Роль маркеров оксидативного стресса в прогнозировании исходов вспомогательных репродуктивных технологий

Оксидативный стресс развивается вследствие дисбаланса между прооксидантными и антиоксидантными системами организма. Роль оксидативного стресса продемонстрирована в патогенезе различных заболеваний, при этом влияние оксидативного стресса на процессы фолликулогенеза и оогенеза на сегодняшний день изучено недостаточно. Цель исследования. Оценить информативность маркеров оксидативного стресса в крови и фолликулярной жидкости пациенток в прогнозировании исходов программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Материал и методы. В проспективное когортное исследование были включены 108 супружеских пар с бесплодием различного генеза. В зависимости от исхода изученного цикла ВРТ все пациентки были разделены на 2 группы – группу 1 составили 38 пациенток с наступившей клинической беременностью, группу 2 – 70 женщин с отсутствием беременности в результате цикла ВРТ. В качестве параметров, характеризующих уровень оксидативного стресса и активность антиоксидантных систем организма нами были использованы малоновый диальдегид (МДА), cоотношение восстановленного глутатиона к окисленному глутатиону (GSH/GSSG) и ферментативная активность каталазы. Результаты. Уровень МДА в крови пациенток был значимо выше в группе 2 и составил 4,9±0,7 по сравнению с 4,5±0,7 в группе 1, р=0,0473. Помимо уровня МДА, на наступление беременности влияли возраст пациентки, уровень АМГ и число полученных зрелых ооцитов. В группе 1 уровень МДА не имел корреляционной связи с другими маркерами оксидативного стресса и с клинико-лабораторными характеристиками пациенток. В группе 2 уровень МДА в крови имел статистически значимую сильную положительную корреляционную связь с уровнем МДА в фолликулярной жидкости (r=0,703, p<0,0001) и статистически значимую отрицательную корреляционную связь с ферментативной активностью каталазы в фолликулярной жидкости (r=-0,319, p=0,0455) Заключение. В ходе проведенного исследования была определена значимость маркеров оксидативного стресса в прогнозировании исходов программ ВРТ. Проявления системного оксидативного стресса могут приводить к неудачам ЭКО, что реализуется вероятнее всего за счет снижения качества ооцитов и эмбрионов. В пользу данной гипотезы свидетельствует тот факт, что у пациенток с неудачами ЭКО уровень маркеров оксидативного стресса в крови пациенток был значимо выше, что оказывало влияние на уровень прооксидантов в фолликулярной жидкости.

Прогнозирование исходов программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) является актуальной проблемой, решение которой позволит оптимизировать лечение бесплодия. Одним из ключевых этапов, определяющих эффективность программ ВРТ и рождение здорового ребенка, является получение качественных гамет, в первую очередь ооцитов [1]. Оценка качества ооцитов весьма затруднительна в клинической практике, поскольку все имеющиеся на сегодняшний день методы молекулярно-генетической диагностики сопряжены с гибелью изучаемых клеток и не подходят для изучения единичных живых клеток. В связи с этим поиск объектов, изучение которых позволит оценить качество ооцитов и, таким образом, прогнозировать исходы программ ВРТ, находится в эпицентре внимания ученых во всем мире.

Фолликулярная жидкость (ФЖ) является биологической окружающей средой ооцита и отражает влияние внешних факторов, в том числе овариальной стимуляции, на качество ооцитов [2]. Известно, что ФЖ секретируется клетками гранулезы и клетками теки, выстилающими стенку фолликула, а состав ФЖ включает различные соединения, включая цитокины, факторы роста и вазорегуляторные молекулы, а также прооксиданты и антиоксиданты [2].

Оксидативный стресс развивается вследствие дисбаланса между прооксидантными и антиоксидантными системами организма. Развитие оксидативного стресса может приводить к повреждению различных клеточных компонентов – липидов, белков, углеводов, молекул ДНК. Роль оксидативного стресса продемонстрирована в патогенезе преэклампсии [3], синдрома поликистозных яичников [4], нарушений рецептивности эндометрия [5] и мужского бесплодия [6]. При этом влияние оксидативного стресса на процессы фолликулогенеза и оогенеза на сегодняшний день изучено недостаточно. Данные о качестве ооцитов, эмбрионов и клинических исходах программ ВРТ при разном уровне маркеров оксидативного стресса отличаются в различных исследованиях [7, 8]. В связи с этим представляется интересным оценить содержание маркеров оксидативного стресса в крови и в ФЖ пациенток с различными исходами лечения в програм­ме ВРТ.

В качестве параметров, характеризующих уровень оксидативного стресса и активность антиоксидантных систем организма, нами были использованы малоновый диальдегид (МДА), cоотношение восстановленного глутатиона к окисленному глутатиону (GSH/GSSG) и ферментативная активность каталазы. МДА является конечным продуктом перекисного окисления липидов. Поскольку МДА является стабильным продуктом, его используют в качестве маркера кумулятивного эффекта перекисного окисления липидов [9]. Каталаза – один из основных ферментов антиоксидантной защиты, который осуществляет разрушение перекиси водорода до воды и молекулярного кислорода [10]. Соотношение восстановленного глутатиона (GSH) к окисленному глутатиону (GSSG) составляет основу клеточного окислительно-восстановительного гомеостаза и отображает уровень оксидативного стресса в целом.

Цель исследования: оценить информативность маркеров оксидативного стресса в крови и ФЖ пациенток в прогнозировании исходов программ ВРТ.

Материал и методы исследования

В проспективное когортное исследование были включены 108 супружеских пар с бесплодием различного генеза, нормальным кариотипом, отсутствием противопоказаний к лечению методами ВРТ и подписанным информированным согласием на участие в исследовании. В зависимости от исхода изученного цикла ВРТ все пациентки были разделены на 2 группы – группу 1 составили 38 пациенток с наступившей клинической беременностью, группу 2 – 70 женщин с отсутствием беременности в результате цикла ВРТ. Критериями включения были возраст пациенток от 18 до 42 лет, наличие регулярного менструального цикла и двух функционирующих яичников. Критерием исключения было наличие тяжелой формы патозооспермии у мужчины (концентрация сперматозоидов менее 100 000/мл, наличие менее 4% морфол...

Иванча К.А., Сыркашева А.Г., Володина М.А., Пятаева С.В., Суханова Ю.А., Высоких М.Ю., Калинина Е.А., Понизовкина А.И., Долгушина Н.В.