Роль факторов ангиогенеза в патогенезе врастания плаценты у женщин с предлежанием плаценты

Цель: Изучить вклад факторов ангиогенеза в патогенез врастания плаценты (ВП) у женщин с предлежанием плаценты (ПП) для выявления дополнительных биомаркеров патологической инвазии плаценты. Материалы и методы: Определяли сывороточную концентрацию PlGF, VEGF, sFlt-1; выполняли УЗИ с допплерометрией (ДМ) у женщин с ПП (n=42), c ВП (n=46); иммуногистохимию локальной экспрессии VEGF, Flt-1: группы ПП (n=17), pl. accreta (n=16), pl. increta (n=18), pl. percreta (n=6). Результаты: Экспрессия Flt-1 в ворсинах хориона у женщин с ВП была ниже, чем в отсутствие ВП, как в зоне инвазии (р=0,02; <0,001; 0,003 для pl. accreta, increta, percreta соответственно), так и вне ее для инвазивных форм ВП (р=0,005; 0,003 для pl. increta, percreta соответственно), что согласовывалось со снижением sFlt-1/PlGF в сыворотке крови при ВП (1,65 против 3,0; р=0,035). Повышение локальной экспрессии VEGF при ВП не подтверждено изменениями сывороточной концентрации биомаркера. При ВП чаще, чем при ПП, встречалось усиление субплацентарной васкуляризации по данным цветовой ДМ; сочетание ≥3 ультразвуковых признаков (91,3% против 40,5%; 67,4% против 11,9%; p<0,001;<0,001 соответственно) различий в маточно-плацентарной гемодинамике по данным спектральной ДМ не найдено (р=0,323), УЗИ диагностировало ВП с чувствительностью 95,7%, специфичностью – 54,8%; прогностичностью положительного теста – 69,8%, отрицательного теста – 92,0%; точностью – 76,1%. Заключение: Снижение sFlt-1/PlGF в сыворотке крови у беременных с ВП в III триместре согласуется со снижением локальной экспрессии Flt-1 в ворсинах хориона и может быть использовано в качестве дополнительного биомаркера ВП у женщин с ПП. Оценка множественных УЗ-признаков ВП может повысить специфичность и точность антенатальной диагностики у пациенток группы риска.

Врастание плаценты (ВП) – сложный процесс, в реализации которого участвуют различные механизмы [1–4]. Понимание определяющих их закономерностей позволит обоснованно разрабатывать программы ранней диагностики для предупреждения осложнений, а в последующем, возможно, и профилактики чрезмерной инвазии хориона [3–6].

Ультразвуковое исследование (УЗИ) занимает ведущую позицию среди методов антенатальной диагностики ВП [7], однако его информативность значительно снижается у пациенток без оперативного анамнеза и при расположении плаценты по задней стенке матки [8]. Дополнение данных визуализирующих методов биохимическими маркерам представляется перспективным для повышения точности диагностики ВП [9–13], особенно в группе высокого риска: у беременных с предлежанием плаценты (ПП) и рубцом на матке. Среди многочисленных биохимических маркеров ВП в последние годы активно изучаются факторы ангиогенеза [14–19]. Известно, что эта группа белков влияет на морфологический фенотип плаценты [14, 20], а нарушение сывороточного баланса проангиогенных факторов (сосудисто-эндотелиальный фактор роста (VEGF), плацентарный фактор роста (PlGF)) и их антагонистов (растворимая fms-подобная тирозинкиназа-1 (sFlt-1)) предшествует клинической манифестации преэклампсии, что обусловливает все более широкое применение оценки их сывороточной концентрации в рутинной клинической практике [21]. Рядом исследований обнаружены изменения уровня факторов ангиогенеза в крови беременных с ВП [18, 19, 22]. Однако остается неясным, являются ли эти изменения ассоциированными либо связанными предикторами патологической инвазии плаценты. Для уточнения наличия прямой связи необходимо сопоставление уровня факторов ангиогенеза в крови с иммуногистохимическим анализом их экспрессии в зоне плацентации.

Цель работы: изучить вклад факторов ангиогенеза в патогенез ВП у женщин с ПП для выявления дополнительных биомаркеров аномальной инвазии плаценты.

Материалы и методы

Исследование «случай-контроль» на базе Перинатального центра (ПЦ) в структуре ГБУЗ «ККБ № 2» г. Краснодара выполнено в соответствии с этическими принципами Хельсинкской декларации. Включены 88 последовательных пациенток с ПП, обращавшихся за специализированной медицинской помощью в ПЦ в период с 01.12.2019 по 01.03.2021 гг.

Всем пациенткам выполнялось УЗИ матки специалистами ультразвуковой диагностики ПЦ при поступлении в стационар для родоразрешения (сканеры Medison AV10, Voluson S8, Voluson Е6, Voluson E8, оснащенные мультичастотными датчиками для абдоминальных и эндокавитальных исследований) трансабдоминальным и трансвагинальным доступами. ПП определяли согласно общепринятым критериям [23] с прицельным поиском ультразвуковых признаков ВП [24].

В последующем ВП верифицировалось при родоразрешении и на основании данных патолого-гистологического исследования (ПГИ) операционного материала.

Исследование одобрено Комитетом по этике ГБУЗ ККБ № 2 (протокол № 90 от 13.11.2019 г.). После информированного согласия на изучение образцов крови и гистологического материала, до введения стероидов и препаратов крови (в случае необходимости их применения), у беременных с ПП проводился забор крови из периферической вены для последующего определения уровня маркеров ангиогенеза (PlGF, VEGF, sFlt-1) в сыворотке.

Критерии включения: антенатальный диагноз О.44.0–О44.1 (МКБ-10) согласно данным УЗИ и/без магнитно-резонансной томографии, срок гестации 26–38 недель, информированное согласие беременной на участие в исследовании.

Критерии исключения: преэклампсия, антенатальная гибель плода, многоплодная беременность, врожденные пороки развития плода, явившиеся показанием к досрочному родоразрешению, отсутствие данных об исходе беременности с гистологической и/или клинической верификацией диагноза.

Клинические группы формировались согласно клиническому диагнозу при родоразрешении и по данным ПГИ операционного материала (при наличии).

Специалисты, выполнявшие иммуноферментный анализ (ИФА) сыворотки крови, не имели данных о клиническом диагнозе пациенток. Также патоморфологи, выполнявшие иммуногистохимическое (ИГХ) исследование операционного материала, не знали результатов ИФА.

Определяли сывороточную концентрацию PlGF, VEGF, sFlt-1 с учетом срока гестации, уточненного по данным комбинированного скрининга I триместра, по методике ИФА, описанной ранее [22].

Гистологическое и ИГХ-исследование

Операционный материал (плацента, фрагменты иссеченного при метропластике миометрия или матка в случаях гистерэктомии) после удаления немедленно фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине. После фиксации материал вырезался с забором необходимого объема для исследования, включая область плацентарной площадки с подлежащей стенкой матки на всю глубину, которые проводились через вакуумный гистологический процессор, заливкой в парафин и последующей гистологической окраской гематоксилин-эозином. Применяли аппарат для гистологической проводки закрытого тип...

Макухина Т.Б., Пенжоян Г.А., Морозова Р.В., Задорная О.И., Донцова М.В., Кривоносова Н.В., Амирханян А.М.