Ремоделирование ниши стволовых клеток эндоцервикса при ВПЧ-ассоциированном предраке и микроинвазивном раке шейки матки

Цель исследования. Изучить морфологические проявления и молекулярные механизмы ремоделирования ниши стволовых клеток эндоцервикса (НСКЭ) при ВПЧ (вирус папилломы человека)-ассоциированном предраке и микроинвазивном раке шейки матки (РШМ).
Материал и методы. Проведено ретроспективное клинико-морфологическое и молекулярно-биологическое исследование на цитологическом, биопсийном и операционном материале от 251 больных различной ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки: плоской кондиломой – 80 женщин,
CIN I – 47, CIN II–III – 110, микроинвазивной карциномой – 14 женщин. Проводили иммуноцитохимическое и иммуногистохимическое исследования. Определяли маркеры р16INK4a, Ki-67, СK17, Оct-4, SMA, CD34, MMP2, Vimentin. Провели исследование 79 женщинам по выявлению высоко онкогенных 14 типов ВПЧ методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени и ПЦР in situ.
Результаты исследования. ВПЧ инфекция вызывает ремоделирование НСКЭ, что приводит к патологической репарации эпителия, развитию предрака и РШМ. Ключевую роль в этих процессах играет интеграция вируса с тканевыми стволовыми клетками эпителия, а также декомпенсация работы прогениторной мезенхимальной клетки. Развитие плоскоклеточного РШМ сопровождается возникновением клонов опухолевых клеток с признаками стволовости.
Заключение. Для улучшения ранней диагностики и профилактики РШМ следует рекомендовать комплексное обследование женщин, включающее цитологический анализ с ВПЧ тестированием и оценкой состояния НСКЭ.

Ежегодно в мире 500 тыс. женщин заболевают раком шейки матки (РШМ). Заболеваемость РШМ по странам различна и составляет 3,6 на 100 тыс. женского населения в Финляндии, в России этот показатель составляет 16,2 на 100 тыс. женщин. Из года в год растут показатели заболеваемости, особенно среди женщин репродуктивного возраста [1]. Основным фактором риска развития РШМ является инфицирование человека ДНК-содержащим вирусом папилломы человека (ВПЧ), поражающим эпителий шейки матки. В литературе широко обсуждаются подходы к созданию цитологических и молекулярных методов ранней диагностики и скрининга предрака и РШМ. Так, цитологический метод, имея высокую специфичность, уступает молекулярным методам диагностики своей чувствительностью [3]. ВПЧ тестирование позволяет безопасно расширить интервалы скрининга [7]. Таким образом, ВПЧ тестирование, проводимое отдельно, или вместе с цитологическим исследованием дает возможность надежного, более эффективного скрининга РШМ.

Важным аспектом использования ВПЧ тестирования как для первичного скрининга, так и в качестве дополнения к жидкостной цитологии, является мониторинг ВПЧ- положительных женщин. Такие женщины в возрасте 30 лет и старше, имеющие цитологическое заключение – NILM (negative for intraepithelial lesion or malignancy) должны через 1 год сдать повторно анализы [11].

При исследовании механизма проникновения ВПЧ в участки поврежденного эпителия выявили, что на начальных этапах вирус взаимодействует со специфическими гепаран-сульфатными рецепторами базальной мембраны и базальных кератиноцитов многослойного плоского эпителия в зоне трансформации шейки матки [8], которая представляет собой границу между плоским и цилиндрическим эпителием. Здесь происходит замещение и превращение одного вида эпителия в другой и сосредоточены прогениторные клетки. Зона трансформации шейки матки в соответствии с современными представлениями является нишей стволовых клеток эндоцервикса (НСКЭ), то есть ограниченным специализированным микроокружением, которое интегрирует и осуществляет межклеточные сигналы для регуляции и поддержания гомеостаза принадлежащих ей стволовых клеток. Ниша активно участвует в регуляции дормантного состояния и пролиферации тканевых стволовых клеток и дифференцировке их потомства, она обеспечивает самоподдержание пула тканевых стволовых клеток. Одно из назначений ниши в тканях взрослого организма заключается в ограничении пролиферации и установлении баланса между процессами пролиферации и апоптоза
стволовых клеток, что необходимо для поддержания тканевого гомеостаза.

Другое назначение ниши – создание условий для максимальной защищенности стволовых клеток от внешних воздействий. Патологические процессы, вызванные воздействием ВПЧ, начинаются в этой зоне и вызывают ее ремоделирование. Под процессом ремоделирования понимают изменение существующей структуры ткани, ее переустройство или дополнение чем-либо. Несмотря на высочайший интерес к проблеме предрака и РШМ, морфологические и молекулярные механизмы ремоделирования НСКЭ под воздействием ВПЧ остаются мало изученными.

Целью нашей работы было изучение ремоделирования НСКЭ при ВПЧ-ассоциированном предраке и микроинвазивном РШМ.

Материал и методы исследования

Проведено ретроспективное клинико-морфологическое и молекулярно-биологическое исследование на цитологическом, биопсийном и операционном материале от 251 больной различной ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки: плоской кондиломой – 80 женщин, цервикальной
интраэпителиальной неоплазией(CIN) I – 47, CIN II–III – 110, микроинвазивной карциномой –
14 женщин. Средний возраст пациенток составил 42±10 лет. Всем пациенткам проведено цитологическое и гистологическое исследования. Для цитологического исследования цервикальные образцы этих женщин были собраны в среду для жидкостной цитологии и окрашены по Папаниколау в системе TriPath (B&D, USA). Результаты оценивали по классификации Вethesda. Для уточнения цитологического диагноза ASC-US (atypical squamous cells of undetermined significance), а также при L-SIL (low grade squ...

Коган Е.А., Файзуллина Н.М., Демура С.А., Демура Т.А., Исраилова А.Х., Козаченко А.В.