Провоспалительный профиль экспресcии генов врожденного иммунитета в слизистой влагалища как предиктор исхода программы ЭКО и ПЭ

Цель исследования. Определение клинической значимости экспрессионного профиля клеток слизистой оболочки влагалища, как предиктора исхода программы экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).
Материал и методы. В исследование были включены 67 пациенток с трубно-перитонеальным фактором бесплодия. В зависимости от исходов программы ЭКО пациентки были разделены на две группы: I – (n=30) – женщины, у которых наступила «биохимическая» беременность (имплантация), II – (n=37) – пациентки с отрицательным результатом. Забор биологического материала (соскоб отделяемого слизистой оболочки влагалища) проводили в день переноса эмбриона в полость матки. Была проанализирована экспрессия мРНК 13 генов: 6 цитокинов (IL1β, IL8, IL10, IL18, TNFα, TGFβ1), 3 транскрипционных факторов (TBX21, GATA3, RORC2), 2 толл-подобных рецепторов (TLR2, TLR4) и 2 поверхностных маркеров клеток иммунной системы (CD45, CD68).
Результаты. Среди пациенток, у которых наступила имплантация статистически значимо реже наблюдали экспрессионный профиль, соответствующий локальному воспалению (16,7% против 43,2%). Для успешной имплантации отношение шансов составило 0,26 (0,08-0,82, p=0,02) при наличии молекулярно-генетических признаков локального воспаления.
Заключение. Локальная воспалительная реакция является неблагоприятным прогностическим критерием для имплантации в программе ЭКО. Исследование профиля экспрессии генов цитокинов в слизистой влагалища является перспективным направлением неивазивной диагностики и может быть использовано для индивидуализации тактики ведения пациенток в программе ЭКО.

Неудачи имплантации в настоящее время остаются одним из лимитирующих факторов в эффективности программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Процесс имплантации зависит от наличия здорового эмбриона и рецептивного эндометрий, также важен продуктивный молекулярный «диалог» между этими составляющими. Эндометрий является восприимчивым для имплантации эмбриона достаточно короткий промежуток времени (1–3 дня) в середине лютеиновой фазы нормального овуляторного цикла, называемый окном имплантации, продолжительность которого определяется половыми стероидными гормонами, регулирующими экспрессию локально действующих факторов роста, транскрипционных факторов, молекул адгезии, цитокинов и хемокинов [1].

Основными продуцентами цитокинов являются иммунокомпетентные клетки, локализованные во всех органах генитального тракта женщины [2, 3]. Немалый вклад в синтез цитокинов вносят и клетки эпителия, выстилающего влагалище, шейку и собственно полость матки. Данный тип клеток выполняет не просто барьерную функцию, а представляет собой динамические иммунные клетки, которые могут играть основополагающую роль в определении иммунологического окружения генитального тракта [4].

Для успешной имплантации эмбриона и его развития на ранних сроках беременности необходимо наличие цитокинов, обладающих противовоспалительной/иммуносупрессорной активностью. Учитывая эффект плейотропного действия цитокинов, наличие воспалительных заболеваний в нижних отделах репродуктивной системы приводит к снижению вероятности имплантации эмбриона [2, 3].

Применяемый в рутинной практике метод микроскопии мазка с подсчетом числа лейкоцитов является достаточно субъективным и не может в полной мере отражать многогранность локального иммунного ответа.

Изучение профиля экспрессии мРНК ряда генов иммунной системы в соскобах эпителиальных клеток позволяет охарактеризовать состояние локального иммунитета слизистой влагалища в тот или иной момент времени [5], что может оказаться информативным для прогностической оценки эффективности программ ЭКО.

Материал и методы исследования

Нами было проведено проспективное клиническое исследование случай – контроль женщин репродуктивного возраста, проходивших лечение методом ЭКО и переноса эмбрионов в отделении вспомогательных технологий в лечении бесплодия ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава Росси.

В исследование были включены 67 женщин с бесплодием. Критериями включения в исследование были: возраст женщин от 18 до 42 лет, трубно-перитонеальный фактор бесплодия, регулярный менструальный цикл, сохраненный овариальный резерв, отсутствие патологии эндометрия по данным ультразвукового исследования, фертильная или субфертильная сперма супругов, наличие информированного согласия на проведение исследования. Исследование одобрено этическим комитетом НЦАГиП (протокол № 19 от 2.03.2012). Критериями исключения являлись: бесплодие, обусловленное иммунологическим фактором (наличие антиспермальных антител), миома матки любых размеров, острые воспалительные заболевания органов малого таза, олигоастенотератозооспермия III и IV степени (по нормативам ВОЗ, 2010 г.), пороки развития внутренних половых органов, cоматические и психические заболевания, являющиеся противопоказанием для вынашивания беременности и родов. Всем пациенткам проводили стандартное клинико-лабораторное обследование в соответствии с приказом Минздрава России №107н от 30 августа 2012 г. «О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказани...

Хачатурян Д.А., Смольникова В.Ю., Бурменская О.В., Донников А.Е., Непша О.С.