Влияние генетической тромбофилии на тяжесть течения гемолитико-уремического синдрома у детей

24.06.2015
857

1 ГБУЗ «Детская клиническая больница Святого Владимира», Москва; 2 ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова»; 3 ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» МЗ РФ; 4 ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского»

Цель. Изучить влияние генетически обусловленной тромбофилии на тяжесть течения гемолитико-уремического синдрома (ГУС) у детей.
Материал и методы. Обследованы 47 пациентов с типичной формой ГУС (средний возраст – 19,3±2,1 месяца). Методом ПЦР-масс-спектрометрии и ПЦР-рестрикционного анализа исследованы генетические маркеры тромбофилии: алелльный полиморфизм генов фибриногена (FGB), протромбина (PTG), метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), ингибитора активатора плазминогена (PAI-1), фактора V Лейден (F5), тромбоцитарного рецептора фибриногена (ITGB3).Проведена оценка влияния полиморфизма изучаемых генов системы свертывания на клинические проявления ГУC (длительность анурии, олигурии, гиперазотемии, анемии, диализной терапии, выраженность тромбоцитопении, протеинурии в остром периоде и при выписке).
Результаты. У детей с ГУС по сравнению с распределением в популяции в 2 раза чаше встречался гомозиготный генотип генов MTHFR и ITGB; существенно чаще – гетерозиготы генов FGB и PAI-1. Дети с мутантным вариантом полиморфизма гена MTHFR С677Т представляют группу с более тяжелым течением ГУС. У пациентов с «протромбогенным генотипом» гена FGB также отмечены более длительная анемия, анурия, гиперазотемия, диализная терапия. Наличие гетеро- и гомозиготных генотипов гена PAI-1 4G(675)5G и ITGB3 С176Т влияло на длительность анурии, диализной поддержки и периода восстановления почечных функций.
Заключение. Выраженность клинических проявлений ГУС определяется «протромбогенным генотипом» генов MTHFR, ITGB, FGB и PAI-1.

Введение

Исследования последних лет позволили установить связь между развитием тромбозов различной локализации и генетически обусловленной тромбофилией в отсутствие традиционных факторов риска. Вероятность формирования гиперкоагуляционного состояния возрастает с числом выявленных «прокоагулянтных» генотипов. При ГУС развитие микроциркуляторных тромбозов служит основным клиническим проявлением заболевания и поражение почек, как правило, сочетается с тромботической микроангиопатией сосудов головного мозга, легких, кишечника, печени, сердца, приводя к развитию полиорганной недостаточности с нарушением витальных функций. Роль тромбофилии в развитии патологии человека хорошо изучена в акушерской практике, неврологии, кардиологии, нефрологии [1–3]. Возможность поражения сосудов микроциркуляторного русла с развитием тромботической микроангиопатии была четко установлена при антифосфолипидном синдроме. Недавние исследования продемонстрировали развитие нефропатии у больных с «протромбогенными генотипами» генов MTHFR C677T, PAI-1 -675 4G/5G, FGB-455 G/A, ITGB3 L33P и доказали, что наличие мультигенной тромбофилии способствует более быстрому прогрессированию гломерулонефритов [1]. До настоящего времени роль наследственной тромбофилии в развитии и прогрессировании тромботической микроангиопатии у пациентов с ГУС, при котором почки являются главным органом-мишенью для тромбоза сосудов малого калибра, до сих пор не изучена. Комплексное изучение ассоциаций генетических маркеров тромбофилии, клинических особенностей ГУС может расширить представление о прогностических факторах, отдельных патогенетических механизмах, особенностях течения и подходах к лечению данного синдрома.

Целью настоящего исследования стало изучение влияния генетически обусловленной тромбофилии на характер течения ГУС у детей.

Материал и методы

В исследование включены 47 пациентов с типичной формой ГУС в возрасте от 5 до 62 месяцев (19,3±2,1 месяца), из которых в возрасте от года до 3 лет были 59,6% (n=28); до года – 27,7% (n=13) и старше 3 лет – 12,8% (n=6) детей. Среди пациентов преобладали мальчики (66%, n=31).

