Распределение по подклассам IgG и патогенетическая активность аутоантител к хорионическому гонадотропину человека при нарушениях репродуктивной функции у женщин

Цель исследования. Изучение распределения по подклассам IgG и авидности аутоантител к хорионическому гонадотропину человека (анти‑ХГЧ) у женщин с нарушениями репродуктивной функции для оценки их патогенетической активности.
Материал и методы. Исследуемую группу составляли 83 женщины с анти‑ХГЧ IgG, из них 46 (55,4%) — с невынашиванием беременности, 25 (30,1%) ‑ с бесплодием в анамнезе. В сыворотке крови определяли анти‑ХГЧ, подклассы IgG (1‑4), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК‑C1q, ЦИК‑C3d) с помощью иммуноферментного анализа.
Результаты исследования. В исследуемой группе наиболее часто выявлялись анти‑ХГЧ IgG1, IgG2 и IgG4 подклассов с высоким индексом авидности, наблюдались разные спектры подклассов IgG. По частоте выявления преобладали IgG1 – у 66 (79,5%). У женщин с невынашиванием и угрозой прерывания беременности в I триместре после применения вспомогательных репродуктивных технологий при бесплодии достоверно чаще выявлялись высокоавидные IgG1 и/или IgG2. Предполагается, что механизмы иммунопатогенеза при продукции анти‑ХГЧ включают в себя активацию системы комплемента и эффекторных клеток.
Заключение. Оценка патогенетической активности анти‑ХГЧ на основе определения авидности и подклассов IgG может иметь практическое значение для прогнозирования течения беременности и развития нарушений репродуктивной функции.

Изучение аутоиммунных механизмов развития нарушений репродуктивной функции у женщин представляет большой научный и практический интерес для акушерства и гинекологии. В настоящее время создаются новые диагностические системы для выявления продукции аутоантител к мишеневым антигенам репродуктивной и эндокринной систем, среди которых гонадотропины и их рецепторы, стероидпродуцирующие клетки и стероидогенные ферменты [3, 7, 10, 11].

За последние 10 лет получены новые данные о важной физиологической функции хорионического гонадотропина человека (ХГЧ) в репродуктивной системе [4, 8, 18]. Как известно, ХГЧ относится к семейству гликопротеиновых гормонов. Около 25–30% молекулярной массы ХГЧ составляют углеводы. На ранних сроках беременности инвазивными клетками цитотрофобласта продуцируется гипергликозилированный ХГЧ (гХГЧ), содействующий инвазии при имплантации эмбриона и становлении плацентации. Позже в синцитиотрофобласте образуется обычный ХГЧ, который способствует слиянию клеток цитотрофобласта в синцитиотрофобласт, поддерживает плацентацию и ангиогенез спиральных артерий миометрия [8, 18].

Имеются данные о возможности продукции высокоаффинных антител как к экзогенному, так и к эндогенному ХГЧ, способных нейтрализовать биологическую активность гормона in vitro и in vivo [6, 13, 17]. Установлено, что антитела, направленные к определенным антигенным эпитопам ХГЧ, способны узнавать рецептор и нейтрализовать его взаимодействие с гормоном [16].

Антитела к ХГЧ (анти-ХГЧ) рассматриваются как возможная причина невынашивания беременности и бесплодия [2, 6]. Течение беременности при наличии анти-ХГЧ характеризуется высокой частотой угрозы прерывания на ранних сроках гестации, развитием хронической формы синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания, плацентарной недостаточности [1, 2]. Спектр анти-ХГЧ представлен антителами, взаимодействующими как с цельной молекулой ХГЧ, так и с ее отдельными α- и β- субъединицами [3].

Кроме выявления антигенной направленности, важное клиническое значение имеет определение авидности и подклассов IgG, характеризующихся уникальными структурными и функциональными свойствами. Как известно, подклассы IgG имеют биологически важные функциональные различия по способности активировать систему комплемента, связыванию с поверхностными клеточными Fcγ-рецепторами, блокирующей активности, возможности проникновения через плацентарный барьер [12, 15]. Определение подкласса специфических антител дает возможность оценить их патогенетическую активность.

В связи с этим целью настоящего исследования было изучение распределения по подклассам и авидности IgG аутоантител к ХГЧ у женщин с нарушениями репродуктивной функции.

Материал и методы исследования

Женщины с нарушениями репродуктивной функции, обратившиеся в Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова, прошли клиническое и лабораторно-инструментальное обследование. Иммунологические исследования включали определение анти-ХГЧ и циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Анти-ХГЧ определяли с использованием полистирольных микропланшетов (Nunc, Дания) с ХГЧ, иммобилизованным посредством мышиных моноклональных антител к α-субъединице ХГЧ [3].

Для определения подклассов IgG образцы сывороток крови исследовали в разведении 1:100 в дуб-лях. Конъюгаты мышиных моноклональных антител с биотином к IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 человека (Sigma-Aldrich Co., США) использовали в разведениях 1:4000, 1:15 000, 1:5000, 1:12 000; конъюгат стрептавидина с пероксидазой хрена (Sigma-Aldrich Co.) – в разведении 1:2000. Инкубацию проводили на встряхивателе при 20±2˚С в течение 1 ч, с конъюгатом стрептавидина — в течение 30 мин. Измерение оптической плотности (ОП) выполняли на фотометре MULTISKAN EX (Thermo Electron Co., Финляндия) при длине волны 450 нм. Результат считали положительным, если средняя ОП исследуемого образца сыворотки крови превышала более чем на три стандартных отклонения среднюю ОП, полученную в контрольной группе у здоровых фертильных женщин (n=30). Сыворотки крови ...

Менжинская И. В.