Распространенность различных генотипов вируса папилломы человека при патологии шейки матки

Цель исследования. Изучение частоты встречаемости, спектра генотипов и нагрузки вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска.
Материал и методы. Проведено молекулярно-биологическое исследование соскобов цервикального канала 773 пациенток амбулаторно-поликлинического приема.
Результаты исследования. ВПЧ высокого риска идентифицирован у 58,2% женщин. Независимо от наличия или отсутствия клинико-морфологических изменений на шейке матки ВПЧ 16-го типа занимает лидирующую позицию. На втором месте по частоте встречаемости у женщин без клинико-морфологических изменений на шейке матки, больных с хроническим цервицитом и цервикальной интраэпителиальной неоплазией (ЦИН) I степени находится ВПЧ 31-го типа и в разном проценте случаев встречаются все другие определяемые типы ВПЧ высокого риска. У больных с ЦИН II–III степени вторую позицию занимает ВПЧ 33-го типа. При ЦИН II степени не обнаружен ВПЧ 51-го типа, а при ЦИН III степени – ВПЧ 59-го типа. У больных с хроническим цервицитом и ЦИН I степени вирусная нагрузка превышала порог прогрессии. По мере углубления морфологических изменений вирусная нагрузка снижалась и у больных с ЦИН II и III степени была в пределах верхней границы значимой концентрации.

Большая частота заболеваний шейки матки и их неблагоприятное влияние на репродуктивное здоровье женщины определяют необходимость совершенствования диагностики и лечения данной патологии. Слизистая оболочка шейки матки как пограничный барьер между верхним отделом генитального тракта и внешней средой постоянно подвергается воздействию повреждающих факторов. Среди последних наиболее агрессивное антигенное воздействие на цервикальный слизистый покров оказывают возбудители инфекций, передающихся половым путем. На фоне генитальной инфекции развиваются воспалительные заболевания шейки матки, которые привлекают пристальное внимание клиницистов, так как могут являться основой малигнизации [7, 16].

На сегодняшний день одной из наиболее распространенных инфекций вирусной этиологии, передающихся половым путем, является папилломавирусная инфекция (ПВИ) [1, 7, 15, 17].
Инфицирование, вызванное вирусом папилломы человека высокого риска (ВПЧ ВР), ассоциировано
с риском возникновения цервикальных неоплазий и инвазивных опухолей [2, 17, 20, 22], а рак шейки
матки (РШМ), согласно данным исследователей, является одной из основных причин смерти молодых женщин [13].

Цель настоящего исследования – изучение распространенности, спектра генотипов и вирусной нагрузки ВПЧ ВР у женщин без клинико-морфологических изменений на шейке матки и при патологии шейки матки.
Š „ ‰
В период 2007–2010 гг. на базе кафедры акушерства и гинекологии №2 и НИИ иммунологии ГОУ ВПО Челябинская государственная медицинская академия Росздрава был проведен лабораторный скрининг на наличие ВПЧ ВР методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) у 773 пациенток женских консультаций МУЗ ГКБ № 8 и МУЗ ГКБ №2 Челябинска, ГЛПУ Челябинский окружной клинический онкологический диспансер. Женщин отбирали методом сплошной выборки по мере обращения. Возраст обследуемых варьировал от 16 до 79 лет, средний возраст составил 32,3±0,42 года.

Диагноз заболевания шейки матки ставили на основании анамнеза, активного выявления жалоб, гинекологического обследования, ультразвукового исследования органов малого таза, цитологического исследования мазков с экзои эндоцервикса с интерпретацией результатов по классификации Папаниколау, простой и расширенной кольпоскопии, по показаниям биопсии шейки матки.

Материалом для молекулярно-биологического исследования служили соскобы эпителиальных клеток цервикального канала, взятые одноразовыми цитощеточками в пробирки, содержащие 500 мкл транспортной среды производства ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии (ЦНИИЭ) Роспотребнадзора (Москва). Для выделения ДНК использовался набор реагентов «ДНК-сорб-АМ» производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора (Москва).

Выявление, количественное определение и дифференциацию 12 наиболее распространенных генотипов ВПЧ ВР (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59-й) проводили методом ПЦР в режиме реального времени с использованием наборов реагентов «АмплиСенс® ВПЧ ВР скрин-титр-FL» и «АмплиСенс® ВПЧ ВР генотип-FL» производства ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора (Москва). Анализ результатов осуществляли автоматически с помощью программ AmpliSens FRT HR HPV Genotype Quant Results Matrix.xls и AmpliSens FRT HR HPV Screen Quant Results Matrix.xls. Концентрация ДНК ВПЧ ВР выражалась в lg ВПЧ на 105 клеток и оценивалась следующим образом: вирусная нагрузка менее 3 lg ВПЧ на 105 клеток – малозначимая, от 3 до 5 lg ВПЧ на 105 клеток – значимая и более 5 lg ВПЧ на 105 клеток – повышенная вирусная нагрузка. Амплификацию и детекцию ДНК ВПЧ ВР проводили на приборе Rotor-Gene 6000 (Corbett Research, Австралия).

Полученные результаты были обработаны общепринятыми методами вариационной статистики с использованием пакета статистических программ Statistica for Windows 6.0. При анализе количественных признаков, представленных в виде средней арифметической и ее стандартной ошибки (М±m), оценку достоверности различий между группами проводили с использованием непараметрического критерия Манна–Уитни. Оценку качественных показателей осуществляли с помощью критерия χ2 и точного критерия Фишера. Различия считались достоверными при p<0,05.

†‹ ‰ŒРезультаты исследования и обсуждение

Результаты лабораторного скрининга показали, что ВПЧ ВР обнаружен у 450 (58,2%) из...

Долгушина В.Ф., Абрамовских О.С.