Роль внеклеточной фетальной ДНК в ранней диагностике осложнений беременности

Цель исследования. Осветить современные представления о роли внеклеточной ДНК плода (cff-DNA) в диагностике таких осложнений беременности, как преэклампсия, синдром задержки развития плода, преждевременные роды.
Материал и методы. Проведен поиск доступных литературных источников, опубликованных в базе данных Medline, Pubmed и др. Было найдено 84 источника, посвященных изучению освещаемой проблемы, из которых 35 были включены в данный обзор.
Результаты. Внеклеточная ДНК плода (cff-DNA) является новейшим перспективным биомаркером, который применяется при изучении различных состояний в акушерстве, в частности в пренатальной диагностике и при осложненном течении беременности. Его легко обнаружить с помощью полуколичественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с таргетным геном SRY. Признано, что уровень cff-DNA в крови играет роль в различных осложнениях беременности. В данном обзоре мы изучили связь cff-DNA и таких осложнений беременности, как преэклампсия (ПЭ), внутриутробная задержка развития (СЗРП), преждевременные роды (ПР), предлежание плаценты и рвота беременных. Высвобождение cff-DNA происходит благодаря механизму апоптоза клеток трофобласта, хотя последние исследования in vivo подтверждают существование дополнительных механизмов. Повышение уровня cff-DNA может быть использовано для прогнозирования развития осложнений беременности и обладает большой ценностью в области пренатальной диагностики и диагностики наиболее распространенных осложнений, так как предшествует появлению клинических симптомов. Гестационный возраст является фактором, определяющим повышение уровня cff-DNA в ответ на патологические состояния.
Заключение. Таким образом, исследование нацелено на выявление причин изменения уровня cff-DNA при патологических состояниях во время беременности с целью определения потенциального прогностического и диагностического применения данного биомаркера.

На сегодняшний день стало очевидно, что теория, созданная в начале 1850-х годов и гласящая, что плацента является непреодолимым барьером для большинства белков и химических веществ между плодом и матерью, неверна. Известно, что генетическая информация плода может представлять собой способ идентификации и верификации генетических аномалий, а также выделения определенных патологий, связанных с матерью. С этой целью применение методов молекулярной биологии в неинвазивной диагностике осложнений беременности оказалось ценным инструментом в генетическом скрининге и при оценке патологических состояний, в отличие от инвазивных методов, которые обладают высокой стоимостью и связаны с большими рисками.

Внеклеточная ДНК плода (далее – cff-DNA) является молекулярным биомаркером, который полностью изменил неинвазивную пренатальную диагностику, или скрининг. Он был открыт в 1997 г. Y.M. Lo и соавт., которые доказали наличие последовательности ДНК плода в мате­ринской плазме и сыворотке [1]. Последующие исследования показали наличие более высоких уровней ДНК плода в плазме беременных женщин по сравнению с ДНК плода, выделенной из материнской крови [2]. Основываясь на данных выводах, в качестве метода обнаружения cff-DNA стали использовать количественную полимеразную цепную реакцию; при этом дальнейшие исследования сфокусировались на клиническом применении дан­­ного маркера с определенным акцентом на прогнозировании осложнений беременности, а также на пренатальной диагностике и скрининге генетических нарушений плода [3, 4]. Последний подход заслужил значительное внимание, так как он имеет ряд преимуществ по сравнению с методом выделения исходных клеток плода, таких как скорость, надежность, низкая стоимость и меньшее количество трудоемких протоколов [3].

Точное происхождение cff-DNA неизвестно. Предполагают, что cff-DNA главным образом происходит из плаценты, о чем свидетельствует быстрое выведение ДНК плода из крови матери после родов, в отличие от большинства клеток плода, сохраняющихся в крови матери спустя недели после родов [3]. Отсутствие циркулирующей ДНК плода в случае плацентарного мозаицизма подтверждает происхождение cff-DNA из плаценты, а не самого плода [3, 4]. Более поздние исследования показали, что основным источником cff-DNA являются клетки трофобластического происхождения, которые высвобождаются из синцитиотрофобласта в виде синцитиальных узелков. Эти клетки претерпевают апоптоз, и нуклеиновые кислоты, содержащиеся внутри, в том числе ДНК и РНК, высвобождаются в материнский кровоток. В дополнение к апоптотическим механизмам, происходящим в результате нормального старения синцитиотрофобласта, случайная поломка или некроз также могут быть одной из причин высвобождения бесклеточных нуклеиновых кислот. Идея о том, что апоптотические или некротические пути деградации синцитиотрофобласта могут изменять количество ДНК плода, представляет значительный интерес [5].

В последнее время определение уровня cff-DNA начинает использоваться в пренатальном скрининге эмбриональных анеуплоидий, в частности синдрома Дауна [6, 7]. В данном обзоре мы в большей степени остановимся на связи cff-DNA и таких па­­то­­­логических изменений во время беременности, как преэклампсия (ПЭ), внутриутробная задержка роста плода (СЗРП) и преждевременные роды (ПР).

ПЭ представляет собой патологическое состояние, которое возникает во время беременности, характеризуется гипертензией, протеинурией и отеками и наступает во второй половине беременности. На сегодняшний день нет ни одного достоверного параметра, который можно использовать для прогнозирования развития ПЭ. Таким образом, большое количество исследований сосредоточено на разработке новых методов в этой области. В различных исследованиях сравнивались уровни cff-DNA при беременности, в дальнейшем осложненных ПЭ. Исследователи пытались сделать выводы о степени причастности cff-DNA к развитию осложнений. Спустя два года после открытия cff-DNA Y.M. Lo и соавт. в 1997 г., в небольшой группе из 20 женщин с ПЭ те же исследователи показали, что уровни cff-DNA были увеличены в 5 раз по сравнению с группой контроля [8]. Эти результаты были подтверждены более поздними исследованиями, в том числе T.N. Leung и соавт. [9] и X.Y. Zhong и соавт. [10], в которых было отмечено примерно одинаковое увеличение cff-DNA у женщин с ПЭ [8–10]. Также стоит отме...

Грачева М.И., Кан Н.Е., Красный А.М.