуковое исследование (УЗИ) по трансабдоминальной методике на аппарате «Philips Tangens» с цветовым допплеровским картированием [16].

Ретроспективно с учетом клинического течения беременности из 154 женщин были сформированы две группы сравнения: I группа – 109 женщин с ПН; II группа – 45 женщин с ПН в сочетании с гестозом и экстрагенитальной патологией. Во II группе сравнения гестоз диагностирован в 100% случаев: легкой степени – у 40 (88,9%) беременных; средней степени – у 5 (11,1%) беременных, причем сочетанный гестоз имел место у 31 (68,9%) женщины. Фоновые экстрагенитальные заболевания были представлены хроническим пиелонефритом – 6 (13,3%) случаев, нейро-циркуляторной дистонией по гипертоническому и смешанному типам – 14 (31,1%), гипертонической болезнью – 3 (6,7%), сахарным диабетом – 2 (4,4%), хроническим бронхитом – 6 (13,3%).

Контрольную группу (III группа) составили 30 здоровых беременных женщин, обследованных в сроки, аналогичные таковым в I и II группах сравнения. Для диагностики ПН в период гестации использовали алгоритм обследования, включающий УЗИ фетоплацентарного комплекса, ультразвуковую допплерографию (УЗДГ) кровотоков в маточных артериях и артерии пуповины, кардиотокографию (КТГ), результаты клинического обследования [16]. Ретроспективно уровни МЭД, МД, МА, ФРП в крови сопоставляли со степенью тяжести ПН (компенсированная – КПН, субкомпенсированная – СПН, декомпенсированная – ДПН), верифицированной морфологическим исследованием плаценты с учетом критериев, разработанных А.П. Миловановым [6]. При гистологическом исследовании оценивали вариант нарушения созревания ворсин; выраженность компенсаторных реакций; выраженность инволюционно-дистрофических и циркуляторных измене...

Тезиков Ю.В., Липатов И.С.