Возможности прогнозирования преждевременных родов путем определения содержания митохондриальной ДНК и структурно-функционального белка VDAC1

Цель. Изучить прогностическую роль определения содержания митохондриальной ДНК (мтДНК) в крови и структурно-функционального белка VDAC1 в плаценте при преждевременных родах.
Материалы и методы. Обследованы 142 пациентки. Группу 1 составили 43 беременные со спонтанными преждевременными родами; группу 2 – 47 случаев преждевременных родов с разрывом плодных оболочек; группу 3 – 52 пациентки с угрожающими преждевременными родами с последующим родоразрешением при доношенном сроке беременности. Наряду со стандартными, в работе применялись следующие методы: определение уровня копийности мтДНК в плазме периферической крови (метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с обратной транскрипцией); определение содержания структурно-функционального белка VDAC1 в плацентах (метод вестерн-блот). Для статистического анализа данных использовали программу SPSS Statistics 23.0 for Windows. Для парного сравнения групп использовали непараметрический критерий Манна–Уитни для несвязанных совокупностей. При сравнении долей применяли критерий χ2.
Результаты. Изучение содержания белка VDAC1 в плаценте показало статистически значимо высокое его содержание при преждевременных родах с разрывом плодных оболочек на сроках 22–27,6 и 28–33,6 недели по сравнению со своевременными родами, а при спонтанных преждевременных родах – при сроке 22–27,6 недели. В плазме периферической крови при физиологически протекающей беременности наблюдалось повышение уровня мтДНК пропорционально сроку гестации, достигая максимальных значений к 37–40 неделям. При преждевременных родах с разрывом плодных оболочек уровень мтДНК на сроках 22–27,6 и 28–33,6 недели был статистически значимо выше, чем при физиологически протекающей беременности, но ниже уровня при своевременных родах. При спонтанных преждевременных родах уровень мтДНК на сроке 22–27,6 и 34–36,6 недели был статистически значимо выше по сравнению с физиологической беременностью и своевременными родами. Определение уровня копийности мтДНК при использовании ROC-анализа с высокой чувствительностью (77%) и специфичностью (93%) позволяет прогнозировать риск преждевременных родов.
Заключение. Выявленные статистически значимые различия в содержании белка VDAC1 в плаценте и уровне копийности мтДНК в плазме периферической крови при спонтанных преждевременных родах и при преждевременных родах с разрывом плодных оболочек, в отличие от физиологически протекающей беременности, указывают на их вовлеченность в развитие данных осложнений беременности. Определение данных маркеров может способствовать своевременной диагностике и началу персонифицированной комплексной терапии, направленной на пролонгирование беременности.

Преждевременные роды (ПР) на сегодняшний день являются важной междисциплинарной проблемой, которая требует решения не только для практических акушеров, но и для неонатальных служб [1–3]. Частота ПР в развитых странах варьирует в пределах от 7 до 9%, а в развивающихся – достигает 20%, не имея тенденции к снижению [4–6]. Дети, рожденные преждевременно, имеют тяжелые последствия для здоровья в виде неврологических, метаболических, когнитивных расстройств, что, несомненно, определяет значимость и необходимость поиска причин, а также методов профилактики данного осложнения беременности [7–9].

На сегодняшний день патогенез ПР до конца не изучен, а предрасположенность к их развитию может быть обусловлена различными факторами риска [10–13]. В ряде публикаций в рамках концепции роли асептического воспаления в генезе ПР особое значение придается так называемым факторам, ассоциированным с повреждением клеточных структур (DAMPs) [14–16]. Эффекторное действие последних, обладающих провоспалительным действием, выполняет роль триггера, вызывающего индукцию ПР [17, 18]. Механизм этого явления остается недостаточно изученным, в связи с чем представляет особый интерес изучение корреляционных зависимостей между уровнями DAMPs митохондриального происхождения (мтДНК, мембранные белки) с вероятностью реализации ПР [10, 14, 19]. По данным литературы, к mtDAMPs также относятся: TFAM (митохондриальный фактор транскрипции), OPA1 (мультифункциональный митохондриальный белок), ответственный за слияние митохондрий, и VDAC1 (митохондриальный мембранный канал). Последний является основным каналом митохондриальной наружной мембраны, обеспечивая диффузию АТФ из митохондрий, играет ключевую роль в опосредованном митохондриями апоптозе, а его дисрегуляция приводит к различным патологическим состояниям [1, 4, 9, 15, 18, 20]. В связи с вышеизложенным, перспективным является изучение митохондриальной ДНК (мтДНК) и VDAC1 для уточнения патогенетических механизмов и прогнозирования ПР.

Цель исследования: изучить прогностическую роль определения содержания мтДНК в крови и структурно-функционального белка VDAC1 в плаценте при ПР.

Материалы и методы

Обследованы 142 пациентки. Принимая во внимание различный генез спонтанных ПР (СПР) и ПР с преждевременным разрывом плодных оболочек (ПРПО), женщины были разделены на группы с учетом патогенетических форм [2, 12, 18]. Группу 1 составили 43 беременные со СПР; группу 2 – 47 беременным с ПР и ПРПО. Кроме того, в группу 3 были включены 52 пациентки с угрожающими ПР с последующим родоразрешением при доношенном сроке беременности.

Критериями включения в исследование для основной группы являлись: одноплодная беременность, наступившая в естественном цикле, беременность с 22 до 36,6 недели с ПР, добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Критериями невключения для всех групп являлись: абдоминальное родоразрешение, тяжелые экстрагенитальные заболевания, акушерская патология, требующая элективного досрочного родоразрешения, задержка роста и пороки развития плода, многоплодная беременность. Всем пациенткам, включенным в исследование, было выполнено стандартное обследование. Проведено изучение клинико-анамнестических данных, особенностей течения, исходов беременностей, а также изучение состояния плодов и новорожденных.

Наряду со стандартными, в работе применялись следующие методы: определение уровня копийности мтДНК в плазме периферическо...

Тютюнник В.Л., Кан Н.Е., Высоких М.Ю., Кокоева Д.Н., Донников А.Е., Сарибекова А.Г., Меджидова М.К.