Акушерство и Гинекология №1 / 2014

Структурно-молекулярные перестройки в полипах и окружающем эндометрии в постменопаузе: процессы пролиферации, неоангиогенеза, старения и апоптоза

1 января 2014

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

Цель исследования. Морфологическое изучение процессов роста, неоангиогенеза, старения и апоптоза в полипах и окружающем их эндометрии у женщин в постменопаузе.
Материал и методы. Обследованы 46 пациенток: I группа – пациентки с аденоматозными полипами (АП) (N=11), II группа – с фиброзно-железистыми полипами (ФЖП) (N=17), III группа (контрольная) – с атрофичным эндометрием без полипов (N=18). Оценивались экспрессия маркеров Ki-67, VEGF, ApoCas, PTEN и p16INK4a в эпителиальных и стромальных клетках полипа, окружающего его эндометрия и контрольного эндометрия.
Результаты. Эпителий АП имеет высокий уровень пролиферации, низкую степень апоптоза, а в некоторых случаях изменения, характерные для злокачественной трансформации клеток (потеря PTEN, коэкспрессия p16INK4a и Ki-67). Определена существенная разница между эндометрием, окружающим АП и ФЖП, который в свою очередь отличается от контрольного эндометрия.
Заключение. АП и ФЖП имеют различные механизмы патогенеза и отличаются не только по морфологическому строению, но и по экспрессии маркеров роста, неоангиогенеза, старения и апоптоза в их стромальном и эпителиальном компонентах. Полученные данные следует рекомендовать для усовершенствования дифференцированного подхода к их лечению и решению вопроса об объеме деструкции эндометрия при данной патологии.

Полипы эндометрия (ПЭ) занимают первое место среди внутриматочной патологии у пациенток пожилого возраста и встречаются с частотой 39,2–69,3% [1, 2], а у женщин с кровотечением в постменопаузе – с частотой от 16 до 54% [2–6].

ПЭ рассматривают как локальную доброкачественную опухоль, исходящую из базального слоя эндометрия. Вопрос о клеточном источнике развития ПЭ до настоящего времени не изучен. J. Fletcher утверждает, что полипы эндометрия представляют собой моноклональные образования из генетически поврежденных стромальных клеток эндометрия, с вторичным вовлечением железистого эпителия [7]. Хромосомный анализ стромы полипов выявил в большинстве случаев клональные транслокации, включающие в себя регионы 6р21-22, 12q13-15 или 7q22 [8].

У женщин в постменопаузе механизмы патогенеза ПЭ недостаточно изучены, а гипотеза эстрогенной стимуляции в развитии ПЭ в постменопаузе может рассматриваться как парадоксальная [9]. В литературе обсуждаются механизмы автономности роста ПЭ за счет гиперпродукции факторов роста с одновременной экспрессией и относительного снижения уровня апоптоза. Высказано предположение, что дисбаланс между факторами пролиферативного ответа и апоптоза в сторону первого на ограниченном участке является одним из патогенетических факторов, лежащих в основе развития ПЭ в репродуктивном возрасте [10]. Однако данный факт в ПЭ у женщин в постменопаузе практически не изучался [9]. В проведенных ранее исследованиях по изучению рецепторов к стероидным гормонам, экспрессии маркеров пролиферации и апоптоза в ПЭ получены весьма противоречивые данные [10–14]. Это можно объяснить тем, что в группы объединялись больные с давностью постменопаузы от 1 года до 47 лет, больные с приемом ЗГТ или тамоксифена в анамнезе, а самое главное, как мы считаем, это отсутствие учета гистологического типа ПЭ.

Целью нашего исследования стало морфологическое изучение процессов роста, неоангиогенеза, старения и апоптоза в полипах и окружающем их эндометрии у женщин в постменопаузе.

Материал и методы

В исследовании были включены 46 женщин, из них в основную группу – 28 морфологически подтвержденных случаев ПЭ. При разделении ПЭ на подгруппы нами была принята рабочая классификация, по которой были определены 2 группы: аденоматозные (АП) – 11 случаев и фиброзно-железистые (ФЖП) – 17 случаев. В группу сравнения были отобраны 18 пациенток в постменопаузе (более 10 лет) без патологии эндометрия (контрольный эндометрий – КЭ), которым было проведено оперативное лечение по поводу пролапса гениталий. Критериями включения в группу с ПЭ были: постменопауза более 10 лет, наличие ПЭ на фоне атрофичного эндометрия. Критерии включения в группу без ПЭ: постменопауза более 10 лет, атрофичный эндометрий. Критериями исключения для всех групп были: прием гормонально активных препаратов (ЗГТ, тамоксифен) в анамнезе, прием НПВС в течение последних 6 месяцев, гиперплазия эндометрия, аденокарцинома эндометрия, сопутствующие миома матки и аденомиоз, хронический эндометрит, опухоли яичников.

На I этапе исследования был проведен анализ акушерского, гинекологического и соматического здоровья пациенток с ПЭ. Всем пациенткам с подозрением на ПЭ проводилась диагностическая гистероскопия по общепринятой методике [15], далее, при подтверждении диагноза, проводилось гистеророрезектоскопическое локальное удаление ПЭ, биопсия окружающего эндометрия и раздельное диагностическое выскабливание полости матки и цервикального канала.

Далее было проведено иммуногистохимическое (ИГХ) исследование полипов и образцов эндометрия. Иммуногистохимические реакции проводились на серийных парафиновых срезах толщиной 4 мкм, расположенных на стеклах, покрытых L-полизином. Демаскировка антигенов для ИГХ проводилась в ретривере с использованием цитратного буфера (рН 6,0) и при мощности 600 Вт. В качестве первичных антител применялись моноклональные и поликлональные антитела к ApoCas (Novocastra, Великобритания), Ki-67 (клон MIB-1, DAKO, Дания), VEGF-А (Abbiotec, США), PTEN (клон pS380, Epitomics, США), p16INK4a (клон R1473, AbCam, Великобритания). В качестве вторичных антител использовали наборы Dako REALTM EnVisionTM Detection System, Peroxidase/DAB+, Rabbit/Mouse (Code K5007). Ставились положительные и отрицательные контрольные реакции. Отрицательный контроль был представлен срезами, которые подвергались стандартной процедуре иммуногистохимии, но без добавления первичных антител. Положительный контроль для каждого антитела выбирали в соответствии со спецификациями от фирмы производителя. Оценку экспрессии маркеров осуществляли путем подсчета процента окрашенных клеток на 3000 клеток одного типа.

Статистическая обработка проводилась с помощью SPSS17 Statistics 17.0. Статистический анализ проводился непараметрическим методом с помощью U-критерия Манна–Уитни. Для установления корреляции между структурными изменениями и уровнем экспрессии маркеров в паренхиме и строме использовался коэффициент линейной корреляции Пирсона. Критический уровень достоверности нулевой стат...

Коган Е.А., Саттаров Ш.Н., Саркисов С.Э., Файзулина Н.М.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.