Растворимые иммунорегуляторные молекулы в периферической крови и перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом

Цель. Оценка содержания растворимых иммунорегуляторных молекул в периферической крови и перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом разной степени распространения.
Материалы и методы. Мультиплексным методом с использованием стандартной 27-плексной тест-системы Bio-Plex Pro Human Cytokine 27-plex Assay (Bio-Rad, США) на проточном лазерном иммуноанализаторе определяли содержание растворимых иммунорегуляторных молекул (IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-15, IL-17A, IFN-g, TNFα, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, IP-10, CSF, GM-CSF, PDGF-bb, RANTES, Eotaxin, VEGF, FGF basic) периферической крови, взятой до хирургической операции, и перитонеальной жидкости, полученной интраоперационно, у женщин с эндометриозом I–II (n=12) и III–IV (n=28) степени распространения. Контрольную группу (К) составили 15 женщин.
Результаты. В периферической крови концентрации определяемых растворимых белков в обеих группах женщин не различались ни между собой, ни с контрольной группой. В перитонеальной жидкости среди цитокинов значимо увеличено содержание IL-6, IL-8, IL-10 и проявилась тенденция к увеличению уровней хемокинов МСР-1 и МIР-1β в обеих группах женщин с эндометриозом по отношению к содержанию в контроле.
Проведена оценка диагностической значимости определения IL-6, IL-8, MIP-1b и МСР-1 в перитонеальной жидкости от степени распространения эндометриоза. Диагностическая значимость увеличения уровней МСР-1 и МIР-1β в перитонеальной жидкости женщин выше для I–II степени, а уровней IL-6 и IL-8 – для III–IV степени распространенности эндометриоза.
Заключение. Изучение баланса про- и противовоспалительных цитокинов выявило в перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом повышенные концентрации как IL-6, так и IL-10, а также в группе женщин с более распространенными стадиями эндометриоза – значимые изменения в соотношении провоспалительного IL-6 к противовоспалительному IL-4 и провоспалительного IL-12р70 к противовоспалительному IL-10. Увеличение уровней хемокинов IL-8, МСР-1 и МIР-1β, активирующих воспаление и влияющих на клеточный рост, отмечено на всех стадиях развития эндометриоза.

Эндометриоз – распространенное гормонозависимое гинекологическое заболевание женщин, характеризующееся ростом подобной эндометрию ткани вне полости матки, диагностируется у 7–10% женщин. Болезненные менструации, дисменорея, диспареуния, боли внизу живота, не связанные с менструацией, часто снижают качество жизни. Кроме того, 35–50% женщин с эндометриозом страдают бесплодием. Патогенез эндометриоза до настоящего времени остается загадочным и полностью не объясняется ни одной из предложенных гипотез. На основании имеющихся в литературе данных можно предположить, что к развитию эндометриоза приводит комплекс патологических изменений, вызываемых генетическими, гормональными, иммунологическими и другими факторами [1–5].

Предполагается, что иммунные факторы могут изменять восприимчивость женского организма, создавая условия для развития эндометриоза. С нарушением регуляции механизма клиренса иммунной системой ткани эндометрия, заброшенной в брюшную полость, связывают предрасположенность к имплантации и росту клеток эндометрия в несвойственном для него микроокружении. Аномальная иммунная реакция на эндометриальные клетки облегчает выживание внематочных эндометриальных тканей и образование эндометриоидных поражений. При этом цитокины и факторы роста играют фундаментальную роль в стимулировании роста и дифференцировки эктопического эндометрия [6, 7].

Увеличивается количество данных, позволяющих предполагать, что развитие эндометриоза связано с воспалительным состоянием органов малого таза, в связи с чем клетки эндометрия подвергаются воздействию повышенных уровней медиаторов воспаления, таких как цитокины, простагландины и факторы роста [8–10].

Цитокины – белковые или полипептидные факторы, которые обеспечивают межклеточные взаимодействия и иммунорегуляцию. К цитокинам относятся интерфероны (IFN), интерлейкины (IL), фактор некроза опухоли (TNF), колониестимулирующие факторы, факторы роста, нейропоэтины, хемокины. Дисрегуляция цитокинов является важным аспектом патогенеза эндометриоза. Дифференциальная экспрессия цитокинов и факторов роста создает микросреду, которая стимулирует имплантацию эндометриальных клеток или защищает их от иммунного клиренса. Значительное увеличение концентрации провоспалительных (IL-6 и IL-1β), а также хемотаксических цитокинов (g-КСФ, CXCL12, CXCL1 и CX3CL1) и ангиогенных факторов (сосудисто-эндотелиальный фактор (VEGF) и IL-8) наблюдалось при стимуляции клеток эндометрия in vitro. Показана важная роль IL-17А в стимулировании ангиогенеза и продукции провоспалительных цитокинов в перитонеальной полости, создающих соответствующее микроокружение и поддерживающих развитие эндометриоидных очагов [9]. В перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом и бесплодием наблюдалось увеличение уровней IL-6, которые положительно коррелировали с размером и числом эндометриоидных поражений [11].

Однако роль иммунологических факторов в патогенезе эндометриоза все еще не до конца выяснена; поэтому многие исследователи пытаются ответить на вопрос о том, какие факторы, врожденные или приобретенные, влияют на предрасположенность и способствуют или препятствуют выживанию, имплантации и пролиферации эндометриальных клеток в брюшной полости, а также могут служить диагностическими или прогностическими маркерами либо мишенями для фармакологического воздействия. Для более полного понимания патогенеза эндометриоза представляется важным изучение роли ангиогенных, нейрогенных факторов, цитокинов, хемокинов, различных ростовых факторов в формировании и прогрессировании эндометриоидных очагов.

Цель нашего исследования – оценка содержания растворимых иммунорегуляторных молекул в периферической крови и перитонеальной жидкости женщин с эндометриозом разной степени распространения.

Материалы и методы

В исследование были включены 40 пациенток с наружным генитальным эндометриозом, наблюдавшихся и оперированных в отделении оперативной гинекологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» МЗ РФ. Диагноз эндометриоза был установлен на основании интраоперационного обследования и подтвержден обзорным гистологическим исследованием удаленных очагов эндометриоза. Женщины с эндометриозом разделены на 2 группы в соответствии со степенью распространения поражения: I–II степени (ЭМ-1, n=12) и III–IV степени (ЭМ-2, n=28). Контрольную группу составили 15 женщин (6 женщин, оперированных лапароскопическим доступом, что подтвердило отсутствие эндометриоидных поражений и миомы, и 9 практически здоровых фертильных женщин).

Критерии включения в группы исследования: возраст пациенток 18–45 лет; подтвержденный диагноз «наружный генитальный эндометриоз»; подписанное информированное согласие на участие в исследовании. Критерии исключения: злокачественные новообразования; острые воспалительные заболевания органов малого таза; тяжелая сопутствующая экстрагенитальная патология.

Кровь для анализа у женщин с эндометриозом забирали нат...

Вторушина В.В., Короткова Т.Д., Кречетова Л.В., Инвияева Е.В., Ванько Л.В., Адамян Л.В.