Связаны ли между собой бактериологические и патоморфологические признаки бактериального простатита? (экспериментальное исследование)

Введение. При дифференциальной диагностике различных категорий простатита (NIH-NIDDK, 1995) в части случаев отмечается диссоциация между тяжестью жалоб, данными физикального обследования и уровнями обсемененности биоматериала. В ряде наблюдений при верификации пороговых показателей микробной нагрузки (104–105 КОЕ/мл) секрета простаты или постмассажной порции мочи пациенты отмечают наличие выраженных симптомов. Тем не менее у части пациентов при более высоких титрах обсемененности клинические проявления и отклонения в объективных показателях не столь существенны.
Цель исследования: оценить в эксперименте взаимосвязь между показателями обсемененности и степенью патоморфологических изменений ткани простаты при инфицировании «эталонным» уропатогеном E. coli в различных титрах.
Материалы и методы. Исследование на лабораторных животных проведено с использованием протоколов FELASA. Работа выполнена на 16 кроликах New Zealand массой 3580 (3300–4410) г, возраст которых составил 25 (23–28) нед. Используемый уропатоген: Е. coli. Титры: 103, 105, 107 КОЕ/мл. Инокуляцию уропатогена производили трансуретрально по модифицированной методике J. C. Nickel. Животные были рандомизированы в 4 группы по 4 особи в соответствии с введенным титром E. coli: 103 КОЕ/мл (1-я группа), 105 (2-я группа), 107 КОЕ/мл (3-я группа) или 0,9% NaCl (4-я группа). Контрольные сроки наблюдения: 1-е, 3-и, 7 и 14-е сутки, по прошествии которых выполняли эвтаназию и вскрытие животных. Из различных участков простатического комплекса (простата+про-
простата+парапростата) формировали 4 биоптата (1А–1D) для бактериологического исследования и 2 биоптата (Р1, Р2) – для морфологического. Для морфометрической оценки деструктивных изменений в ткани простаты в разных группах использовали 3-балльную градационную систему.
Результаты. Согласно данным бактериологического исследования, максимальные совокупные абсолютные/медианные величины обсемененности биоптатов простатического комплекса в период с 1-х по 14-е сутки (∑ [суммарный] титр, 1А–1D) выявлены в 1-й группе – 76 lgКОЕ/мл / 5,00 [4,00; 5,25] lgКОЕ/мл, промежуточные – во 2-й группе (57 lgКОЕ/мл / 3,50 [3,00; 4,00] lgКОЕ/мл), минимальные – в 3-й группе (48 lgКОЕ/мл/3,00 [3,00; 3,25] lgКОЕ/мл). По данным патоморфологического исследования, совокупная максимальная степень гистологических изменений в простате зафиксирована во 2-й группе (∑ балл 84), промежуточная – в 1-й (∑ балл 68), наименьшая – в 3-й группе (∑ балл 64). При сопоставлении посуточных изменений значений обсемененности и номинальных показателей воспалительных поражений в ткани простаты только в 1-й группе графики тенденций имели синхронный тренд – нарастание микробной нагрузки приводило к формированию на 7-е сутки более тяжелых патоморфологических трансформаций. Во 2-й группе на 7-е сутки деструктивные изменения были значительными, показатели обсемененности, напротив, минимальными. В 3-й группе на 3-и и 7-е сутки отмечены выраженные патоморфологические трансформации в тканях, но микробная нагрузка тканей с 1-х суток постепенно снижалась. Кроме того, были определены различия в реактивности изменений в пораженных тканях: в 1-й и 3-й группах выявлена торпидная реакция, сопровождающаяся развитием умеренных воспалительных изменений на 1-е сутки и «скачкообразным» увеличением интенсивности деструкции к 3-м суткам; во 2-й группе имела место рапидная реакция, характеризующаяся формированием более выраженного деструктивного процесса уже с 1-х суток.
Заключение. Установлено, что показатели обсемененности не отражают в полной мере характер и тяжесть патологических изменений в простате. Низкие титры уропатогена индуцируют развитие воспалительного процесса, по выраженности изменений сопоставимого с таковым при более высоких концентрациях. Напротив, инокуляция облигатно-патогенных титров не всегда приводит к выраженному увеличению микробной нагрузки, но обусловливает значительные воспалительные изменения в простате.