Обследование включило стандартный набор клинико-лабораторных тестов, применяемых в отношении всех больных острой почечной недостаточностью. Всем больным исследовался аллельный полиморфизм шести различных генов системы свертывания крови: метилентетрагидрофолатредуктаза (MTHFR С677Т); ген протромбина (PTGG20210A); V фактора свертывания крови (FVLeidenG1691A); фибриногена (FGBG455A); тромбоцитарного рецептора фибриногена ITGB3 T176CL33P и ингибитор активатора плазминогена (PAI-1 4G/5G 675).

При анализе аллельных полиморфизмов генов выявлен нормальный генотип – «дикий», когда отсутствовали замены, гетерозиготный – при замене 1-го аллеля, либо гомозиготный – при замене 2 аллелей.

Методика исследования ДНК-полиморфизмов представлена межклинической лабораторией молекулярных методов диагностики Первого МГМУ им. И.М. Сеченова (зав. лаб. к.м.н. Е.М. Пальцева).

Для определения полиморфных аллелей генов MTHFR С677Т, PTGG20210A, FVLeidenG1691A, FGBG455A, ITGB3 T176CL33P использован метод полиморфизма длины рестриктивных фрагментов (ПЦР-ПДРФ); а гена PAI-1 4G/5G 675 – метод однонитевого конформационного полиморфизма ДНК (ПЦР- SSCP) (табл. 1).

Статистический анализ проведен на персональном компьютере с использованием статистического пакета SPSS-21.0. Посредством сравнения средних величин с использованием критерия Стьюдента проведена оценка параметрических данных. Правильность распределения событий в группах оценивалась с помощью сравнения с нулевой гипотезой. Во всех группах распределение было правильным и значимо не отличалось от нулевой гипотезы. При р

Результаты

Среди 47 пациентов с ГУС 18 (38,3%) имели преобладающий в популяции генотип (G/G) («дикий») гена β-цепи фибриногена (FGBG(455)A), 26 (55,3%) пациентов обладали гетерозиготным генотипом (G/A) и лишь 3 (6,4%) детей оказались носителями гомозиготного (A/A-«мутантного») генотипа (рис. 1).

Сравнение длительности анурии у больных с различными генотипами гена фибриногена показало, что у пациентов с носительством генотипа A/A значение этого показателя достоверно превосходило таковое у больных, имеющих «дикий» и гетерозиготный генотипы (р=0,007 и р=0,034). Длительность анемии у детей с генотипами G/G и G/A была соизмеримой и почти в 2 раза меньшей по сравнению с носителями генотипа А/А. Дети с мутантным генотипом А/А имели более выраженную тромбоцитопению по сравнению с носителями генотипов G/G и G/A (табл. 2).

У больных с генотипом А/А средняя продолжительность гиперазотемии почти вдвое превышала тако...

