Роль гена андрогенного рецептора в генезе преждевременной недостаточности яичников

Цель. Оценить состояние гена АR в тканях яичника и его связь с продукцией самих андрогенов, а также проанализировать длину CAG-повтора гена AR у пациенток с преждевременной недостаточностью яичников (ПНЯ) и у здоровых женщин.
Материал и методы. 118 женщин с ПНЯ. Материалом для FISH-анализа служили 20 образцов операционного материала, полученного путем биопсии яичников больных с ПНЯ. В качестве контроля использовались 10 образцов яичниковой ткани женщин, погибших при чрезвычайных обстоятельствах до 40 лет (в среднем 28,4±6,3 года). В качестве популяционного контроля длины CАG-повтора гена АR проанализированы образцы ДНК 83 здоровых женщин, проживающих в европейской части России. Группа контроля в отношении уровней ТЭСГ, Тобщ и ИСА составила 9 здоровых женщин репродуктивного возраста с сохраненным ритмом менструации.
Результаты исследования. Наблюдается четкая тенденция к укорочению длины CAG-повтора гена АR у больных с ПНЯ. FISH-анализ образцов биоптатов яичников показал изменение состояния гена АR (амплификацию) почти у каждой трети больных с ПНЯ (30%), в то время как в биоптатах яичниковой ткани от женщин с сохраненной функцией яичников (контрольная группа) подобных изменений обнаружено не было.
Заключение. Выявленная амплификация гена АR в тканях яичника почти у каждой третьей больной с ПНЯ позволяет считать, что в основе данной патологии наряду с другими молекулярно-генетическими, аутоиммунными, инфекционными причинами определенную роль играет повышенная экспрессия АR на фоне гипоандрогенного состояния. Данные, полученные в нашей работе, позволяют рассматривать синдром преждевременной недостаточности яичников как результат нарушения передачи андрогенного сигнала.

Преждевременная недостаточность яичников (ПНЯ) представляет собой клинический синдром, объединяющий гетерогенную группу заболеваний, в которой овариальная недостаточность может быть вызвана различными причинами. На сегодняшний день очевидно, что субстратом для инициации и развития ПНЯ являются разнообразные генетические факторы. Идентификация генов, вовлеченных в этот процесс, качественная и количественная оценка молекулярно-генетических изменений и их клинического значения представляют огромный интерес с точки зрения фундаментальной и клинической гинекологии. Появление и широкое внедрение разнообразных молекулярных технологий позволяют значительно расширить диапазон наших познаний в области данной патологии.

В последние годы накопились сведения о роли андрогенного рецептора (АR) в процессах роста и созревания фолликулов, а также о его вкладе в процесс естественной гибели клеток, что позволяет расширить наши знания о причинах развития ПНЯ.

АR относится к лиганд-зависимому типу суперсемейства ядерных рецепторов, имеет молекулярную массу 110 кДа и включает 918 аминокислот. В молекуле AR выделяют несколько основных структурных доменов (пептидных фрагмента), при этом каждый из них выполняет свои, во многих случаях еще не полностью изученные функции, касающиеся активности всей молекулы АR.

Известно, что АR модулирует важные клеточные процессы и действует как транскрипционный фактор в контроле роста клеток, дифференциации, пролиферации и апоптоза в клетках-мишенях для андрогенов не только у мужчин, но и у женщин. Ген, кодирующий АR человека (ген †R), локализуется на хромосоме Х в области Хq11.2-q12 и не имеет аллелей на хромосоме Y, что обусловливает полную
утрату андрогенного эффекта у ХY-индивидуумов с инактивирующей мутацией гена †R [10].

В середине белковой цепи АR расположен ДНК-связывающий домен. Даже незначительные изменения в последовательности аминокислотных остатков в нем могут оказывать большое влияние на активность рецептора. В этом участке молекулы АR человека обнаружены мажорные мутации у индивидуумов с синдромом андрогенной недостаточности [4]. N-концевой домен молекулы АR (трансактивационный) – самый большой по сравнению с другими рецепторами стероидов, и в нем условно выделяют более мелкие участки, которые вносят различный вклад в регуляцию активности рецептора. Это, например, участок с т.н. активационной функцией-1 (AF-1) [4, 7], который обусловливает основную транскрипционную активность AR, что и заставило нас сконцентрировать наше внимание на этом домене. В этом регионе находится высокополиморфный тракт, состоящий из разного количества повторов аминокислотных остатков гуанина, который кодируется тринуклеотидным CAG-повтором (цитозин-аденин-гуанин) вариабельной длины в первом экзоне гена †R.

Согласно мнению ряда ученых, можно предположить, что у больных с ПНЯ в гене AR обнаружена тенденция к укорочению длины CAG-повтора [16]. Поскольку у женщин при более короткой длине CAG-повтора активность AR повышена, что предполагает большую активность андрогенов на клеточном уровне [5], ПНЯ может быть обусловлена усиленным андрогенным влиянием на растущий фолликулярный пул, вызывающим ускорение процесса атрезии фолликулов.

Биологические эффекты андрогенов могут изменяться в результате нарушений на различных этапах андрогенного сигнального пути. Для изучения роли андрогенов в генезе развития ПНЯ мы оценили состояние гена †R в тканях яичника и его связь с продукцией самих гормонов, а также проанализировали длину CAG-повтора гена †R у пациенток с ПНЯ и у здоровых женщин, составлявших группу контроля. “ ‚ ‡

Материал и методы исследования

В работу были включены 117 женщин с ПНЯ. Средний возраст пациенток составил 33,05±5,1 года, средняя продолжительность заболевания – 4,21±1,2 года. У этих женщин самостоятельная менструация отсутствовала 6 месяцев и более. У всех пациенток был определен уровень фолликулостимулирующего гомона (ФСГ), лютеинизирующего гормона (ЛГ), эстрадиола
(Е2), общего сывороточного тестостерона (Тобщ) и тестостеронэстрадиол-связывающего глобулина (ТЭСГ) методом иммуноферментного анализа (ИФА). Индекс свободных андрогенов (ИСА) был рассчитан как отношение уровня Тобщ к уровню ТЭСГ и выражен в процентах. Группа контроля
в отношении уровней ТЭСГ, Тобщ и ИСА составила 15 здоровых женщин репродуктивного возраста
с сохраненным ритмом менструации. В качестве популяционного контроля длины CАG-повтора
гена †R проанализировано 83 образца ДНК, здоровых регулярно менструирующих женщин-доноров,
проживающих в европейской части России, средний возраст которых составил 32,35±0,95 года.

Материалом для FISH-анализа служили 20 операционных образцов, полученных путем биопсии яичников больных с ПНЯ (после получения информированного согласия) с диагностической целью, что одобрено этическим комитетом ФГУ Научный центр акушерства, ...

Табеева Г.И., Марченко Л.А., Карселадзе А.И., Бутарева Л.А., Строганова А.М.