Значение глутатион-зависимых ферментов антиоксидантной защиты в функциональной активности плаценты человека

Цель исследования. Изучить антиоксидантную систему в центральном и периферическом участках плаценты при невынашивании беременности и оценить вклад глутатион-зависимого звена антиоксидантной защиты плаценты в механизме патогенеза ее дисфункции.
Материал и методы. Образцы тканей плацент женщин, беременность которых самопроизвольно и преждевременно прервалась в сроки до 36 недель беременности, разрушали и центрифугировали при 4оС. Контролем служили ткани плацент женщин, имевших физиологическую беременность, завершившуюся родами в срок. В супернатантах определяли величину общей антиоксидантной активности, содержание небелковых тиоловых групп, величины активностей супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы, глутатионредуктазы и глутатионтрансферазы.
Результаты. Показано, что при самопроизвольном прерывании беременности содержание небелковых SH-групп в плаценте снижается, тогда как уровень активности глутатионпероксидазы достигает максимальной величины в первом триместре и превышает более чем в 1,5 раза значения уровня активности фермента в плацентах женщин с физиологическим течением беременности на протяжении гестации. Активность глутатионтрансферазы при физиологическом течении беременности увеличивается с 24,04±8,11 мкМ GS-2,4-ДНБ/мин мг белка (I триместр) до 55,85±6,44 мкМ GS-2,4-ДНБ/мин мг белка (центр плаценты) и 55,98±5,07 мкМ GS-2,4-ДНБ/мин мг белка (периферия плаценты) (III триместр). При невынашивании беременности активность глутатионтрансферазы в I триместре не отличается от активности фермента контрольной группы и остается низкой на протяжении всей беременности. Разработана модель расчета индекса преждевременного прерывания беременности, в которой ключевая роль принадлежит активностям глутатионпероксидазы и глутатионтрансферазы центрального участка плаценты.
Заключение. Снижение антиоксидантной емкости глутатион-зависимого звена антиоксидантной защиты в плаценте при спонтанном преждевременном прерывании беременности происходит вследствие нарушения баланса в универсальных процессах метаболизма глутатиона. Представленная модель прогноза невынашивания беременности позволяет рассматривать центральные области плаценты наиболее важными участками, ответственными на формирование в ней функциональной активности

Плацента представляет собой орган, который играет динамичную роль в процессах взаимодействия двух организмов – матери и плода. Высокий темп развития плаценты, растущие потребности плода сопровождаются особыми требованиями к метаболическим и гемодинамическим процессам, лежащим в основе функциональной деятельности плаценты [1].

Нарушение функции плаценты, являясь универсальным механизмом акушерской патологии, нередко приводит к спонтанному или индуцированному преждевременному прерыванию беременности. Каскад нарушений метаболизма в плаценте при самопроизвольном преждевременном прерывании беременности может служить моделью для изучения универсальных механизмов, представляющих собой срыв адаптационно-гомеостатических реакций поддержания адекватного обмена между организмами матери и плода [2, 3].

Физиологическая беременность характеризуется развитием окислительного стресса, являющегося одним из центральных механизмов общей системы адаптации к новым условиям организма женщины. Окислительный стресс выполняет в этой ситуации важные физиологические функции, участвуя в запуске механизмов дифференцировки клеток [4]. 
В кратковременный период относительного дисбаланса между генерацией и элиминированием активных форм кислорода (АФК) происходит адаптация механизмов системы антиоксидантной защиты (АОЗ) к нарушению физиологического равновесия. При этом эффективность антиоксидантной системы зависит не столько от абсолютных величин отдельных компонентов системы, сколько от соотношения между ними. Неспособность системы АОЗ противостоять усилению процессов свободно-радикального окисления приводит к значительному ослаблению метаболической функции плаценты. Антиоксидантную систему, компоненты которой защищают организм от избыточного образования АФК, ряд авторов рассматривает как единую, интегрируемую и регулируемую структуру, находящуюся под генетическим контролем [5]. Важная роль в системе АОЗ принадлежит глутатион-зависимому звену, к которому относят глутатионпероксидазу (ГП), глутатионредуктазу (ГР), глутатион-S-трансферазу (ГТ) и окислительно-восстановительную систему глутатиона. Сведения об эффективности глутатион-зависимого звена антиоксидантной системы в разных зонах плаценты (центральные и периферические участки) при самопроизвольном прерывании беременности малочисленны и неоднозначны.

Целью настоящей работы было изучение антиоксидантной системы в центральном и периферическом участках плаценты при невынашивании беременности и оценка вклада глутатион-зависимого звена АОЗ плаценты в механизм патогенеза ее дисфункции, приводящего к акушерской патологии

Материал и методы исследования

Материалом для исследования служили ткани плацент 95 женщин, беременность которых самопроизвольно преждевременно прервалась в сроки до 36 недель беременности (основная группа). Контролем служили ткани плацент 97 относительно здоровых женщин, имевших физиологическую беременность, завершившуюся родами в срок (группа сравнения). У 10 из них беременность была прервана в I триместре беременности (до 13 недель) путем искусственного аборта по желанию женщин, у 15 женщин  во II триместре (до 28-й недели) по социальным показаниям методом интраамниального введения энзапроста, у 72 женщин беременность закончилась срочными родами в 37–40 недель. В основной группе беременность прервалась в сопоставимые сроки. У всех обследованных женщин отсутствовали экстрагенитальные заболевания и акушерские осложнения беременности. Образцы тканей центрального и периферического участков плаценты тщательно отмывали в холодном физиологическом растворе и гомогенизировали в соотношении 1:9 (вес/объем) в ледяном буфере, содержащем 60 мМ КH2PO4 (Вектон, Россия) и 105 мМ КCl (pH 7.4) (Вектон, Россия). Гомогенат центрифугировали при 750 g в течение 15 минут при 4о С. Полученный супернатант центрифугировали повторно при 10 800 g в течение 15 минут при 4оС и использовали для дальнейших исследований. Для оценки общей антиоксидантной активности (АОА) использовали хемилюминесцентную реакцию рибофлавина (ICN, США) в присутствии ионов двухвалентного железа (Вектон, Россия). Для инициации процесса вводили 0,2...

Прокопенко В.М., Павлова Н.Г.