Вазоактивные факторы эндотелия у женщин с бедным и субоптимальным ответом яичников при лечении бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий

Цель: Исследовать содержание вазоактивных факторов эндотелия – эндотелина-1 и конечных метаболитов оксида азота в крови и фолликулярной жидкости, а также уровень эндотелиальной и индуцибельной NO-синтаз (eNOS и iNOS) в кумулюсных клетках у женщин с различными исходами гормональной стимуляции яичников при лечении бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
Материалы и методы: В рамках простого открытого сравнительного клинического испытания в параллельных группах были исследованы маркеры эндотелиальной дисфункции у 71 женщины Волгоградской области в возрасте до 42 лет включительно, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ. В контрольную группу с нормальным и высоким ответом на стимуляцию яичников гонадотропинами вошла 31 женщина (получено 10 и более ооцитов), в группы с субоптимальным (получено 5–9 ооцитов) и бедным ответом (получено 4 и менее ооцитов) – по 20 женщин в каждую. У всех пациенток уровень антимюллерова гормона был выше 1,2 нг/мл. 
В крови и фолликулярной жидкости методом иммуноферментного анализа определяли уровень эндотелина-1, в лизатах кумулюсных клеток – количество eNOS и iNOS. Концентрацию конечных метаболитов оксида азота – нитрит- и нитрат-ионов в сыворотке крови и фолликулярной жидкости оценивали по методу Метельской В.А. и Гумановой Н.Г. (2005). 
Результаты: Было обнаружено, что у женщин с бедным ответом уровень эндотелина-1 и конечных метаболитов NO в сыворотке крови был значительно выше относительно показателей пациенток с высоким и нормальным ответом. Количество iNOS в лизатах кумулюсных клеток у женщин с субоптимальным и бедным ответом также было больше по сравнению с контрольной группой, что в совокупности с повышенной концентрацией нитрит- и нитрат-ионов может свидетельствовать об образовании сильного окислителя пероксинитрита, способного вызывать необратимые повреждения в клетках у пациенток с бедным ответом.
Заключение: Изменение количества вазоактивных факторов эндотелия может служить причиной сниженного ответа на стимуляцию яичников гонадотропинами при лечении бесплодия методами ВРТ. Дальнейшее изучение механизмов, определяющих качество и количество получаемых ооцитов, позволит адаптировать подходы к лечению бесплодия с учетом индивидуальных потребностей и увеличить частоту наступления беременности.

Вклад авторов: Перфилова В.Н., Тихаева К.Ю. – концепция и дизайн исследования, редактирование текста; Музыко Е.А. – сбор и обработка материала, написание текста статьи; Кустова М.В. – сбор и обработка материала, статистический анализ данных; Мухина А.В., Фокина А.Ю., Журавлева Е.И. – сбор и обработка материала.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: Работа выполнена при поддержке Российского научного фонда в рамках проекта № 23-25-00067 «Роль эндотелия в регуляции созревания ооцита при лечении бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий».
Одобрение Этического комитета: Дизайн клинического испытания был одобрен локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России, протокол № 049 от 13 февраля 2023 г.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Перфилова В.Н., Музыко Е.А., Тихаева К.Ю., Кустова М.В., 
Мухина А.В., Фокина А.Ю., Журавлева Е.И. Вазоактивные факторы эндотелия у женщин с бедным и субоптимальным ответом яичников при лечении бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий.
Акушерство и гинекология. 2024; 3: 89-95
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2023.279

На сегодняшний день проблема бесплодия является одной из наиболее острых в сфере репродуктивного здоровья. Согласно данным Всемирной организации здравоохранения, заболевание касается от 48 млн пар до 186 млн человек в мире [1]. Следует отметить, что женское бесплодие наблюдается в 50–80% случаев. В разных регионах Российской Федерации частота бесплодия составляет от 17,2 до 24% и не имеет тенденции к снижению [2].

Для лечения женского бесплодия активно используются вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ). Их эффективность определяет ряд факторов – возраст пациенток, состояние эндометрия, качество и количество получаемых ооцитов и другие. Нужно подчеркнуть, что недостаточный ответ яичников на стимуляцию гонадотропинами может отмечаться и у молодых женщин с нормальным овариальным резервом. Такой неожиданный и неблагоприятный исход лечения служит причиной отмены цикла терапии, приводит к увеличению числа попыток ВРТ, что повышает медицинские риски и экономические издержки.

Одним из факторов, определяющих качество и количество получаемых ооцитов, служит состояние эндотелия, клетки которого синтезируют ряд биологически активных веществ, участвующих в регуляции работы репродуктивных органов. При эндотелиальной дисфункции, сопровождающей некоторые патологии репродуктивной системы, наблюдается увеличение образования вазоконстрикторов (эндотелин-1) и уменьшение количества вазодилататоров, например, оксида азота (NO), который продуцируется NO-синтазами (NOS). Показано, что у женщин с синдромом поликистозных яичников (СПКЯ) в гранулезно-лютеиновых клетках в 2,2 раза повышается экспрессия мРНК эндотелина-1 по сравнению с женщинами с нормальной овуляцией [3]. В метаанализе, проведенном Meng C. (2019), выявлено, что у пациенток с СПКЯ снижается уровень нитритов в сыворотке крови относительно данных контрольной группы [4].

В этой связи исследование вазорегулирующих факторов, продуцируемых эндотелием, у женщин, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ, будет способствовать повышению эффективности ВРТ и увеличению частоты наступления беременности у пациенток с бедными и субоптимальным ответом.

Цель: исследовать содержание вазоактивных факторов эндотелия – эндотелина-1 и конечных метаболитов оксида азота в крови и фолликулярной жидкости, а также уровень эндотелиальной и индуцибельной NO-синтаз (eNOS и iNOS) в кумулюсных клетках у женщин с различными исходами гормональной стимуляции яичников при лечении бесплодия методами ВРТ.

Материалы и методы

Было проведено простое открытое сравнительное клиническое испытание в параллельных группах с участием 71 женщины Волгоградской области, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ в Клинике №1 ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России (Волгоград, Россия). Средний возраст составил 34,79 (4,26) года.

Критерии включения: возраст от 18 до 42 лет (включительно), уровень антимюллерова гормона (АМГ) более 1,2 нг/мл, наличие письменно оформленного добровольного информированного согласия на участие в клиническом испытании, протокол стимуляции с антагонистами и гонадотропинами в дозе не менее 100 МЕ в сутки.

Критерии исключения: возраст менее 18 и более 42 лет, «мягкие» протоколы стимуляции яичников, отказ от участия в клиническом испытании.

Дизайн исследования

У пациенток, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ, перед стимуляцией были собраны данные о показателях овариального резерва, включающие оценку уровня АМГ и фолликулостимулирующего гормона.

Гормональная стимуляция яичников назначалась врачами Клиники №1 ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России (Волгоград, Россия) в соответствии с клиническими рекомендациями, стандартами и интересами пациента. Были включены случаи гормональной стимуляции яичников, которая проводилась с применением протокола с антагонистами с использованием препаратов гонадотропинов (

Перфилова В.Н., Музыко Е.А., Тихаева К.Ю., Кустова М.В., Мухина А.В., Фокина А.Ю., Журавлева Е.И.