Акушерство и Гинекология №12 / 2015

Роль toll-like рецепторов 2, 4, 9-го типов в патогенезе хронического эндометрита

27 декабря 2015

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

Цель исследования. Изучение экспрессии Toll-like рецепторов (TLRs) 2, 4, 9-го типов в эндометрии при хроническом эндометрите (ХЭ). Материал и методы. В исследование включены 60 пациенток репродуктивного возраста (средний возраст 32,1±5,2 года). Всем пациенткам выполнено морфологическое и микробиологическое исследования биоптатов эндометрия. Изучение экспрессии TLRs 2, 4, 9 проводилось с помощью метода иммуногистохимии (ИГХ) и реакции обратной транскрипции полимеразной цепной реакции в реальном времени (ОТ-ПЦР). На основе результатов морфологического исследования эндометрия пациентки были разделены на 2 группы: I (n=45) – женщины с морфологически подтвержденным ХЭ, II (n=15) – условно здоровые женщины (эндометрий стадии пролиферации). При статистической обработке использовали U-критерий Манна–Уитни, корреляционный анализ методом Спирмена. Для всех видов анализа статистически значимым считали значения р<0,05. Результаты исследования. В I группе выявлено достоверное повышение экспрессии TLRs в эндометрии по сравнению со II группой (р<0,05). При сравнительном анализе экспрессии TLRs у женщин с ХЭ при наличии и отсутствии инфекционных агентов в биоптатах эндометрия достоверной статистической разницы не отмечено. Установлены слабые прямые корреляционные связи: экспрессии TLR2 между эпителиальными клетками эндометрия методом ИГХ и эндометрия в целом методом ОТ-ПЦР (r=0,3, p=0,024); экспрессии TLR9 между стромальными клетками, сосудами эндометрия методом ИГХ и эндометрия в целом методом ОТ-ПЦР (r=0,3, p=0,028; r=0,3, p=0,023, соответственно). Заключение. Изучение экспрессии TLRs 2, 4, 9 в эндометрии позволило уточнить, что для предотвращения хронизации воспалительного процесса в эндометрии необходимы: быстрая элиминация возбудителя, предупреждение его персистенции, восстановление нормальной архитектоники слизистой оболочки полости матки и подавление гиперпродукции экспрессии TLRs, предрасполагающей к формированию «порочного» патогенетического круга. На основании полученных данных подана заявка на патент № 2015122377 «Способ диагностики и прогнозирования развития хронического эндометрита у женщин репродуктивного возраста по экспрессии Toll-like рецепторов в эндометрии».

«Первая линия» защиты от инфицирования осуществляется эффекторами врожденного иммунитета, обеспечивающими своевременное выявление чужеродных инфекционных агентов и их быструю элиминацию за счет формирования локальной воспалительной реакции с последующей репарацией поврежденной ткани, что необходимо для предотвращения генерализации инфекции [1].

Среди сигнальных рецепторов врожденного иммунитета Toll-like рецепторы (TLRs) являются наиболее древними, генетически детерминированными структурами (трансмембранными белками, содержащими множество остатков лейцина во внеклеточной части). TLRs играют центральную роль в инициации врожденного иммунного ответа, осуществляя непосредственное взаимодействие рецептора с паттернами микробных агентов (липополисахаридами, белками бактериальных жгутиков, вирусной двухцепочечной РНК и др.) [2, 3]. TLRs экспрессируются на поверхности макрофагов, нейтрофилов, естественных киллеров, дендритных клеток, покровного эпителия, эндотелия сосудов и др. [1, 4], и, связываясь с различными лигандами, индуцируют экспрессию цитокинового каскада, формируя воспалительную реакцию, направленную на эрадикацию инфекционного агента [1–3, 5].

