Вероятность неопластической трансформации при различных типах гиперплазии эндометрия

Цель исследования. На основе наиболее информативных показателей экспрессии мРНК генов, предположительно участвующих в развитии гипер- и неопластических процессов эндометрия, определить вероятность малигнизации различных типов гиперплазии. Материал и методы. Проведено клинико-лабораторное обследование, включающее взятие образцов ткани эндометрия у 111 женщин. Основную группу составили 58 пациенток с гиперплазией эндометрия (31 – с простой, 15 – с комплексной, 12 – с атипической), группу сравнения – 16 с высокодифференцированной эндометриоидной аденокарциномой эндометрия, группу контроля – 47 женщин с морфологически неизмененным эндометрием стадии пролиферации (n=26) или стадии секреции (n=21). Методом ОТ-ПЦР произведено изучение мРНК 19 генов регулирующих клеточный цикл, пролиферацию, апоптоз, инвазию, рецепторный фенотип клетки (PTEN, MKI67 (KI67), CCNB1, BIRC5, AURKA, MYBL2, CDKN2A (p16), NDRG1, BCL2, BAX, BAG1, CTSL2, MMP11, ESR1, PGR, CD68, PTGS2 (COX2), CYP19A1, SCUBE2). Результаты. Для создания интегрального критерия вероятности развития эндометриоидной аденокарциномы при помощи бинарной логистической регрессии построена статистическая модель, включающая уровень экспрессии 5 генов – PTEN, PGR, NDRG1, CTSL2, SCUBE2. Площадь под ROC-кривой составила AUC=0,984±0,16, p<0,0001. В результате применения разработанной модели 93,8% образцов морфологически верифицированной эндометриоидной аденокарциномы классифицированы верно, 19% образцов ПГЭ, 20% – КГЭ и 42% – АГЭ были отнесены в зону высокой вероятности неопластической трансформации эндометрия. Заключение. При помощи математических критериев из 19 изученных генов выделены 5 наиболее значимых: PTEN, PGR, NDRG1, CTSL2, SCUBE2. На их основе предложена статистическая модель в виде линейного уравнения, дающая возможность объективно определить группу пациенток с предположительно повышенным онкологическим риском. Они заслуживают особого внимания, диагностического мониторинга, модификации факторов риска, проведения длительной адекватной гормонотерапии или оперативного лечения.

Работа частично поддержана Государственным контрактом Министерства образования и науки РФ №16.522.12.2009 от 29.09.2011.

Проблема гиперплазии эндометрия (ГЭ) не теряет актуальности ввиду широкой ее распространенности, ассоциации с маточными кровотечениями и риском малигнизации. Ее решение особенно важно при нереализованной генеративной функции, ввиду неуклонного роста заболеваемости раком эндометрия (РЭ) среди социально активных женщин [1]. По данным National Institute Cancer 7,5% случаев РЭ приходится на возраст до 45 лет [2]. По данным статистики в Российской Федерации за пятилетие (2004–2009 г.) заболеваемость РЭ увеличилась на 17,3%. В структуре злокачественных новообразований у женщин он занимает 2-е место после рака молочной железы (Россия, Белоруссия, Украина) [1].

Течение ГЭ может иметь разнонаправленный характер – от рецидивирования и прогрессирования до спонтанной регрессии, которая наблюдается в 40–60% случаев [3, 4]. Данные информационной базы PubMed свидетельствуют об увеличении публикаций по проблеме ГЭ. Основное внимание уделяется поиску новых информативных диагностических маркеров, исходя из патогенетической роли гиперэстрогении, активации ангиогенеза, дисбаланса процессов пролиферации и апоптоза, молекулярно-генетических и эпигенетических нарушений. Однако надеяться на существование универсального диагностического признака едва ли возможно, об этом свидетельствуют разноречивые результаты исследований. В одних работах указывается на роль потери экспрессии PTEN, мутации генов репарации, нарушения соотношения апоптотического индекса BCL2/BAX [5], в других – на снижение экспрессии COX2 и увеличение экспрессии р16 [6], в третьих отмечается низкая прогностическая значимость всех предложенных маркеров [7]. Вероятно, причиной этих разногласий является многообразие клинических форм ГЭ, что приводит к отсутствию единых международных рекомендаций по тактике ведения больных с ГЭ. Можно полагать, что не во всех случаях оправдана гормонотерапия, в одних своевременно должно проводиться оперативное лечение, в других тактика ведения может быть выжидательной.

На сегодняшний момент в качестве прогностических критериев рассматривается широкий спектр показателей, связанных с разными звеньями патогенеза ГЭ. Однако для практического применения актуально создание интегрального прогностического критерия на основе наиболее значимых предикторов. Такие задачи решаются путем применения статистических методов многофакторного анализа для оценки полученных в эксперименте данных. Этот подход был выбран для достижения поставленной цели.

Цель исследования: на основе наиболее информативных показателей экспрессии мРНК генов, предположительно участвующих в развитии гипер- и неопластических процессов эндометрия, определить вероятность малигнизации различных типов ГЭ.

Материал и методы исследования

Проведено клинико-лабораторное обследование 58 женщин с ГЭ (средний возраст 44,2±4,6 года, индекс массы тела (ИМТ) 28,6±4,6 кг/м2); 59,2% из них находились в репродуктивном возрасте, 40,8% – в пременопаузе. В соответствии с типом ГЭ (по классификации ВОЗ) [8] были сформированы группы: в 1-ю включена 31 пациентка с простой ГЭ (ПГЭ), во 2-ю – 15 с комплексной ГЭ (КГЭ), в 3-ю – 12 с атипической (АГЭ) (во всех случаях комплексной).

Клиническая характеристика больных по группам представлена в таблице. Как видно, ПГЭ и КГЭ клинически схожи, для них характерны маточные кровотечения, возникающие после задержек менструаций. Существенных различий по возрасту, ИМТ, частоте пролиферативных процессов миометрия не обнаружено (p>0,05). АГЭ по сравнению с ПГЭ и КГЭ выявлялась у женщин более молодого возраста, в каждом четвертом случае не имела клинической манифестации, формировалась на фоне регулярного ритма менст­руаций (p<0,05). В этих случаях показаниями к проведению гистероскопии и раздельного диагностического выскабливания были результаты ультразвукового исследования или ановуляторное бесплодие.

Для построения статистической модели неопластической трансформации исследовано 16 образцов ткани высокодифференцированной эндометриоидной аденокарциномы эндометрия (ЭА). Средний возраст пациенток в этой группе составил 46,2±2,1 года, 30,8% находились в позднем репродуктивном возрасте, 69,2% – в пременопаузе, средний ИМТ составил 30,1±4,2. Контролем послужили образцы эндометрия фазы пролиферации (n=26) и секреции (n=21), полученные от здоровых женщин репродуктивного возраста без воспалительных заболеваний органов малого таза и внутриматочной патологии. Исследование одобрено этическим комитетом ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинаталогии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.

В качестве маркеров, характеризующих функциональное состояние клеток, были выбраны показатели экспрессии генов, регулирующих пролиферацию и клеточный цикл (MKI67 (KI67), CCNB1, BIRC5, AURKA, MYBL2, CDKN2A (p16), NDRG1), инвазию (CTSL2, MMP11), апоптоз (BCL2, BAX, BAG1), рецепторный фенотип клетки – эстрогеновый (...

Думановская М.Р., Чернуха Г.Е., Бурменская О.В., Донников А.Е., Трофимов Д.Ю.