Значение количественного определения ДНК цитомегаловируса человека в спинномозговой жидкости и крови для диагностики цитомегаловирусного энцефалита у больных ВИЧ-инфекцией

Цель исследования. Определение диагностических чувствительности и специфичности концентраций ДНК цитомегаловируса человека (ЦМВ) в спинномозговой жидкости (СМЖ), лейкоцитах крови и плазме крови для верификации энцефалита ЦМВ-этиологии у больных ВИЧ-инфекцией.
Материалы и методы. Наблюдали 5485 больных ВИЧ-инфекцией, госпитализированных в Инфекционную клиническую больницу № 2 Департамента здравоохранения города Москвы. Поражение ЦНС диагностировано у 1310 пациентов. Исследовано 1667 образцов СМЖ методом ПЦР-РВ (ОТ-ПЦР-РВ) с количественным определением ДНК ЦМВ, РНК ВИЧ, ДНК возбудителей других нейроинфекций; 743 образца сыворотки крови и 3623 образца плазмы крови с количественным определением ДНК ЦМВ. Для статистического анализа применяли пакеты статистических программ Statistica v. 10.0 и SPSS v. 20, язык программирования R. Исследование взаимосвязей проведено с помощью анализа таблиц сопряженности с применением критерия χ2 Пирсона. Поиск ассоциаций количества копий ДНК ЦМВ в биоматериале пациента и наличия ЦМВ-энцефалита проводили с применением ROC-анализа.
Результаты. Манифестная ЦМВИ имела место у 448 (13,4%) из 3333 больных на стадии СПИД. ЦМВ-энцефалит диагностирован у 28 пациентов: 6,3% среди больных ЦМВИ, 0,8% среди пациентов на стадии СПИДа, 4,8% из 584 больных с установленной этиологией поражения ЦНС. Представлены частота выявления и количественные показатели ДНК ЦМВ в лейкоцитах крови, плазме крови и СМЖ. Отсутствие ДНК ЦМВ или выявление ДНК вируса в низких концентрациях в указанных биоматериалах исключало ЦМВ-природу поражения ЦНС. Факт присутствия ДНК ЦМВ в крови и СМЖ не подтверждал наличие ЦМВ-энцефалита. Концентрации ДНК ЦМВ в СМЖ ≥ 16 600 копий/мл, лейкоцитах крови – 4,65 lg копий/105 клеток, плазме крови – 62 700 копий/мл с 95% вероятностью подтверждали ЦМВ-этиологию энцефалита и служили основанием для начала этиотропной терапии.
Заключение. Количественное определение ДНК ЦМВ при исследовании образцов СМЖ и крови методом ПЦР не имеет важного диагностического значения для верификации энцефалита ЦМВ-этиологии у больных ВИЧ-инфекцией.

Установление природы поражения ЦНС у больных ВИЧ-инфекцией по-прежнему является сложной задачей. В реальной клинической практике у значительного количества пациентов диагноз формулируется как «энцефалит неясной этиологии» [1]. Манифестная цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ), нередко протекающая с поражением головного и спинного мозга – одно из наиболее частых и тяжелых вторичных заболеваний у больных ВИЧ-инфекций [2]. У ВИЧ-инфицированных лиц с глубокой иммуносупрессией ЦМВ-энцефалит – ведущая причина выраженных нейрокогнитивных расстройств, достигающих степени деменции [3].

Клиническая расшифровка этиологии неврологической патологии вызывает большие трудности. Дифференциальная диагностика между ВИЧ-энцефалитом, прогрессирующей мультифокальной лейкоэнцефалопатией и ЦМВ-энцефалитом – состояниями, протекающими с интеллектуально-мнестическим синдромом, без проведения исследований спинномозговой жидкости (СМЖ) и крови на наличие ДНК возбудителей нейроинфекций и РНК ВИЧ, крайне затруднителен [4]. Вместе с тем, клиническое значение качественного и количественного содержания ДНК ЦМВ в СМЖ, лейкоцитах крови и плазме крови для подтверждения ЦМВ-природы энцефалита у больных ВИЧ-инфекцией остается не установленным.

Цель исследования – определение диагностических чувствительности и специфичности концентраций ДНК ЦМВ в СМЖ, лейкоцитах крови и плазме крови для верификации энцефалита ЦМВ-этиологии у больных ВИЧ-инфекцией.

Материалы и методы

Проведено клиническое наблюдение и анализ историй болезни 5485 больных ВИЧ-инфекцией (3333 – на стадиях 4Б (СПИД), 4В (СПИД)), находившихся на лечении в Инфекционной клинической больнице № 2 (ИКБ № 2) Департамента здравоохранения города Москвы, за четырехлетний период. Медиана (Ме) возраста пациентов составила 33 года (19–72 года). Мужчин было 3998 (72,9%), женщин – 1487 (27,1%). АРТ получали лишь 17% пациентов. Умерли 593 (10,8%) чел. Поражение ЦНС было диагностировано у 1310 госпитализированных больных ВИЧ-инфекцией, из них умерли 372. Секционные исследования осуществляли в патологоанатомическом отделении ИКБ № 2.

Проводили МР-томографию головного мозга c контрастированием, диагностическую люмбальную пункцию с микроскопическим и биохимическим анализами СМЖ. С целью этиологической расшифровки поражений ЦНС исследовано 1667 образцов СМЖ методом ПЦР-РВ (ОТ-ПЦР-РВ) с качественным или количественным определением РНК ВИЧ, ДНК ЦМВ, ВЭБ, ВГЧ-6 А/В, ВПГ-1,-2, ВВЗ, B.secuhominis, грибов рода Candida, T. gondii, C. neoformans, а также 743 образца сыворотки крови и 3623 образца плазмы крови с количественным определением ДНК ЦМВ. Молекулярно-биологические исследования проводили с использованием наборов реагентов производства ФБУН «Центральный НИИ эпидемиологии» Роспотребнадзора.

Критериями постановки диагноза ЦМВ-энцефалита (энцефаловентрикулита), помимо данных молекулярно-биологических методов, служили: патоморфологическое подтверждение ЦМВ-поражения головного мозга и/или комплекс относительно характерной клинической картины болезни (быстро прогрессирующие нейрокогнитивные нарушения вплоть до развития деменции у большинства больных, скудные и поздно проявляющиеся неврологические симптомы в форме горизонтального нистагма, в ряде случаев – пареза глазодвигательного нерва и невропатии лицевого нерва, головокружения, непостоянных головных болей без повышенной судорожной активности в сочетании с

Шахгильдян В.И., Домонова Э.А., Ядрихинская М.С., Орловский А.А., Тишкевич О.А., Яровая Е.Б.