Список литературы

  1. Козловская Н.Л., Боброва Л.А. Генетическая тромбофилия и почки. Клиническая нефрология. 2009;3:23–34.
  2. Макацария А.Д., Бицадзе В.О. Антифосфолипидный синдром, генетические тромбофилии в патогенезе основных форм акушерской патологии. Русский Медицинский журнал (специальный выпуск). 2006;2:10.
  3. Khan S., Dickerman S.D. Hereditary thrombophilia. Thrombosis Jornal. 2006;4:15.
  4. Martiskainen M., Pohjasvaara T., Mikkelsson J. Fibrinogen gene promoter-455 A allele as a risk factor for lacunar stroke. Stroke. 2003;34(4):886–891.
  5. Jacques P.F., Bostom A.G., Williams R.R. Relation between folate status, a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase, and plasma homocysteine concentrations. Circulation. 1996;93 (l):7–9.
  6. Fodinger M., Wagner O.F., Horl W.H., Sunder-Plassmann G. Recent insights into the molecular genetics of the homocysteine metabolism. Kidney Int. 2001;59(78):238–42.
  7. Zou C., Tsukahara H., Hiraoka M. Methylenetetrahydrofolate reductase polymorphism in childhood primary focal segmental glomeru!osclerosis. Nephron. 2002;92(2):449–51.
  8. Jacques P.F., Bostom A.G., Williams R.R. Relation between folate status, a common mutation in methylenetetrahydrofolate reductase, and plasma homocysteine concentrations. Circulation. 1996;93(l):7–9.
  9. Sucker C., Kurschat C. Farokhzad F. The TT genotype of the polymorphism in the methylentetrahydrofolatereductase as a risk factor in thrombotic microangiopathies: resalt from a pilot study. Clin. Appl. Thromb. Hemost. 2009;15:283–8.
  10. Burzotta F., Di Castelnuovo A., Amore C. 4G/5G promoter PAI-1 gene polymorphism is associated with plasmatic PAI-1 activity in Italians: a model of gene-environment interaction. Thromb Haemost. 1998;79:354–8.
  11. Forastiero R., Martinuzzo M. Prothrombotic mechanisms based on the impairment of fibrinolysis in the antiphospholipid syndrome. Lupus. 2008;17:872–7.
  12. Lee A.J., Fowkes F.G.R., Lowe G.D.O., Rumley A. Determinantsof fibrin D-dimerin the Edinburgh Artery study. Arterioscler Thromb Vasc. Biol. 1995;15:1094–7.
  13. Paueksakon P., Revelo M.P, Ma L.J. Microangiopathic injury and augmented PAI-1 in human diabetic nephropathy. Kidney Intern. 2002;61:2142–8.
  14. Crandaliano G., Gesualdo L., Ranieri E. Tissue factor, plasminogen activaror ingibitor-1, and thrombin receptor expression in human crescentic glomerulonephritis. Am. J. Kidney Dis. 2000;35:726–38.
  15. Wang A.Y., Poon P., Lai F.M. Plasminogen activator inhibitor-1 gene polymorphism 4G/4G genotype and lupus nephritis in Chinese patients. Kidney Int. 2001;59:1520–8.
  16. Suzuki H., Sakuma Y., Kanesaki Y. Close relationship of plasminogen activator inhiditor-1 4G/5G polymorphism and progression of Ig-A nephropathy. CI. Nephrol. 2004;62(3):368–73.
  17. Капустин С.И. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза венозного тромбоэмболизма. Дисс. док. биолог. наук. СПб., 2007.
  18. Sheereen S.J., Mammo L. The 4G/5G insertion/deletion polymorphism of the plasminogen activator inhibitor-1 gene is associated with venous thrombosis. J. Thromb Haemost. 2007;5(2):359.
  19. Undas A., Brummel K., Musial J. Pl(A2) polymorphism of beta-3 integrins is associated with enhanced thrombin generation and impaired antithrombotic action of aspirin at the site of microvascular injury. Circulation. 2001;104:2666–72.
  20. Cushman M. Epidemiology and Risk Factors for Venous Thrombosis. Semin Hematol. 2007;44(2):62–9.
  21. Pierangeli S. Antiphospholipid antibodies and the antiphospholipid syndrome: an update on treatment and pathogenic mechanisms. Current. Opinion in Hematology. 2006;13:366–75.
  22. Rosendaal F.R. Venous thrombosis: a multicausal disease. Lancet. 1999:353(9159):1167–73.
  23. Rosendaal F.R. Risk factors for venous thrombotic disease. Thromb Haemost. 1999;82:610–9.

Об авторах / Для корреспонденции

Информация об авторах:
Попа А.В. – врач-анестезиолог-реаниматолог центра гравитационной хирургии крови и гемодиализа ГБУЗ «ДГКБ Св. Владимира»
E-mail: avpopa1@gmail.com
Эмирова Х.М. – доцент кафедры педиатрии ГБОУ ВПО «МГМСУ им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, к.м.н.
Козловская Н.Л. – профессор кафедры нефрологии и гемодиализа ФППОВ ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» МЗ РФ, д.м.н.
Зайцева О.В. – профессор, зав. кафедрой педиатрии ГБОУ ВПО «МГМСУ им. А.И. Евдокимова» Минздрава России, д.м.н.
Абасеева Т.Ю. – старший научный сотрудник отделения детского диализа и гемокоррекции отдела трансплантологии, нефрологии и хирургической гемокоррекции ГБУЗ МО «МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского», к.м.н.

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь