Свободная эмбриональная ДНК в плазме крови как предиктор самопроизвольных потерь беременности у женщин с привычным выкидышем

Цель исследования. Выявление связи между уровнями свободной эмбриональной ДНК (cэ-ДНК) в плазме крови в I триместре беременности и самопроизвольным прерыванием беременности в сроках до 22 нед. Материал и методы. Основную группу составили 122 женщины с привычным выкидышем, контрольную – 103 беременные с неотягощенным акушерским и гинекологическим анамнезами. Проведено определение уровней сэ-ДНК (генов SRY и DYS-14) в I триместре беременности методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. У 44 пациенток исследование проведено в динамике с 2-недельным интервалом с 6-й по 20-ю нед гестации. Результаты исследования. Отмечено достоверное превышение уровней сэ-ДНК у женщин с привычным выкидышем по сравнению с показателями при неосложненной беременности (DYS-14 1021,0±660,6 копий/мл по сравнению с 172,4±56,8 копий/мл p<0,01, SRY – 124,4±48,3 по сравнению с 45,3±21,6 копий/мл; p<0,01). У женщин с привычным выкидышем установлен рост значений DYS-14 и SRY с 6-й по 20-ю нед гестации, достоверно превышающий аналогичные показатели в контрольной группе (p<0,05). При сопоставлении уровней сэ-ДНК DYS-14 у женщин, чья беременность завершилась самопроизвольным прерыванием до 22-й нед, по сравнению с показателями беременных, родивших своевременно, были получены достоверные различия (1697,5±980,7 и 841,8±394,8 копий/мл соответственно; р<0,0001). По отношению к гену SRY аналогичные показатели составили 174,077±49,616 и 108,2±37,8 копий/мл (р<0,0001). Заключение. Высвобождение сэ-ДНК в плазму крови беременной до уровней, значительно превышающих таковые при физиологической беременности, может служить предиктором самопроизвольного прерывания беременности в сроках до 22-й нед.

Работа частично поддержана Государственным контрактом Министерства образования и науки РФ №16.522.12.2009 от 29.09.2011.

В настоящее время специалистами, занимающимися пренатальной диагностикой, определена задача
в предельно ранние сроки беременности диагностировать и прогнозировать не только патологию плода, но и гестационные осложнения. Инвазивные методы пренатальной диагностики, обладающие высокой информативностью, повышают риск прерывания беременности, особенно у женщин с осложненным течением гестационного процесса. Особое значение данная проблема приобретает у пациенток с угрожающим и привычным выкидышами, когда возможности инвазивной диагностики на ранних сроках крайне ограничены.

Несмотря на то, что этиология привычного выкидыша чрезвычайно разнообразна, глобально можно выделить два ключевых момента реализации причинных факторов невынашивания беременности: состояние эндометрия и формирующегося эмбриона.

Открытие свободной (внеклеточной) сэ-ДНК, циркулирующей в плазме крови матери, открыло новые возможности неинвазивной пренатальной диагностики плода [6]. Известно, что внеклеточная эмбриональная ДНК может быть обнаружена уже на 4-й нед беременности и ее количество практически линейно нарастает до родов [4]. В отличие от эмбриональных клеток сэ-ДНК быстро исчезает из материнской плазмы, период ее полужизни составляет 16 мин и не определяется уже через 2 ч после родоразрешения.

В последние годы в литературе появляются работы, посвященные прогнозированию осложнений II
и III триместров беременности по уровням сэ-ДНК, определяемой на ранних сроках. Считается, что
сэ-ДНК имеет плацентарное происхождение и поступает в кровь беременной вследствие плацентарного апоптоза [5]. В связи с этим логично предположить, что различные нарушения состояния плаценты будут сопровождаться повышенным выбросом сэ-ДНК в кровоток матери. В ряде работ было показано повышение концентрации сэ-ДНК в крови у беременных с такими осложнениями беременности, как задержка роста плода, плацентарная недостаточность, преэклампсия [2]. Аналогичные работы при привычном выкидыше практически отсутствуют. Высвобождение сэ-ДНК в плазму крови беременной до концентраций, значительно превышающих таковую при физиологической беременности задолго до появления клинических симптомов, может служить предиктором гестационных осложнений, вплоть до самопроизвольного прерывания беременности.

В большинстве случаев патогенетической основой самопроизвольного прерывания беременности является неполноценная имплантация и плацентация. В работах отечественных и зарубежных авторов показано, что с первых дней беременности происходит ограничение роста и инвазии трофобласта, сопровождающееся явлениями угрожающего выкидыша. В этой связи логично было бы предположить, что апоптоз клеток трофобласта приводит к резкому возрастанию сэ-ДНК в кровотоке женщины, в связи с чем становится возможным прогнозирование прерывания беременности.

Целью настоящего исследования явилось выявление связи между уровнями свободной эмбриональной ДНК в плазме крови в I триместре беременнос ти и самопроизвольным прерыванием беременности
в сроках до 22-й нед.

Материал и методы исследования

Проведено проспективное когортное исследование. Основную группу составили 122 женщины с привычным выкидышем, контрольную – 103 беременные с неотягощенным акушерским и гинекологическим анамнезом.

Критерии включения в основную группу:
· срок беременности от 6-й до 8-й нед от первого дня последней менструации;
· нормальный кариотип партнеров;
· привычное невынашивание беременности (наличие в анамнезе 2 и более ранних и/или
поздних потерь беременности от одного и того же партнера);
· информированное согласие женщины на проведение исследования.

Критерии исключения:
· наличие генетических факторов привычных потерь беременности;
· аномалии развития матки у женщины;
· наличие хронических инфекционных и системных аутоиммунных заболеваний.

Данные пациентки представляли группу риска по прерыванию беременности на ранних и поздних сроках, с учетом того факта, что наличие неудач беременности в анамнезе увеличивает их риск при последующей беременности. Так, наличие в анамнезе двух выкидышей повышает риск прерывания последующей беременности до 38%, трех выкидышей – до 45%.

Критерии включения в контрольную группу:
· срок беременности от 6-й до 8-й нед от первого дня последней менструации;
· физиологическое течение беременности на момент обследования;
· неосложненный акушерский и гинекологический анамнезы;
· информированное согласие женщины на проведение исследования.

Критерии исключения:
· наличие хронических инфекционно-воспалительных и системных аутоиммунных заболеваний;
· ...

Федорова Н.И., Тетруашвили Н.К., Файзуллин Л.З., Карнаухов В.Н., Сухих Г.Т.