Акушерство и Гинекология №9 / 2021
Взаимосвязь содержания специфического протеина SERPINA1 в моче беременных с тяжестью преэклампсии и перинатальными исходами
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия
Цель: Выявить взаимосвязь между наличием пептидов α1-антитрипсина (SERPINA1) с тяжестью преэклампсии и перинатальными/неонатальными исходами.
Материалы и методы: Проведен анализ анамнеза, особенности течения беременности, родов, послеродового периода, состояния здоровья новорожденных у 79 пациенток. Изучены образцы мочи, собранные до 34 недели гестации при поступлении беременных в стационар. Все пациентки были разделены на 3 группы: группа 1 (основная) – 44 беременных с преэклампсией; группа 2 (сравнения) – 17 женщин с хронической артериальной гипертензией; группа 3 (сравнения) – 18 пациенток с физиологически протекающей беременностью. В зависимости от выявления SERPINA1 в моче беременных группа 1 разделена на подгруппы: 1а (n=23) – преэклампсия, SERPINA1 положительный (ПЭ Ser+) и 1б (n=21) – преэклампсия, SERPINA1 отрицательный (ПЭ Ser-).
Результаты: Проведенное исследование подтвердило неблагоприятное влияние преэклампсии на состояние плода и новорожденного. Показано, что определение пептидов SERPINA1 в моче беременных прогнозирует более тяжелое течение преэклампсии и сопряжено с высокой частотой формирования задержки роста плода и гипоксии плода. У новорожденных, рожденных женщинами, страдающими преэклампсией с наличием SERPINA1 в моче, отмечается отрицательная корреляция с массой тела, оценкой по шкале Апгар и необходимостью оказания реанимационной помощи, а также длительностью пребывания новорожденного в стационаре.
Заключение: Изучение пептидного профиля мочи – определение пептидов SERPINA1 способствует дифференциальной диагностике степени тяжести преэклампсии с другими гипертензионными расстройствами при беременности, что помогает определить акушерскую тактику и прогностически значимые факторы риска для новорожденного.
Гипертензивные расстройства являются наиболее частыми осложнениями беременности, оказывающими выраженное влияние на состояние здоровья матери, плода и новорожденного ребенка [1, 2]. Среди всех гипертензивных расстройств наиболее грозным патологическим состоянием является преэклампсия, частота которой во всем мире остается высокой и не имеет тенденции к снижению. По данным литературы, в Европе частота преэклампсии составляет 2–5%, в развивающихся странах – 12–15% [3–6]. В России, по данным Министерства здравоохранения, частота преэклампсии составляет 3–7%. При этом развитие данного осложнения ассоциируется с высокой частотой материнской заболеваемости и смертности, а также тяжелыми перинатальными и неонатальными исходами [7–10].
Вышеизложенное свидетельствует о том, что актуальным остается поиск различных биомаркеров преэклампсии, позволяющих не только прогнозировать сроки ее развития, тяжесть данного патологического состояния, но и оценивать их влияние на рост, развитие плода и здоровье новорожденного.
В последние годы широко внедряются новые методы неинвазивной диагностики, основанные на молекулярно-генетических исследованиях. Особое внимание исследователей направлено на изучение пептидома мочи беременных женщин как более доступного неинвазивного метода [11–13]. В качестве ранних маркеров преэклампсии были предложены цепи коллагена α-1 (I), цепи коллагена α-1 (III) и уромодулина, пептиды α1-антитрипсина (SERPINA1), последний из которых является одним из наиболее перспективных пептидных маркеров преэклампсии [7, 14–16] и может использоваться в качестве высокоспецифичного диагностического теста, коррелирующего с тяжестью преэклампсии.
N. Starodubtseva et al. [7] было отмечено, что обнаружение SERPINA1 в моче беременных ассоциируется со степенью повреждения ворсинчатого дерева плацентарной ишемии и гипоксии, обусловливающей задержку роста плода. Поэтому интерес представляет изучение взаимосвязи между выявлением специфического протеина мочи α1-антитрипсина (SERPINA1) у беременных и особенностей течения неонатального периода, что позволит прогнозировать развитие патологических состояний у новорожденных с целью оптимизации подходов к лечению, наблюдению и выхаживанию.
Цель исследования: выявление взаимосвязи между наличием пептидов α1-антитрипсина (SERPINA1) с тяжестью преэклампсии и перинатальными/неонатальными исходами.
Материалы и методы
Проведен анализ анамнеза, особенностей течения беременности, родов, послеродового периода, состояния плодов и новорожденных у 79 женщин, наблюдавшихся в ФГБУ «НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России в период 2018–2019 гг. Все пациентки были разделены на 3 группы: группа 1 (основная) – 41 беременная с преэклампсией (ПЭ); группа 2 (сравнения) – 17 женщин с хронической артериальной гипертензией (ХАГ); группа 3 (сравнения) – 18 пациенток с физиологически протекающей беременностью. При определении пептидомного профиля мочи было отмечено, что основная группа неоднородна. В зависимости от выявления SERPINA1 в моче беременных в группе 1 были выделены подгруппы: 1а (n=23) – ПЭ, SERPINA1 положительный (ПЭ Ser+) и 1б (n=21) – ПЭ, SERPINA1 отрицательный (ПЭ Ser-).
Включение беременных в исследование проводилось по методу подбора пар. Критериями включения в исследование были: одноплодная беременность в сроке от 22 до 40 недель гестации, возраст беременных от 18 до 45 лет, наличие ПЭ (группа 1), ХАГ (группа 2). Критерии исключения: многоплодная беременность, тяжелые формы сахарного диабета, трансплантация внутренних органов, аутоиммунные и онкологические заболевания, хроническая болезнь почек, хромосомные аномалии и врожденные пороки развития плода.
После подписания добровольного информированного согласия, одобренного Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России, у всех пациенток были собраны образцы мочи на сроках до 34 недели гестации при их госпитализации в отделения Центра. Специфическую терапию, направленную на коррекцию патологических состояний беременности на момент забора анализа мочи, пациентки не получали.
После сбора образцы мочи центрифугировали в течение 10 минут с ускорением 2000 g при 4°C. Супернатант хранился при -80°C до проведения исследования. Пептидомный профиль мочи выделялся методом гель-фильтрации и анализировался ВЭЖХ-МС/МС в полном соответствии с разработанными авторами [13] ранее протоколами. Анализ пептидной фракции и градиентная хроматография проводились на нанопоточном хроматографе Agilent 1100 (Agilent Technologies, США) с гибридным масс-спектрометром 7-T LTQ-FT (Thermo Electron, Германия) с колонкой 75 мкм 12 см с фазой Reprosil-PurBasic C18, 3 мкм (Dr. Maisch HPLC GmbH, Германия). Данные МС и МС/МС были получены в зависимом от данных режиме с использованием программного обеспечения Xcalibur (Thermo Finnigan, Сан-Хосе, Калифорния, США). Спектры МС сканирования исходных ионов (диапазон m/z 300–1600 а.е.м.) получали в FTICR с разрешением R=50 000 при m/z 400 а.е.м. (количество накопленных ...
