МикроРНК при сердечной недостаточности и остром отторжении трансплантированного сердца: диагностическая и прогностическая значимость miR-101

Введение. Трансплантация сердца (ТС) остается спасительным методом лечения больных в терминальной стадии хронической сердечной недостаточности (ХСН). Вместе с тем острое клеточное отторжение (ОКО) сердечного трансплантата входит в число основных причин дисфункции трансплантата и смертности реципиентов. Эндомиокардиальная биопсия служит «золотым стандартом» прижизненной диагностики специфических заболеваний миокарда. Поиск новых малоинвазивных лабораторных технологий для раннего выявления патологии сердечного трансплантата чрезвычайно актуален. Известно об участии микроРНК в различных биологических процессах и механизмах иммунного ответа.
Цель – оценка клинической значимости циркулирующих микроРНК (miR-27, -101, -142, -339, -424), а также их сочетаний с анализом стимулирующего фактора роста ST2 при диагностике ОКО трансплантированного сердца.
Материал и методы. В исследование были включены 83 пациента с ХСН, 66 из которых была проведена ортотопическая трансплантация сердца (ТС). Уровни экспрессии 5 микроРНК (miR-27, -101, -142, -339, -424) измеряли до и после ТС методом полимеразной цепной реакции. Уровень ST2 в плазме крови оценивался с помощью иммуноферментного анализа. Верификацию ОКО производили при иммуногистохимическом анализе биопсийного материала.
Результаты. Уровни miR-27 и miR-101 в плазме крови у реципиентов с ОКО достоверно отличались от таковых у реципиентов без отторжения. Наилучшими характеристиками для диагностики ОКО обладал тест на miR-101 в комбинации с ST2 (чувствительность – 66,7%, специфичность – 100%). У пациентов с ХСН уже на этапе дооперационного обследования измерение уровня экспрессии miR-101 значимо для прогноза развития ОКО.
Заключение. Показан высокий потенциал miR-101 в качестве биомаркера ОКО как у реципиентов трансплантированного сердца, так и у пациентов с ХСН. MiR-101 может быть использована в составе мультимаркерных панелей для неинвазивной диагностики и прогноза развития ОКО.

ВВЕДЕНИЕ

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются ведущей причиной смерти и потери трудоспособности населения во всем мире. Количество больных хронической сердечной недостаточностью (ХСН) растет на протяжении последних десятилетий во всех странах на фоне снижения смертности от острых заболеваний и увеличения среднего возраста населения. Распространенность ХСН в популяции определяется факторами риска ССЗ, при этом самыми частыми причинами развития ХСН являются ишемическая болезнь сердца, артериальная гипертония и болезни клапанов сердца.

Трансплантация сердца (ТС) служит спасительным методом лечения больных в терминальной стадии ХСН. Увеличение количества пациентов в листе ожидания ТС и включение в него более тяжелых больных на фоне улучшения стратегии и тактики их ведения сопровождалось существенным уменьшением летальности среди пациентов, ожидающих трансплантацию сердца: так, в 2010 г. этот показатель составил 16,1%, в 2024 г. – 3,2%, что означает снижение относительного риска гибели в 5 раз [1]. Совершенствование схем иммуносупрессивной и дополнительной медикаментозной терапии позволили улучшить отдаленные результаты ТС. Медиана выживаемости реципиентов сердца в течение первого года после ТС составляет 80–90%, а в течение последующих десяти лет – 50–60% [2]. Вместе с тем острое отторжение по-прежнему остается основной причиной дисфункции трансплантата и смертности реципиентов. Эндомиокардиальная биопсия (ЭМБ) является «золотым стандартом» прижизненной диагностики специфических заболеваний миокарда, в частности острого отторжения трансплантата после пересадки сердца, но связана с рядом рисков инвазивного вмешательства.

Поиск новых малоинвазивных лабораторных технологий для раннего выявления отторжения, позволяющих снизить частоту инвазивных диагностических вмешательств, чрезвычайно актуален [3, 4]. Известно, что малые некодирующие молекулы РНК (микроРНК, miR) участвуют в регуляции экспрессии генов, процессов пролиферации и апоптоза, канцерогенеза, воспаления и иммунного ответа [5, 6]. Была показана потенциальная значимость ряда микроРНК для диагностики и прогнозирования ССЗ и посттрансплантационных осложнений у реципиентов сердца [7–10].

В рамках настоящего исследования были отобраны пять микроРНК, участвующих в развитии ССЗ и потенциально значимых в развитии посттрансплантационных осложнений у реципиентов сердца: miR-27, miR-142, miR-101, miR-339 и miR-424 [11].

Среди протеомных биомаркеров была доказана диагностическая эффективность стимулирующего фактора роста-2 (ST2) в отношении развития патологии сердца. Многочисленные исследования продемонстрировали прямую связь ST2 с выраженностью сердечной недостаточности и риском ее неблагоприятного исхода, вследствие чего этот биомаркер был включен в рекомендации Европейского кардио­логического общества (European Society of Cardio­logy, ESC) по диагностике и лечению острой и хронической сердечной недостаточности [12, 13]. ST2 блокирует кардиопротективные, антифибротические и противовоспалительные эффекты лиганда интерлейкина 33 (ИЛ-33) и рассматривается как эффективный маркер острого отторжения пересаженного сердца [14, 15].

Цель исследования – оценка клинической значимости циркулирующих микроРНК (miR-27, -101, -142, -339, -424), а также их сочетаний с анализом ST2 для диагностики острого клеточного отторжения трансплантированного сердца и прогнозирования риска острого клеточного отторжения (ОКО) у пациентов с ХСН до трансплантации.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Характеристика пациентов

В исследование были включены 83 пациента с ХСН III–IV функциональных классов по Нью-Йоркской классификации NYHA в стадии IIБ–III по классификации Василенко – Стражеско. 66 из них впоследствии была проведена ортотопическая ТС в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова» Минздрава России (НМИЦ ТИО им. ак. В.И. Шумакова). Длительность наблюдения составила 404 [346,7; 783,5] сут. с момента выполнения ТС. Группу сравнения составили 12 здоровых лиц.

Исследование проводилось в соответствии с принципами Хельсинкской декларации и одобрено локальным этическим комитетом НМИЦ ТИО им. ак. В.И. Шумакова (номер протокола № 261219-1/11). Все пациенты или их представители дали письменное информированное согласие на участие в исследовании.

В соответствии с клиническими рекомендациями Российского трансплантологического общества (РТО) [16], согласующимися с рекомендациями Международного общества трансплантации сердца и легких (International Society for Heart and Lung Transplantation, ISHLT), все реципиенты сердца до и после трансплантации получали стандартное медикаментозное лечение и проходили плановое клиническое обследование, включавшее эхокардиографию, эндомиокардиальную биопсию, коронарографию и рутинные лабораторные исследования в специализированных отделениях НМИЦ ТИО им. ак. В.И. Шумакова (заведующий кардиологическим отделением – д. м. н. Н.Н....

О.П. Шевченко, С.О. Шарапченко, Д.А. Великий, О.Е. Гичкун Эрсин, Н.П. Можейко, А.О. Шевченко, С.В. Готье