Акушерство и Гинекология №1 / 2021
Сроки наступления беременности после предгестационной аллоиммунизации и цитокиновый профиль клеток периферической крови у женщин с привычным выкидышем в анамнезе
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия
Важнейшим условием успешного прогрессирования беременности является способность иммунной системы женщины обеспечивать защиту плода, несущего чужеродные антигены отца, от отторжения. Одним из способов индукции иммунологической толерантности, широко используемым при пересадке органов, является предтрансплантационная иммунизация реципиента антигенами донора. На основе положительного опыта использования аллоиммунизации в трансплантологии было предложено применять процедуру иммунизации женщин лейкоцитами их полового партнера – иммуноцитотерапию (ИЦТ) – для предотвращения потерь беременности у пациенток с привычным выкидышем в анамнезе [1–4].
Принципиальную роль в обеспечении иммунологической толерантности к плоду играет цитокиновый профиль иммунокомпетентных клеток. В многочисленных работах показано, что нарушение иммунологической толерантности, как и риск отторжения трансплантата, связаны с воспалительными реакциями, сопровождающимися повышенной продукцией провоспалительных цитокинов [5–7]. Функциональное состояние Т-хелперов (Th) определяет про- или противовоспалительную направленность иммунных реакций. T-хелперы первого типа (Th1), продуцирующие цитокины: интерферон гамма (IFN-γ), интерлейкин-2 (IL-2) и фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), стимулируют воспалительные реакции. Т-хелперы второго типа (Th2), продуцирующие IL-10, IL-4 и IL-5, препятствуют воспалению. Физиологическая беременность развивается на фоне противовоспалительных Th2-реакций [5, 8–10]. В ряде работ установлено, что иммуномодулирующий эффект ИЦТ связан с Th2-поляризацией иммунного ответа, что позволяло рассматривать данный метод коррекции привычного невынашивания беременности как обоснованный и эффективный подход [11–14]. Предполагалось, что многократные предгестационные иммунизации могут усилить противовоспалительный фон при наступлении беременности.
Однако современные данные свидетельствуют о том, что имплантация и ранние стадии I триместра физиологической беременности протекают на фоне провоспалительных Th1-реакций, в то время как противовоспалительный Th2-фон формируется на более поздних этапах беременности [10, 15–17].
Таким образом, развитие избыточных противовоспалительных реакций после ИЦТ может препятствовать наступлению беременности. Очевидно, что оптимальный терапевтический эффект ИЦТ может наблюдаться лишь при «тонкой настройке» Тh1/Th2-баланса, обеспечивая преобладание провоспалительного фона при имплантации и на ранних этапах беременности и его своевременный переход в противовоспалительный фон на более поздних сроках.
Поэтому особую актуальность приобретает оценка взаимосвязи формируемого при предгестационной иммунотерапии Тh1/Th2-фона со сроками наступления беременности. Для изучения влияния различных факторов на имплантацию и ранние сроки беременности широко используется такой показатель, как длительность ожидания наступления беременности (TTP, time to pregnancy) [18–22]. Мы предположили, что наступление беременности в течение первых 6 месяцев после предгестационной аллоиммунизации обеспечивается своевременным развитием сбалансированных Th1/Th2-реакций, а в сроках более 6 месяцев может быть связано с доминированием Th2-реакций. Таким образом, ТТР может являться показателем, отражающим особенности формирования Th1/Th2-реакций при аллоиммунизации.
Поэтому целью исследования явилась оценка зависимости между Тh1/Th2-балансом, сформированным после предгестационной ИЦТ, и ТТР у женщин с привычным выкидышем в анамнезе.
Материалы и методы
В исследовании приняли участие 37 женщин с диагнозом «привычный выкидыш» (N96 по МКБ-10). Критериями включения являлись: возраст женщины от 20 до 40 лет, два или более самопроизвольных прерывания беременности до 20 недель беременности от одного и того же партнера, если в каждом случае был доказан нормальный кариотип абортуса, нормальный кариотип партнеров, нормозооспермия у партнера, самопроизвольное наступление предыдущих беременностей, отсутствие анатомических, аутоиммунных, гормональных нарушений, воспалительных заболеваний органов малого таза в фазе обострения, подписанная пациенткой форма информированного согласия на проведение исследования.
Всем женщинам перед планируемой беременностью проводилась ИЦТ в качестве монотерапии. Процедуру ИЦТ проводили лимфоцитами супруга в предгестационной подготовке в середине фолликулярной фазы двух последовательных менструальных циклов (м.ц.) и во время наступившей беременности в сроке 5–6 недель и 8–9 недель. Методика проведения ИЦТ утверждена на заседании Ученого совета «Научного центра акушерства гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России (протокол №19 от 25 декабря 2012 г.).
Забор крови осуществляли из локтевой вены в стерильную пробирку объемом 50 мл; в качестве антикоагулянта использовали 200 мкл раствора гепарина (концентрация раствора гепарина 5000 МЕ/мл). Образцы крови инкубировали при температуре 37°C в течение 1–1,5 ч. После разделения крови на 2 слоя верхний слой переносили в стер...
