Роль неслучайной инактивации Х-хромосомы и полиморфизма андрогенового рецептора при синдроме поликистозных яичников

Цель исследования. Изучение представленности неслучайной инактивации Х-хромосомы и полиморфизма гена андрогенового рецептора (АР) по CАG-повторам у пациенток с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ). Материал и методы. В исследование вошли 53 пациентки с СПКЯ и 64 здоровые женщины с регулярным менструальным циклом. Выявление неслучайной инактивации хромосомы Х осуществляли с помощью дифференциального метилирования активной и неактивной Х-хромосомы с последующим анализом полиморфизма CAG-повтора в первом экзоне гена АР, с использованием метилчувствительной полимеразной цепной реакции. Результаты исследования. В группе СПКЯ неслучайная инактивация Х-хромосомы выявлена в 54% (27/50) случаев, что в 3,4 раза чаще, чем в группе контроля – 16,1% (9/56, p<0,0001). При изучении длин CAG-повторов AР наиболее распространенным в группе СПКЯ являлся аллель с длиной 23 (CAG) – 13% (14/106), в группе контроля – 19 (CAG) – 18,8% (24/128). Средние показатели суммы обоих аллелей (SBM) по группам не различались и составили 22,02±2,77 и 21,42±2,26 соответственно (р>0,05). Выявлена зависимость клинических проявлений СПКЯ от генотипа больных: более тяжелые формы нарушений менструального цикла наблюдались у пациенток с неслучайной инактивацией Х-хромосомы. В группе пациенток с неслучайной инактивацией обнаружена взаимосвязь длин САG-повторов в гене АР с уровнем андрогенов. При длинных аллелях АР (CAG-повторы ≥22) и низкой его активности средний уровень свободного тестостерона в 3 раза превышал таковой в группе пациенток с короткими аллелями (7,49±5,79 против 2,27±1,81пг/мл; р=0,0017 ). Заключение. При СПКЯ у каждой второй пациентки выявлена неслучайная инактивация Х-хромосомы, ассоциированная с более выраженными нарушениями функции яичников. Различий по длинам CAG-повторов АР между группами контроля и СПКЯ не выявлено, однако в группе пациенток с неслучайной инактивацией Х-хромосомы установлена взаимосвязь длинных аллелей АР с высокими уровнями свободного тестостерона. Это можно рассматривать как один из механизмов формирования гиперандрогении при СПКЯ.

С современных позиций синдром поликистозных яичников (СПКЯ) относят к генетически детерминированным нарушениям функции репродуктивной системы [2, 5, 18] и рассматривают как наиболее распространенную форму гиперандрогении у женщин.

На молекулярном уровне эффекты андрогенов опосредуются через активацию андрогеновых рецепторов (АР). АР относятся к семейству лиганд-активированных транскрипционных факторов, которые регулируют рост, дифференциацию,пролиферациюиапоптозклеток-мишеней [17]. Ген АР локализуется на Х-хромосоме (Хq11.2-q12) в относительной близости с областью ее инактивации (Хq13). Первый экзон гена кодирует N-концевой домен (участок транскрипции и активации) и содержит различное количество триплетов цитозин-аденин-гуанин (CAG), которые формируют полиглутаминовую цепь [17]. Число CAG-повторов в норме варьируется от 8 до 35 [17]. Во многих исследованиях была обнаружена обратная зависимость между числом CAG-повторов в гене АР и его активностью [3, 4, 22]. При обследовании мужчин выявлено, что короткие CAG-повторы увеличивают
риск развития рака предстательной железы [26], а длинные – риск мужского бесплодия, связанного с низким уровнем андрогенов [6]. Схожая закономерность была обнаружена у женщин: короткие аллели ассоциировались с гирсутизмом [12], с раннним пубархе, гиперандрогенией яичникового генеза [10], а также с андрогенозависимыми дермопатиями как у женщин, так и у мужчин [20]. В некоторых работах была обнаружена более частая встречаемость короткого аллеля у больных СПКЯ, чем у здоровых женщин [21, 25]. Хотя имеются и противоположные данные об ассоциации классической формы СПКЯ с
длинными (более 22 повторов) вариантами аллелей гена AР [8].

Ген AР находится на Х-хромосоме вблизи центра ее инактивации, в связи с этим имеет значение определение неслучайной инактивации Х-хромосомы. Женщины обычно не страдают Х-сцепленными заболеваниями, одна из Х-хромосом случайным образом инактивируется для обеспечения одинакового количества функционирующих Х-сцепленных генов у обоих полов [19]. Однако, если происходит неслучайная инактивация нормальной Х-хромосомы, экспрессия аномальных аллелей повышается [16]. В частности, высокая представленность неслучайной инактивации Х-хромосомы была обнаружена при различных патологических состояниях репродуктивной системы: преждевременной недостаточности
яичников, раке молочной железы и яичников, привычном невынашивании беременности [1].

Исследование на моно-и дизиготных близнецах с разными фенотипами СПКЯ показало, что многообразие форм может быть обусловлено различной экспрессией Х-сцепленных генов [23].
В 2006 г. T.E. Hickey с группой ученых изучали неслучайную инактивацию Х-хромосомы среди сестер [9]. Сестры с одинаковым CAG генотипом и одинаковой представленностью инактивации Х-хромосомы имели в 30 раз чаще схожие проявления заболевания (фенотип СПКЯ), чем сестры с одинаковым генотипом, но разной представленностью инактивации Х-хромосомы [9]. Это косвенно указывает на участие неслучайной инактивации Х в патогенезе СПКЯ. В исследовании A.S. Nissar было выявлено частое сочетание неслучайной инактивации Х-хромосомы с более длинными CAG-повторами [15]. Неоднозначность результатов проведенных ранее работ и отсутствие аналогичных данных на популяции российских женщин послужило основанием для проведения данного исследования.

Цель исследования – изучение представленности неслучайной инактивации Х-хромосомы, полиморфизма гена АР по CАG-повторам у пациенток с СПКЯ и оценка их роли в формировании
синдрома.

Материал и методы исследования

Были исследованы 117 женщин: основную группу составили 53 пациентки с СПКЯ, группу контроля – 64 здоровые женщины с регулярным менструальным циклом. Средний возраст по группам: 27,3±5,74 и 25,6±4,28 года, индекс массы тела: 24,2±5,47 и 22,4±0,11 кг/м² соответственно. СПКЯ диагностировали в соответствии с Роттердамскими критериями [18]. Нарушения менструального цикла по типу олигоменореи выявлены у 45 (84,9%) пациенток, по типу аменореи – у 3 (5,7%). Жалобы на отсутствие беременности предъявляли 13 (24,5%) женщин.

В протокол исследования входило определение уровней лютеинизирующего гормона (ЛГ), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), эстрадиола (Е2), тестостерона общего (Тобщ), тестостерона свободного (Тсв), андростендиона (АС)...

Чернуха Г.Е., Блинова И.В., Немова Ю.И., Руденко В.В.