Введение. Несмотря на значительное число клинических и экспериментальных исследований, посвященных изучению этиопатогенеза простатита, наличие европейских и отечественных рекомендаций по диагностике и лечению данной группы заболеваний, существует множество аспектов, которые необходимо учитывать при верификации диагноза и определении тактики лечения пациентов [1, 2]. Вопреки существующей парадигме о преобладании в структуре заболеваемости простатитом абактериальных форм (категории IIIa и IIIb, согласно NIH-NIDDK, 1995), имеются публикации, в которых оспаривается данная точка зрения и обосновывается мнение, в соответствии с которым распространенность бактериального простатита (категории II) в структуре различных форм простатита может быть значительно выше общепризнанной (5–10%) [3–5].

При обследовании пациентов с простатитоподобными симптомами одними из ключевых методов верификации диагноза служат проба Meares–Stamey и препостмассажный тест Nickel [6]. В рутинной практике, ориентируясь на показатели обсемененности (микробной нагрузки) секрета простаты/постмассажной порции мочи и уровень лейкоцитов, клиницист проводит дифференциальную диагностику бактериальных и абактериальных форм заболевания. Однако в некоторых случаях отмечается несоответствие между уровнем микробной нагрузки эксприматов, характером предъявляемых жалоб и данными физикального обследования. Так, при пороговом уровне обсемененности (104–105 КОЕ/мл) секрета простаты/постмассажной порции мочи имеются выраженные простатитоподобные симптомы, в первую очередь боль и дизурические расстройства, при более высоких показателях обсемененности биоматериала клинические проявления и отклонения в объективных показателях, наоборот, не столь существенны.

Формирование органических нарушений в простате при воспалении определяется множеством индивидуальных факторов реактивности организма. Кроме того, при субъективной оценке возникших изменений, которые пациенты озвучивают в виде жалоб, значительную роль играют исходный психоэмоциональный статус, когнитивные способности и ментальность. Тем не менее приоритетным направлением в данной научной работе служит изучение первичного субстрата, опосредующего развитие воспалительной реакции при бактериальном простатите.

Цель исследования: оценить в эксперименте взаимосвязь между показателями обсемененности и степенью патоморфологических изменений ткани простаты при инфицировании «эталонным» уропатогеном E. coli в различных титрах.

Материалы и методы. Этическое заявление. Эксперимент с использованием лабораторных животных разработан и проведен в соответствии с положениями и требованиями, отраженными в международных и отечественных регулирующих руководствах (согласно Rus-LASA), рекомендациями ARRIVE и одобрен локальным независимым этическим комитетом ФГБОУ ВО РостГМУ Минздрава России на основании представленного дизайна (протокол № 16/17) [7–10].

Лабораторные животные. Работа проведена на 16 половозрелых кроликах New Zealand массой 3580 [3480; 3695] г, возраст которых составил 25 [24; 26] мес. Содержание животных в виварии осуществляли в соответствии с ГОСТ 33215-2014 и ГОСТ 33216-2014 [22–23]. Рацион на особь: 150 г сухого гранулированного полнорационного корма, 200 мл жидкости. Период адаптации к новым условиям обитания перед экспериментом – 7 дней.

Уропатоген. В качестве инфицирующего агента использован штамм E. сoli № 32, идентифицированный посредством бактериологического исследования секрета простаты по разработанной методике (патент RU 2452774 C1 № 2011103414/10 от 31.01.2011) у пациентов с простатитом категории II (NIH-NIDDK, 1995), полученным путем проведения пробы Meares–Stamey. Титрование культуры уропатогена осуществляли методом серийных разведений в фосфатно-буферном растворе до достижения концентраций 103, 105, 107 КОЕ/мл за 24 ч до эксперимента.

Рандомизация. После окончания периода адаптации для минимизации ошибок отбора (selection bias) животные случайным образом распределены на 4 группы (по 4 особи в каждой) по основному критерию – инфицирующей дозе уропатогена. В 1-й группе она составила 103 КОЕ/мл, во 2-й – 105 КОЕ/мл, в 3-й – 107 КОЕ/мл. Животным 4-й, контрольной, группы вводили 0,9%-ный раствор NaCl. На постинфекционном этапе c целью снижения количества ошибок, связанных с ходом эксперимента (performance bias), выполняли «ослепление» рабочей группы посредством шифрования каждой инфицированной особи путем присвоения идентификационного кода.

Воспроизведение бактериального простатита в эксперименте. В зафиксированном положении животного на спине под комбинированной анестезией после предварительной обработки наружных половых органов местными антисептиками выполняли топическую трансуретральную инокуляцию инфектанта (1,0 мл) по методике, разработанной J. C. Nickel et al. [11], с помощью катетера Foley (с внесенными конструкторскими изменениями) в простатический отдел уретры (ПОУ), изолируя баллончиком катетера верхние мочевыводящие пути и мочевой пузырь на уровне шейки последн...

Р.С. Исмаилов, Ю.Л. Набока, С.С. Тодоров, М.И. Коган