Значение иммуногистохимического определения биомаркеров плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки

Изучали экспрессию биомаркеров Ki-67 и р16INK4a при плоскоклеточных интраэпителиальных поражениях шейки матки. Установлено достоверное различие в экспрессии биомаркера пролиферации Ki-67 в неизмененном многослойном плоском эпителии шейки матки и плоскоклеточных интраэпителиальных поражениях высокой степени, а также в плоскоклеточной карциноме (р<0,5). Что касается экспрессии р16INK4a, то достоверные различия обнаружены между плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями низкой степени, а также высокой степени и плоскоклеточной карциномой шейки матки. Сочетанное определение Ki-67 и р16INK4a способствует более полноценному определению биологической сущности патологического процесса в эпителии шейки матки. Иммуногистохимическое исследование данных маркеров поможет не только более качественной диагностике поражения, но и выбору необходимого объема лечебных мероприятий.

Своевременное выявление плоскоклеточных интраэпителиальных поражений (SIL— англ. Squamous intraepithelial lesions) является крайне важным для снижения заболеваемости и смертности от рака шейки матки [4, 8, 13]. В связи с этим не вызывает сомнения необходимость усовершенствования интерпретации результатов цитологического исследования и биопсии патологически измененной шейки матки. Несмотря на морфологические критерии, позволяющие определить тяжесть предраковых состояний шейки матки, нередко возникают трудности в их диагностике [5, 15]. Вместе с тем для проведения адекватной терапии в гистологическом заключении должна быть отражена сущность патологических изменений шейки матки, позволяющая предположить клиническое течение поражения. Как известно, SIL низкой степени со структурны-ми особенностями легкой дисплазии (CIN1) у 57% женщин подвергаются регрессии и лишь у 1% больных в последующем диагностируется инвазивная плоскоклеточная карцинома, тогда как при SIL высокой степени с признаками тяжелой дисплазии и карциномы in situ (CIN3) преимущественно отмечается персистенция поражения (у 56%), а у 12% женщин — развитие инвазивной карциномы. К сожалению, на основании морфологических критериев высказать суждение о биологической сущности поражения и как следствие о течении SIL не представляется возможным.

В настоящее время для повышения качества диагностики, определения индивидуального прогноза течения поражения шейки матки и обоснованного проведения лечебных мероприятий большое внимание уделяется иммуногистохимическому исследованию экспрессии биомаркеров в тканях пораженной шейки матки [14, 22, 25]. Одним из таких биомаркеров считается антиген Ki-67, определение экспрессии которого применяется для отличия SIL от неизмененного эпителия и его доброкачественных реактивных поражений [21, 26], другим — протеин р16^INK4a, являющийся ингибитором циклинзависимых киназ CDk4 и CDk6, повышенная экспрессия которого связана с инфицированием вирусом папилломы человека (ВПЧ) [2, 19, 27].

Цель исследования состояла в изучении экспрессии Ki-67 и р16^INK4a в ткани неизмененной и патологически измененной шейки матки и возможности использования данных биомаркеров в качестве факторов, определяющих индивидуальный прогноз течения патологического процесса.

Материал и методы исследования

Материалом для исследования служили биоптаты шейки матки 377 женщин, среди которых SIL разной степени тяжести были диагностированы у 53 больных. Последние были разделены на 2 группы. В 1-ю группу (SIL низкой степени) были включены 25 больных в возрасте от 18 до 27 лет (средний возраст 23±2,3 года), в биопсийной ткани которых патологические особенности эпителия шейки матки соответствовали плоской кондиломе и ее сочетанию с легкой дисплазией (CIN1), во 2-ю группу (SIL высокой степени) — 28 больных в возрасте от 25 до 34 лет (средний возраст 28,5±4,7 года), в биоптатах шейки матки которых структурные особенности соответствовали умеренной и тяжелой дисплазии и карциноме in situ (CIN2, CIN2-3, CIN3). Дополнительно были выделены группы сравнения: 11 больных в возрасте от 27 до 37 лет (средний возраст 32,9±4,1 года) с инвазивной плоскоклеточной карциномой (3-я группа) и 9 женщин в возрасте 22-35 лет (средний возраст 27,7±5,6 года) с неизмененным многослойным плоским эпителием (4-я группа).

Иммуногистохимическое исследование проводили на депарафиновых срезах толщиной 4 мкм с использованием моноклональных мышиных антител к ядерному антигену делящихся клеток Кi-67 (1:500, клон MIB-1) и диагностического набора р16^INK4a -kit (1:400, Dako, Дания). В качестве демаскирующего приема применяли нагревание стекол со срезами в трисбуфере в водяной бане при 98˚C в течение 30 мин. Эндогенная пероксидаза была блокирована с помощью инкубац...

Кондриков Н.И., Шамаракова М.В., Горбаче­ва Ю.В.