Акушерство и Гинекология №8 / 2016

Уровень экспрессии гена HAS2 в кумулюсных клетках как предиктор исхода программ экстракорпорального оплодотворения

27 августа 2016

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

Цель исследования. Поиск молекулярно-генетический маркеров для оценки качества эмбрионов с высоким потенциалом к имплантации с целью повышения эффективности лечения бесплодия при помощи методов ВРТ.
Материалы и методы. В ходе ретроспективного исследования случай-контроль обследованы 39 пациенток, проходивших программу ЭКО (ИКСИ). Пациентки были разделены на 2 группы в зависимости от исхода лечения: I группа – 14 женщин, у которых в результате лечения наступила клиническая беременность, II группа – 25 женщин с отсутствием наступления беременности. Был исследован уровень экспрессии 5 генов в кумулюсных клетках методом ОТ-ПЦР в реальном времени: гиалуронан-синтетазы 2 (HAS2), простагландина синтетазы 2 (PTGS2), гена гремлина (GREM1), версикана (VCAN) и инозитол-трифосфат 3 киназы А (ITPKA).
Результаты. Повышение уровня экспрессии мРНК гена HAS2 в 1,5 раза (p=0,018) наблюдалось в группе женщин, у которых в результате лечения наступила клиническая беременность. При этом не было выявлено статистически значимых различий между качеством перенесенных эмбрионов и показателем наступления клинической беременности.
Заключение. Оценка уровня экспрессии HAS2 в кумулюсных клетках может служить малоинвазивным тестом, применяемым в клинической практике для оптимизации выбора переносимых эмбрионов с целью повышения результативности программ ЭКО.

В настоящее время вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) широко применяются для лечения бесплодия, и с каждым годом количество пациентов, проходящих программу ЭКО, увеличивается, однако процент эффективности лечения остается достаточно низким [1].

Основной задачей стимуляции функции яичников в программах экстракорпорального оплодотворения является получение достаточного количества фолликулов и зрелых ооцитов с целью выбора большего числа эмбрионов высокого качества для переноса в полость матки [2]. Одним из ведущих этапов успешного лечения бесплодия при использовании методов ВРТ является выбор эмбриона с высоким потенциалом к имплантации [3, 4], однако в настоящее время качество переносимых эмбрионов оценивается согласно морфологическим критериям, включающим скорость и своевременность деления клеток, форму бластомеров, степень фрагментации и другие [5].

Точность такого метода отбора эмбрионов недостаточно высока, хотя его использование и привело к значительному повышению результативности программ ЭКО [6]. Таким образом, дальнейшее развитие точных малоинвазивных объективных методов оценки качества ооцитов и эмбрионов с высоким потенциалом к имплантации является одной из наиболее важных направлений репродуктивной медицины [7, 8].

Известно, что процесс фолликулогенеза и оогенеза напрямую зависит от взаимосвязи между ооцитом и окружающими его соматическими клетками [9]. В процессе фолликулогенеза на этапе образования полости внутри фолликула соматические клетки дифференцируются на 2 различных анатомических и функциональных слоя: клетки муральной гранулезы, выстилающие полость фолликула и ответственные за стероидогенез, и кумулюсные клетки, непосредственно окружающие ооцит [10]. В конечном итоге формируется зрелый ооцит-кумулюсный комплекс (ОКК), в котором кумулюсные клетки остаются тесно связанными с ооцитом посредством специальных щелевых контактов, позволяющих осуществлять метаболический обмен и транспорт сигнальных молекул [11]. Таким образом, окружающие ооцит соматические клетки оказывают непосредственное влияние на рост и развитие фолликула, возобновление мейоза, регулируют транскрипционную активность, а также ядерное и цитоплазматическое созревание ооцита за счет активации различных сигнальных путей [12].

Ооцит, в свою очередь, продуцирует растворимые факторы роста (ооцит секретируемые факторы – OSF) – фактор роста и дифференциации 9 (GDF9) и костный морфологический белок-15 (BMP-15), необходимые для роста окружающих фолликулярных клеток на разных этапах развития [10]. Эти факторы роста активируют сигнальные пути и индуцируют экспрессию ряда генов, регулирующих широкий спектр функций гранулезных и кумулюсных клеток, включающий дифференцировку, пролиферацию, апоптоз и лютеинизацию [10, 13].

Помимо этого, ооцит-секретируемые факторы регулируют экспрессию ряда генов, ответственных за процесс экспансии кумулюсных клеток, характеризующийся ростом кумулюсных клеток с одновременной потерей тесных контактов между клетками [7, 14]. В процессе экспансии кумулюсные клетки продуцируют гиалуроновую кислоту, которая откладывается на экстрацеллюлярном матриксе, связывающем вместе ооцит и кумулюсные клетки [15]. Эта уникальная способность клеток кумулюса подвергаться экспансии необходима для нормального развития ооцита и его овуляции [16].

Таким образом, связь между ооцитом и кумулюсными клетками является двунаправленной: кумулюсные клетки ответственны за развитие и созревание ооцитов, а ооциты, в свою очередь, играют важную роль в пролиферации и развитии окружающих их фолликулярных клеток [17]. Жизненно важная роль кумулюсных клеток заставила ученых сосредоточиться на их исследовании [8, 18].

Цель исследования: поиск молекулярно-генетических маркеров для оценки качества эмбрионов с высоким потенциалом к имплантации с целью повышения эффективности лечения бесплодия при помощи методов ВРТ.

Материал и методы исследования

На базе отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия и лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава Росс...

Сафронова Н.А., Калинина Е.А., Донников А.Е., Бурменская О.В., Макарова Н.П., Зобова А.В., Алиева К.У., Горшинова В.К., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.