Состояние местного иммунитета на фоне терапии кандидозного вагинита при беременности

Цель исследования. Изучение состояния местного иммунитета у беременных с кандидозным вагинитом (КВ), а также оценка эффективности проведения этиотропной терапии.
Материал и методы. Проведено проспективное когортное исследование, включающее 125 женщин. Основную группу составили 54 пациентки с кандидозным вагинитом, группу сравнения – 71 пациентка с нормоценозом влагалища. Определены концентрации провоспалительных (TNF-α, IFN-γ, IL-1α, IL-2, IL-6) и противовоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов иммуноферментным методом в цервикальном канале женщин во II и III триместрах беременности, уровень экспрессии мРНК генов вышеуказанных цитокинов. Оценена клинико-микробиологическая эффективность местной терапии при кандидозном вагините.
Результаты. Выявлена достоверно высокая концентрация в основной группе до лечения в отличие от группы сравнения следующих цитокинов: TNF-α, IFN-γ, IL-6, IL-1α и IL-2. При достоверном снижении их уровня после лечения средние значения содержания IFN-γ и IL-1α во II триместре беременности были высокими по сравнению с группой с нормоценозом влагалища. В основной группе выявлена обратная сильная корреляционная взаимосвязь в продукции IL-6 и IL-10 (r=-0,858), тогда как между значениями концентрации IL-6 и IL-4 (r=-0,02) корреляция отсутствовала. Для беременных с КВ до лечения показано статистически значимое повышение экспрессии мРНК генов как провоспалительных цитокинов (IL-6, LIF), так и противовоспалительного цитокина IL-10. Клинико-микробиологическая эффективность лечения кандидозного вагинита составила 92,6%, рецидив заболевания в III триместре выявлен у 3 (5,6%) пациенток.
Заключение. Местный иммунитет до лечения у беременных с КВ характеризуется достоверным повышением уровня про- и противовоспалительных цитокинов по отношению к их продукции у беременных с нормоценозом. Патогенетически обоснованным является применение локальных препаратов, так как происходит нормализация воспалительного ответа за счет снижения экспрессии провоспалительных цитокинов.

Актуальность проблемы вагинальной инфекции определяется наиболее высокой ее распространенностью среди всех генитальных воспалительных заболеваний и неблагоприятным влиянием на течение и исходы беременности. В настоящее время увеличивается доля заболеваний нижнего отдела полового тракта, связанных с количественным дисбалансом условно-патогенных микроорганизмов влагалища бактериальной и грибковой природы, которые встречаются у 40–65% беременных, а 5–10% из них страдают рецидивирующим бактериальным вагинозом или кандидозным вагинитом (КВ) [1–4].

Данные литературы свидетельствуют о неблагоприятном влиянии вагинальной инфекции на течение и исход беременности: высокой частоте (более 40%) преждевременного прерывания беременности, развития хориоамнионита и инфекции околоплодных вод, внутриутробной инфекции, послеродовых гнойно-воспалительных осложнений (в 3,5–5,8 раза чаще) и др. [5–8].

В зарубежных исследованиях обсуждается вопрос роли местного и системного иммунитета при КВ [9–11]. Полностью не изучен механизм переключения комменсального микроорганизма Candida albicans на патогенного возбудителя заболевания. Отсутствует единое мнение о специфике клеточного и гуморального иммунитета, ответственного за кандидозную колонизацию [12, 13].

Некоторые исследователи связывают механизм защиты против КВ с активностью клеток Т-хелперов 1-го типа [14]. В связи с тем, что для КВ характерно наличие признаков воспаления с соответствующей лейкоцитарной реакцией в морфологической структуре влагалища, вызывает интерес изучение местного иммунитета для совершенствования профилактики и лечения данного заболевания.

Целью данного исследования стало изучение состояния местного иммунитета у беременных с кандидозным вагинитом, а также оценка эффективности проведения этиотропной терапии.

Материал и методы исследования

Проведено проспективное когортное исследование, в которое были включены 125 беременных женщин. Основную группу составили 54 пациентки с верифицированным диагнозом кандидозный вагинит (КВ), группу сравнения – 71 беременная с нормоценозом влагалища (НЦ). Критерии включения: одноплодная беременность, срок гестации 12–24 недели, отсутствие тяжелой экстрагенитальной патологии.

Для диагностики КВ использовали критерии интегральной микробиологической оценки состояния вагинального микроценоза, включавшей микроскопию мазка, окрашенного по Граму, и культуральное исследование вагинального отделяемого. Ранее были выявлены два варианта КВ: классический вариант, когда дрожжеподобные грибы рода Candida являются моновозбудителем и вегетируют во влагалище на фоне абсолютного доминирования лактобацилл, и сочетание КВ с бактериальным вагинозом, при котором грибы сосуществуют с облигатно-анаэробными бактериями и гарднереллами, а лактобактерии или отсутствуют, или их титр резко снижен. В настоящую работу были включены женщины с классическим вариантом течения КВ.

Лечение пациенток с КВ проводили местным противогрибковым препаратом ливарол (кетоконазол) («Нижфарм», Россия), который обладает фунгицидным и фунгистатическим действием в отношении дерматофитов (Trichophyton spp., Epidermophyton floccossum, Microsporum spp.) и дрожжевых грибков (Candida spp., Pityrosporum spp.), механизм действия препарата заключается в угнетении биосинтеза эргостерола и изменении липидного состав мембраны грибков. Также известна активность кетоконазола в отношении стрептококков и стафилококков. Микробиологический контроль эффективности лечения проводили через 7–10 дней после проведенной терапии и в 32–34 недели беременности, вместе с исследованием уровня цитокинов.

Спектр оценки у беременных местного иммунитета включал исследование в отделяемом цервикального канала провоспалительных (TNF-α, IFN-γ, IL-1α, IL-2, IL-6) и противовоспалительных (IL-4, IL-10) цитокинов иммуноферментным методом (ELISA), уровень которых определялся до лечения в II триместре беременности и в 32–34 недели после лечения одновременно с пациентками группы сравнения. Во избежание деградации РНК взятие материала (вагинальные соскобы) осуществляли в пробирки с раствором гуанидинтиоционата (лизирующий раствор наборы «Проба НК» («ДНК-Технология», Россия)). Для проведения анализа использовали наборы фирмы «Цитокин» (Санкт-Петербург, Россия). Измерение оптической плотности проводили на планшетном анализаторе фирмы BioTek (США) при длине волны 450 нм. Количественное содержание цитокинов в цервикальной слизи нормировали путем пересчета на общий белок в пробах. Определение белка в пробах проводили колориметрическим методом с помощью бицинхониновой кислоты («Sigma», США).

Исследование профиля экспрессии мРНК цитокинов проводили методом ОТ-ПЦР. Осаждение РНК проводили изопропанолом в присутствии соосадителя, с последующими отмывками промывочными растворами. Объем образцов после выделения составил 50 мкл. В работе использовались коммерческие реактивы («ДНК-Технология», ...

Тютюнник В.Л., Кан Н.Е., Балушкина А.А., Карапетян Т.Э.