Открытие TLRs удостоено многочисленных признаний. В 2010 году Р. Меджитов и J. Hoffmann получили «Премию Розенстилаза» за разъяснение механизмов врожденного иммунитета, в 2011 году C. Janeway и Р. Меджитов – «Премию Шао» за революционную идею о ведущей роли TLRs в активации адаптивного иммунного ответа. Итогом этих инновационных исследований явилось присуждение в 2011 году «Иммунологической Нобелевской премии» по физиологии и медицине B. Beutler и J. Hoffmann за открытия активаторов врожденного иммунитета и R. Steinman за изучение роли дендритных клеток в механизмах приобретенного иммунитета [6].

Открытие TLRs послужило основанием для пересмотра устоявшихся воззрений на некоторые патогенетические механизмы развития хронического эндометрита (ХЭ) и возникновения на его фоне привычного невынашивания беременности, преждевременных родов и внутриутробной задержки развития плода [7]. Представленность TLRs в разных отделах репродуктивного тракта строго специфична [8]: эпителиальные клетки влагалища и эндоцервикса экспрессируют TLR 1-3, TLR5 и TLR6 [9], эндометриальные клетки – TLRs 1–10-го типов, что обусловлено необходимостью ответа на широкий диапазон микробных агентов [10].

Из всех идентифицированных TLRs наиболее широким спектром специфичности обладает TLR2, который располагается на поверхности клетки и связывается с различными лигандами бактерий, вирусов, грибов, простейших [10]. TLR4 также экспрессируется преимущественно на поверхности клетки и распознает, помимо паттернов микроорганизмов, белки теплового шока 60 и 70, полисахаридные фрагменты гепарина сульфата, гиалуроновую кислоту, фибриноген и фибронектин хозяина [10]. TLR9, располагаясь внутриклеточно на поверхности эндосом, распознает неметилированные повторы CpG ДНК бактерий, вирусов, простейших, гемозоин простейших, комплекс хроматина и иммуноглобулин G хозяина [8, 10, 11].

Цель исследования: изучение экспрессии TLRs 2, 4, 9-го типов в эндометрии при ХЭ.

Материал и методы исследования

В исследование включены 60 пациенток репродуктивного возраста (средний возраст 32,1±5,2 года), обратившихся в Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова с различными жалобами (табл. 1). На 7–10-й день менструального цикла 35 пациенткам произведена гистероскопия, диагностическое выскабливание слизистой оболочки полости матки, а 25 – аспирационная биопсия эндометрия с помощью кюретки Pipelle de Cornie. Для изучения врожденного локального иммунного ответа в эндометрии были выбраны 3 рецептора (TLRs 2, 4, 9). Изучение экспрессии TLRs проводилось методом иммуногистохимии (ИГХ) (n=60) и с помощью реакции обратной транскрипции полимеразной цепной реакции в реальном времени (ОТ-ПЦР) (n=60).

Морфологическое исследование эндометрия (n=60) включало верификацию ХЭ на основе следующих морфофункциональных его характеристик: наличие воспалительных лимфоплазмоклеточных инфильтратов и очагового фиброза в строме эндометрия, склеротических изменений стенок спиральных сосудов слизистой оболочки полости матки.

На основе результатов гистологического исследования эндометрия пациентки были разделены на 2 группы: I (n=45) – женщины с морфологически подтвержденным ХЭ, II (n=15) – группа сравнения, условно здоровые женщины (эндометрий ранней, средней и поздней стадий пролиферации). При этом I группа пациенток на основании морфологической характеристики эндометрия и обязательного наличия клинических проявления ХЭ (аномальные маточные кровотечения и/или нарушения репродуктивной функции) была разделена на 3 подгруппы. Iа подгруппа (n=15) – полный симптомокомплекс ХЭ, который верифицировался при одновременном выявлении воспалительных лимфоплазмоклеточных инфиль...

Коган Е.А., Гомболевская Н.А., Демура Т.А., Марченко Л.А., Бурменская О.В., Файзуллина Н.М., Муравьева В.В.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.